普 利馬黎明

1.青海省海西州天峻縣織合瑪鄉(xiāng)獸醫(yī)站，青海天峻 817200；2.青海畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，青海湟源 812100

免疫接種的負(fù)面影響及預(yù)防

普 利1馬黎明2

1.青海省海西州天峻縣織合瑪鄉(xiāng)獸醫(yī)站，青海天峻 817200；2.青海畜牧獸醫(yī)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，青海湟源 812100

免疫接種在預(yù)防和控制畜禽類傳染病方面發(fā)揮了積極作用，同時也帶來了很多潛在的負(fù)面影響。已知的安全問題主要有注射部位不良反應(yīng)、變態(tài)反應(yīng)、免疫抑制、滅活不徹底、殘留致病力、遺傳重組、污染等，本文就免疫接種負(fù)面作用產(chǎn)生的原因、造成的影響進(jìn)行分析，并提出相應(yīng)的預(yù)防措施，供參考。

1 全身反應(yīng)

免疫接種后，接種動物常發(fā)生體溫短期內(nèi)持續(xù)上升、食欲減退、泌乳量減少、產(chǎn)蛋率下降、嘔吐、神經(jīng)癥狀、血液指標(biāo)變化、流產(chǎn)等現(xiàn)象。機(jī)體產(chǎn)生的這些反應(yīng)主要是由殘留毒素、抗原或佐劑的致熱作用引起的，可通過改進(jìn)生產(chǎn)工藝（如純化或凈化、使用新型佐劑等）減少這些問題。同時，在疫苗研制階段，可采用加強(qiáng)安全性試驗(yàn)、擴(kuò)大田間試驗(yàn)等方法，更深一步地探索這些現(xiàn)象產(chǎn)生的原因，以便找到更精確更有效的預(yù)防措施。

2 注射部位的反應(yīng)

油佐劑常引起不同表現(xiàn)形式的副反應(yīng)，包括肉芽腫、膿腫、壞死、纖維樣變性或纖維肉瘤等，這些副反應(yīng)會導(dǎo)致家畜疼痛甚至威脅其生命。如果使用佐劑乳化滅活疫苗，注射部位會產(chǎn)生腫塊，還可能產(chǎn)生急性或慢性炎癥反應(yīng)。在開發(fā)新產(chǎn)品時，應(yīng)加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室研究，使疫苗生產(chǎn)者和檢驗(yàn)者能發(fā)現(xiàn)潛在的問題，從而研發(fā)安全的產(chǎn)品。

3 變態(tài)反應(yīng)

引起變態(tài)反應(yīng)的因素，包括疫苗中殘留的動物血清、卵清蛋白、抗原或其他（如防腐劑等）。疫苗接種后的幾分鐘或幾小時接種動物可發(fā)生I型變態(tài)反應(yīng)，表現(xiàn)為虛弱、呼吸困難、嘔吐、顫抖、黏膜蒼白、流涎、肺水腫、流產(chǎn)、虛脫甚至死亡。遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)多在接種后的8～21 d發(fā)生，發(fā)病部位可在皮膚或皮下。狗在接種犬腺病毒I型疫苗后，可引起俗稱“藍(lán)眼病”的免疫綜合征，這是由抗原抗體復(fù)合物沉積導(dǎo)致角膜水腫引起的。在第三次或第四次注射疫苗后，變態(tài)反應(yīng)的危險會進(jìn)一步增強(qiáng)。在研究新型疫苗時，實(shí)驗(yàn)室條件下同一種疫苗正常劑量重復(fù)接種5次可以檢測出所有潛在的變態(tài)反應(yīng)。為了控制成品質(zhì)量，還需進(jìn)行豚鼠敏感性試驗(yàn)，可在靜脈注射牛血清之后再用1頭份的疫苗劑量進(jìn)行免疫，進(jìn)一步證明是可靠的[1]。

4 對免疫系統(tǒng)的影響

牛孢疹病毒I型（BHV-1）疫苗、牛病毒性腹瀉疫苗、犬瘟熱—犬腺病毒I型聯(lián)苗和粘液瘤病毒的SG33株已被證明能誘導(dǎo)免疫抑制。用含有犬瘟熱病毒和犬腺病毒的疫苗進(jìn)行體外免疫功能試驗(yàn)和淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)有顯著降低作用[2]。當(dāng)有病原存在時，用粘液瘤病毒的SG33株進(jìn)行免疫接種能引起兔子多種并發(fā)癥。

5 殘留致病力

病毒或細(xì)菌的致弱，傳統(tǒng)上都是通過連續(xù)傳代培養(yǎng)直至所選毒株失去致病性而進(jìn)行的。在某些情況下，低水平的毒力持續(xù)存在，并可能在廣泛使用過程中的某一特定條件下增強(qiáng)。致命的、無顯著特點(diǎn)的牛孢疹病毒I型感染已被證明與使用致弱的牛傳染性鼻氣管炎亞單位疫苗和牛副流感病毒3型疫苗接種新生牛犢有關(guān)。給奶牛接種山羊痘疫苗以后，可觀察到嚴(yán)重的全身性皮膚反應(yīng)，而且導(dǎo)致產(chǎn)奶量下降[3]。給禽接種某些傳染性喉氣管炎病毒株時，如果不使用推薦的眼部接種方式而使用噴霧接種，則會導(dǎo)致嚴(yán)重的呼吸道癥狀。正確的減毒技術(shù)應(yīng)當(dāng)用于一種新疫苗主要種子的制備。在一種新產(chǎn)品的研制階段，使用最敏感的動物進(jìn)行安全研究至關(guān)重要。接種途徑最有可能導(dǎo)致毒力返強(qiáng)，并可能發(fā)現(xiàn)在種子和終產(chǎn)品之間致弱最徹底所需要的傳代數(shù)。對所有活苗返毒能力的傳代評估應(yīng)該是完整的，要求在體外至少傳5代。使用滅活疫苗是避免這種問題的有效途徑。

6 滅活不徹底

病毒或毒素的滅活是生產(chǎn)疫苗的常用方法，在生產(chǎn)生物制品時，應(yīng)該采用適當(dāng)、有效的滅活技術(shù)。滅活不徹底常會導(dǎo)致災(zāi)難性的結(jié)果，在西歐國家曾因疫苗滅活不徹底，導(dǎo)致了幾次口蹄疫的暴發(fā)[4]。在大規(guī)模使用疫苗產(chǎn)品之前，應(yīng)按生產(chǎn)規(guī)模繪出至少3條滅活曲線，同時應(yīng)避免使用甲醛滅活。一般情況下，對每批成品進(jìn)行安全性檢測也是很重要的[5]。

7 基因重組

活疫苗株與病原致病株在特殊情況下可能會發(fā)生基因重組，重組DNA疫苗或常規(guī)疫苗毒力的返祖可能就是由基因重組引起的。而且標(biāo)記疫苗能重新獲得缺失掉的基因，這是實(shí)施撲滅計劃中出現(xiàn)的災(zāi)難性后果。在制備新的疫苗株時，應(yīng)當(dāng)采用正確的重組DNA方法，若存在疑慮，可采取疫苗株和野毒株對靶動物或其他動物同時接種的方法檢查。另外，應(yīng)盡量避免將具有高重組率的不同病毒毒株混合在同一個疫苗瓶中。

8污 染

真菌、細(xì)菌、支原體和病毒均能引起疫苗污染。由于真菌和細(xì)菌污染能改變產(chǎn)品的外觀，所以其所造成的產(chǎn)品污染容易被看見并能被質(zhì)量控制部門檢測到。支原體污染也相當(dāng)普遍，可來自于人或動物，人源污染主要是由疫苗生產(chǎn)環(huán)境差引起的，動物源污染則主要是由生產(chǎn)使用的生物材料（如血清、細(xì)胞、雞蛋等）所致。在歐洲藥典和美國聯(lián)邦法典都有檢測支原體的描述。瘟病毒是最普遍的污染源，可能導(dǎo)致免疫動物發(fā)生嚴(yán)重疾病或血清學(xué)反應(yīng)，可對非流行地區(qū)或消滅、根除計劃的實(shí)施帶來很大的麻煩[6]。必須以強(qiáng)制性手段對外來生物材料進(jìn)行質(zhì)量控制：對細(xì)胞系、動物血清、豬源胰蛋白酶、雞蛋、毒種及菌種在進(jìn)行操作之前必須進(jìn)行全面檢查。任何時候只要有可能，都應(yīng)避免使用原代細(xì)胞系；同時疫苗生產(chǎn)程序還必須合適，血清應(yīng)滅活處理，所有的操作步驟都應(yīng)該在無菌的、經(jīng)GMP認(rèn)證的環(huán)境下進(jìn)行并且符合工藝技術(shù)水平要求。田間試驗(yàn)，包括疫苗在獲得生產(chǎn)批準(zhǔn)文號之前對受試動物的集中檢測和獲得銷售許可后的疫苗接種預(yù)防，應(yīng)當(dāng)也是實(shí)施疫病預(yù)防計劃的一部分。

9小結(jié)

使用免疫接種已經(jīng)控制了多種動物傳染病，多數(shù)人都認(rèn)為接種是一個無害的過程，但認(rèn)識到接種疫苗可能會引起副反應(yīng)也很重要。預(yù)防接種是一重大醫(yī)療措施，然而能直接觀察到的免疫副反應(yīng)并不多，為了保證生物制品的安全性，生產(chǎn)商、政府審查和疫苗副反應(yīng)檢測部門和用戶之間必須加強(qiáng)合作。

[1] APLEY M，ARMSTRONG D，WRAY M.Subcutaneous injection site comparison of two multiple valent clostridial bacterin/toxoids in feedlot cattle[J].Agri Pract，1994，15（12）：9-12.

[2] BENISHEVA T，SOVOVA V，IVANOV I，et al.Comparison of methods used for detection of mycoplasma contamination in cell cultures，sere，and live virus vaccines[J].Folia Biologica，1993，39 （5）：270-276.

[3] BROWN F.Review of accidents caused by incomplete inactivation of viruses[J].Dev Biol Stand，1993（81）：103-107.

[4]CHEPURKIN A，ONUFRIEV V，MURAVEV V，et al.Anaphylactic reaction to foot and mouth disease vaccines in cattle[J].Veterinariya（Moscow），1975（5）：64.

[5]DEXTER D R，COWMAN G L，MORGAN J B，et al.Incidence of injection site blemishes in beef top sirloin butts[J].J Anim Sci，1994，72（4）：824-827.

[6]STOKKA G L，EDWARDS A J，SPIRE M F，et al.Inflammatory response to clostridial vaccines in feedlot cattle[J].J Am Vet Med Assoc，1994，204（3）：415-419.

2014-04-09

普 利，男，1977年生，本科，助理獸醫(yī)師。