郭艷茹,趙 磊
(運城學院 生命科學系,山西運城044000)
棗,鼠李科,棗屬,落葉灌木或小喬木。花小多蜜,是一種蜜源植物。棗果,長圓形,未成熟時綠色,成熟后褐紅色。有“百果之王”之稱,棗種類繁多,有新疆和田棗,山西稷山板棗,酸棗等。棗富含維生素C、蛋白質、脂肪、糖類、胡蘿卜素、B族維生素、維生素P以及磷、鈣、鐵等成分,其中維生素C的含量在果品中名列前茅,有“維生素C丸”之美稱。棗又供藥用,有養(yǎng)胃、健脾、益血、滋補、強身之效,棗仁可入藥,棗仁可以安神,為重要藥品之一。
本實驗為了更清楚的了解三種棗中的維生素C含量,[1]采用紫外分光光法和鉬藍比色法兩種方法比較測定其中的維生素C含量,直觀明了的告訴大家哪種棗的維生素C含量更高,更有食用價值,為提高人民的生活質量貢獻一份力量。
1.2.1 紫外分光光度法[2]
(1)原料處理——割取三種棗的肉質部分各10g與研缽中,加入少量混酸溶液迅速研磨至黏糊狀態(tài),移至3個50ml容量瓶中并用混酸定容。
(2)離心——轉速5000轉/min,離心15分鐘。
(3)取液——分別取上清液10ml于50ml容量瓶中,加3.00ml濃度5×10-3mol/L的硫酸銅溶液,用蒸餾水稀釋定容。
(4)處理——分別吸取10ml上述溶液于三個10ml容量瓶中定容,于 70℃恒溫水浴中反應20min,冷卻至室溫。
(5)測定——246nm處分別測定吸光度。
1.2.2 鉬藍比色法
(1)原料處理——割取三種棗的肉質部分各10g與研缽中,加入少量草酸-EDTA溶液迅速研磨至黏糊狀態(tài),移至3個50ml容量瓶中并用混酸定容。
(2)離心——轉速5000轉/min,離心15分鐘。
(3)處理——分別吸取上清液10ml于三個50ml容量瓶中,各加入1ml偏磷酸冰醋酸溶液和1.5mL5%硫酸溶液,搖勻后加3ml鉬酸銨溶液,以蒸餾水定容至50ml,靜置14min。
(4)測定——850nm處分別測定吸光度
1.2.3 回收率的測定
回收率包括絕對回收率和相對回收率。相對回收率分兩種,一種是回收實驗法,即在空白基質中加入藥品,標準曲線及時如此;另一種是加樣回收試驗法,即在已知濃度樣品中加入藥物,來和標準曲線比,標準曲線也是在基質中加藥物。相對回收率主要考察精確度。本研究采用加樣回收試驗,即實測值與原樣品含被測成分之差除以加入的純樣品量,計算得到回收率。分別吸取2ml的兩種方法的樣品液于50ml的容量瓶中,分別加入相對應的50mlVc標準溶液,做回收率實驗,計算回收率。
紫外分光光度法得到的標準曲線如圖1所示,濃度在0~60ug/ml的范圍內,Vc溶液的濃度度隨吸光度呈線性變化,線性方程為 y=0.0725x+0.0970,R2為 0.999,線性良好。[3,4]
圖1 紫外分光光度法維生素C標準曲線
用紫外分光光度法測得各樣品的吸光度,并代入線性方程求得其Vc濃度,結果如表1。
表1 樣品吸光度與維生素C濃度
由表1可知,用紫外分光光度法測得新疆和田棗維生素C的平均含量為18.58mg/100g,稷山板棗的為 10.93mg/100g,酸棗的為 70.50mg/100g,酸棗維生素C含量最高,新疆和田棗次之,稷山板棗最低。同時用紫外分光光度法測得的結果的標準差分別為 0.0346、0.0412、0.1100,說明紫外分光光度法測得的結果的離散程度較低,結果比較準確。
鉬藍比色法得到的標準曲線如圖2所示,線性方程式為 y=0.1093x+0.0081,R2為 0.991,維生素C濃度在0-1.5mg/50mL的范圍內線性良好。
用鉬藍比色法測得各樣品的吸光度,代入線性方程求得其Vc濃度,得到的結果如表2。
圖2 鉬藍比色法維生素C標準曲線
表2 樣品吸光度與維生素C濃度
由表2可知,用鉬藍比色法三次測得新疆和田棗的維生素C平均含量為22.46mg/100g,稷山板棗的為 13.57mg/100g,酸棗的為 71.14mg/100g,酸棗的維生素C含量最高,新疆和田棗次之,稷山板棗最低。同時得到的結果的標準差分別為0.0361、0.0511、0.1979,相對比較高于表3中的標準差,說明鉬藍比色法測得的結果相對比較分散,沒有紫外分光度法準確。
紫外分光光度法與鉬藍比色法測定Vc回收率試驗得到的結果見表3和表4。
表3 紫外分光光度法回收率結果
表4 鉬藍比色法回收率結果
由表3和表4比較可知,在測定棗果中的維生素C含量時,紫外分光光度法的回收率均高于鉬藍比色法的回收率,說明紫外分光光度法在實驗過程中損失的維生素C較少,準確度較高,更為精確,適合測定棗果中的維生素C含量。
(1)本研究通過分組實驗發(fā)現,酸棗Vc含量>新疆和田棗Vc含量>稷山板棗Vc含量。
(2)紫外分光光度法簡便,快捷,在246nm處線性良好,精確度高,結果令人滿意,所用藥品數量少而簡單,更適合于快速測定維生素C含量,是一種高效快捷的方法。鉬藍比色法用的實驗藥品繁多,且有一定刺激性氣味等毒害作用,影響實驗人員身體健康,且實驗精確度略低。所以綜合比較而言紫外分光光度法更實用。
[1]吳春艷.水果中維生素C含量的測定及比較[J].武漢理工大學學報,2007(3).
[2]袁葉飛,甄漢深,歐賢紅.分光光度法測定大棗中的維生素 C含量[J].安徽中醫(yī)學院學報,2006(2).
[3]陳玉鋒,莊志萍.紫外分光光度法測定橙汁中維生素C的含量[J].安徽農業(yè)科學,2011(1).
[4]鄭京平.水果、蔬菜中維生素c含量的測定一紫外分光光度快速測定方法探討[J].福建省測試技術研究所,2006(4).