，，，，，，

（1.新疆兵團(tuán)第八師獸醫(yī)站，新疆石河子832000；2.新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)總站，新疆烏魯木齊830063；3.青島瑞爾生物技術(shù)有限公司，山東青島 266100；4.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266109）

牛結(jié)核γ—干擾素ELISA檢測(cè)方法在檢疫工作中的應(yīng)用

周培校1，李 靜2，張魯安2，李 杰2，曹 瑞3，張喜悅4，李 巖2

（1.新疆兵團(tuán)第八師獸醫(yī)站，新疆石河子832000；2.新疆兵團(tuán)畜牧獸醫(yī)總站，新疆烏魯木齊830063；3.青島瑞爾生物技術(shù)有限公司，山東青島 266100；4.中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，山東青島 266109）

為評(píng)價(jià)牛?—干擾素ELISA檢測(cè)方法檢測(cè)牛結(jié)核的效果及國(guó)產(chǎn)試劑盒的檢測(cè)效果，本試驗(yàn)首先將國(guó)產(chǎn)試劑盒與Prionics試劑盒對(duì)42份相對(duì)陽(yáng)性的樣品和105份相對(duì)陰性的樣品進(jìn)行對(duì)比研究。然后對(duì)5個(gè)規(guī)?；?chǎng)的3000頭奶牛首先進(jìn)行國(guó)產(chǎn)單純結(jié)核菌素頸部皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)，3天后選取皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性和可疑及部分陰性牛共418頭，進(jìn)行牛?—干擾素試驗(yàn)。結(jié)果國(guó)產(chǎn)試劑盒對(duì)陽(yáng)性和陰性樣品的檢測(cè)敏感性和特異性分別為95.2%和100%，與Priobics試劑盒的符合率為99.3%。表明國(guó)產(chǎn)試劑盒與進(jìn)口試劑盒的檢測(cè)能力一致，牛?—干擾素檢測(cè)方法準(zhǔn)確可靠。5個(gè)牛場(chǎng)的3000頭奶牛單純結(jié)核菌素頸部皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽(yáng)性為138頭，可疑105頭。?—干擾素試驗(yàn)對(duì)418頭奶牛的檢測(cè)，其中陽(yáng)性74頭，與頸部皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)（可疑牛暫時(shí)視為陰性）的符合率為60.5%。

牛結(jié)核；?—干擾素；ELISA；檢疫

牛結(jié)核是重要的人畜共患病，近年來(lái)，我國(guó)的牛結(jié)核疫情加重，嚴(yán)重威脅了畜牧業(yè)的發(fā)展和人類的健康[1]。動(dòng)物感染結(jié)核后，其免疫主要是細(xì)胞免疫，目前的檢測(cè)也主要是針對(duì)細(xì)胞免疫。結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)是我國(guó)的國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法，但實(shí)際應(yīng)用表明該方法的敏感性和特異性均較低，而且需要兩次接觸動(dòng)物，重復(fù)檢測(cè)需要間隔至少60天[2]。在此期間科學(xué)家們也在不斷尋求其他的檢測(cè)方法，1989年Wood[3]等描述了一種簡(jiǎn)單的體外檢測(cè)方法，該方法檢測(cè)經(jīng)結(jié)核菌素（purif i ed protein derivative， PPD）刺激培養(yǎng)16-24小時(shí)的全血釋放的IFN—?，其基本原理是PPD遞呈到全血中的淋巴細(xì)胞后，感染牛分枝桿菌的細(xì)胞就能產(chǎn)生IFN—?，未感染的不會(huì)產(chǎn)生IFN—?。因此，IFN—?的檢測(cè)與牛結(jié)核的感染密切相關(guān)[4-5]。該方法用牛PPD和禽PPD分別刺激全血，敏感性和特異性都高于皮膚試驗(yàn)[6-10]。Wood等[11]在澳大利亞的研究表明該方法的敏感性為95.2%特異性為96.3%。目前，此方法已被澳大利亞、新西蘭和歐美許多國(guó)家批準(zhǔn)為正式試驗(yàn)[12-13]。OIE將此方法列為皮內(nèi)結(jié)核菌素試驗(yàn)的替代試驗(yàn)或平行試驗(yàn)，兩者同時(shí)應(yīng)用可提高敏感性，對(duì)牛結(jié)核的凈化意義重大。

近幾年，國(guó)內(nèi)不斷引進(jìn)與評(píng)價(jià)該方法在我國(guó)的應(yīng)用，并自主研發(fā)試劑盒，其中青島瑞爾生物研發(fā)的牛結(jié)核?—干擾素ELSIA試劑盒完全按照理論原理進(jìn)行研發(fā)[14]，制備并選取了兩株特異性的牛IFN—?單克隆抗體，該方法為雙單抗夾心法測(cè)定牛全血刺激上清中的牛IFN—?。ELSIA板包被牛IFN—?單克隆抗體，當(dāng)加入全血刺激上清后進(jìn)行孵育，洗滌后加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的牛IFN—?單克隆抗體，孵育。洗滌后加TMB顯色。根據(jù)牛型PPD、禽型PPD和PBS刺激上清的對(duì)比，判定是否感染牛結(jié)核。此試劑盒操作步驟與進(jìn)口試劑盒相比，操作更加簡(jiǎn)單，也縮短了操作時(shí)間。

由于進(jìn)口IFN—?檢測(cè)試劑盒價(jià)格昂貴，不利于在我國(guó)推廣使用，本研究的主要目的是對(duì)國(guó)內(nèi)試劑盒進(jìn)行對(duì)比評(píng)價(jià)并進(jìn)行初步應(yīng)用，為降低檢測(cè)成本，大力推廣?—干擾素試驗(yàn)方法提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和數(shù)據(jù)支持。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1試劑

國(guó)產(chǎn)牛結(jié)核?—干擾素ELISA試劑盒，購(gòu)自青島瑞爾生物技術(shù)有限公司；進(jìn)口牛結(jié)核?—干擾素試劑盒，瑞士Prionics公司；國(guó)產(chǎn)牛結(jié)核菌素，購(gòu)自黑龍江生物制品一廠。

1.1.2臨床檢測(cè)動(dòng)物

3000頭奶牛來(lái)自于新疆地區(qū)5個(gè)奶牛場(chǎng)，通過(guò)近幾年的檢測(cè)顯示5個(gè)牛場(chǎng)均有輕度牛結(jié)核病流行。

1.2方法

1.2.1陽(yáng)性和陰性牛刺激上清的制備

無(wú)菌采集147頭奶牛的肝素抗凝血，每份全血分別用牛PPD、禽PPD和PBS刺激，37℃+5%CO2培養(yǎng)16-24小時(shí)，收集上清。其中12頭陽(yáng)性牛剖檢檢查陽(yáng)性，并分離出牛分枝桿菌（見表1），30頭皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛來(lái)自于同一牛場(chǎng)，間隔60天重復(fù)檢測(cè)均為陽(yáng)性，但未進(jìn)行剖檢及分菌檢查，界定為相對(duì)陽(yáng)性動(dòng)物。105頭陰性牛為近三年檢測(cè)，皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，但未進(jìn)行剖檢及分菌檢查，因此未能確定為真陰性動(dòng)物，視為相對(duì)陰性動(dòng)物。

1.2.2刺激上清的ELISA試驗(yàn)

將147份刺激上清分別用Prionics試劑盒與國(guó)產(chǎn)試劑盒同時(shí)檢測(cè)。操作步驟以國(guó)產(chǎn)試劑盒為例，每孔加入100μL待檢上清室溫孵育1h。洗滌，每孔加入100μL酶標(biāo)抗體室溫孵育1小時(shí)。洗滌后每孔加入100μL底物溶液，室溫避光10min。加入終止液，測(cè)定OD450nm值。當(dāng)牛PPD-禽PPD≥0.1且牛PPD-PBS≥0.1（OD值）時(shí)判為陽(yáng)性，當(dāng)牛PPD-禽PPD＜0.1或牛PPD-PBS＜0.1（OD值）時(shí)判為陰性。

1.2.2.1國(guó)產(chǎn)試劑盒的敏感性評(píng)價(jià)

對(duì)12份真陽(yáng)性和30份皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛刺激上清進(jìn)行分析，評(píng)價(jià)試劑盒的診斷敏感性，敏感性=檢測(cè)陽(yáng)性樣品數(shù)/總陽(yáng)性樣品數(shù)。

1.2.2.2國(guó)產(chǎn)試劑盒的特異性評(píng)價(jià)

對(duì)105份近三年檢測(cè)陰性牛的樣品進(jìn)行?—干擾素試驗(yàn)，分析評(píng)價(jià)試劑盒的診斷特異性。特異性=檢測(cè)陰性樣品數(shù)/總陰性樣品數(shù)。

1.2.2.3與Prionics試劑盒的符合率

將國(guó)產(chǎn)試劑盒的檢測(cè)結(jié)果與Prionics試劑盒的結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析，符合率=（試劑盒檢測(cè)陽(yáng)性樣品為陽(yáng)性的樣品數(shù)+ 試劑盒檢測(cè)陰性樣品為陰性的樣品數(shù)）/ 樣品總數(shù)。

1.2.3臨床檢測(cè)應(yīng)用

對(duì)新疆地區(qū)5個(gè)奶牛場(chǎng)的3000頭奶牛進(jìn)行檢測(cè)，首先用結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，3天后對(duì)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)陽(yáng)性和可疑牛及部分陰性牛進(jìn)行?—干擾素試驗(yàn)。

1.2.3.1結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)

參照國(guó)標(biāo)－動(dòng)物結(jié)核病診斷技術(shù)（GB/T18645—2002）進(jìn)行。陽(yáng)性反應(yīng)：局部有明顯的炎性反應(yīng)，皮厚差大于或等于4mm。可疑反應(yīng)：局部炎性反應(yīng)不明顯； 皮厚差大于或等于2.0mm，小于4.0mm。陰性反應(yīng)：無(wú)炎性反應(yīng)；皮厚差在2.0mm以下。

1.2.3.2?—干擾素試驗(yàn)

結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)后采集陽(yáng)性、可疑和部分陰性牛的肝素抗凝全血，8小時(shí)之內(nèi)運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。全血用24孔培養(yǎng)板培養(yǎng)，每份全血分別用牛PPD、禽PPD和PBS刺激37℃+5%CO2培養(yǎng)16～24小時(shí)，收集上清。上清用國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，陽(yáng)性對(duì)照OD＞0.7且陰性對(duì)照OD＜0.15 時(shí)ELISA試驗(yàn)成立

1.2.3.3數(shù)據(jù)分析

對(duì)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。

2 結(jié)果

2.1敏感性試驗(yàn)結(jié)果

12頭陽(yáng)性牛剖檢大部分見特征性病理變化，肺部有黃豆大小的結(jié)核結(jié)節(jié)，結(jié)節(jié)剖檢可見米黃色干酪樣，淋巴結(jié)腫大，剖檢可見干酪樣病變等。其中2號(hào)牛與7號(hào)牛未見明顯病變。12頭牛組織分菌均為牛分枝桿菌，經(jīng)分型鑒定為同一SPOLIGOTYPING型[15]。國(guó)產(chǎn)試劑盒檢測(cè)結(jié)果為11頭陽(yáng)性，1頭陰性，敏感性為91.7%，結(jié)果見表1。

表1 12頭陽(yáng)性牛的皮膚試驗(yàn)結(jié)果與?—干擾素結(jié)果

30份皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛，?—干擾素檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性29頭，敏感性為96.7%。結(jié)合12頭陽(yáng)性牛的結(jié)果，對(duì)42頭陽(yáng)性牛的敏感性為95.2%。

2.2特異性試驗(yàn)結(jié)果

對(duì)105份皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陰性樣品進(jìn)行檢測(cè)，?—干擾素結(jié)果均為陰性，特異性為100%。

2.3與Prionics試劑盒的符合率

對(duì)147份樣品進(jìn)行國(guó)產(chǎn)試劑盒與Prionics試劑盒的對(duì)比分析，12份菌株分離陽(yáng)性樣品的結(jié)果完全一致，30份皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛的對(duì)比結(jié)果為Prionics陽(yáng)性28，國(guó)產(chǎn)陽(yáng)性29。Prionics結(jié)果陰性的2頭牛，其中1頭國(guó)產(chǎn)試劑盒結(jié)果也為陰性。兩頭牛的結(jié)果見表2。

表2 2頭皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性牛的?—干擾素試驗(yàn)對(duì)比結(jié)果

105頭皮內(nèi)結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性牛，兩種試劑盒的?—干擾素試驗(yàn)均為陰性，特異性為100%。通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)對(duì)比分析，兩個(gè)試劑盒的符合率為99.3%，結(jié)果見表3。

表3國(guó)產(chǎn)試劑盒與Prionics試劑盒的對(duì)比結(jié)果

2.4臨床檢測(cè)結(jié)果

對(duì)新疆地區(qū)5個(gè)奶牛場(chǎng)的3000頭奶牛進(jìn)行檢測(cè)，首先用結(jié)核菌素皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)結(jié)果陽(yáng)性、可疑牛及部分陰性牛進(jìn)行?—干擾素試驗(yàn)，結(jié)果對(duì)比如下。

3000頭奶牛，單純結(jié)核菌素頸部皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性138頭，可疑105頭，陽(yáng)性率為4.6%。

對(duì)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的138頭陽(yáng)性奶牛，105頭可疑奶牛和陰性的175頭奶牛共418頭進(jìn)行?—干擾素試驗(yàn)復(fù)檢。其中陽(yáng)性74頭。若將禽型OD-牛型OD＞0且牛型OD值-PBS值≥0.1判為禽型感染，則禽陽(yáng)性為27頭。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛有超過(guò)一半?—干擾素試驗(yàn)檢測(cè)為陰性。其中皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陰性和可疑牛中也有部分牛?—干擾素試驗(yàn)檢測(cè)為陽(yáng)性。若將皮膚試驗(yàn)可疑牛視作陰性，則兩者的符合率為60.5%，結(jié)果見表4。

表4 ?—干擾素試驗(yàn)與單純結(jié)核菌素頸部皮膚試驗(yàn)結(jié)果的比較

3 討論

牛結(jié)核是一種慢性進(jìn)行性傳染病，臨床癥狀不典型。在感染后期可出現(xiàn)包括體弱、厭食、消瘦、呼吸困難、淋巴結(jié)腫大和咳嗽等癥狀，可初步判斷。通過(guò)尸體剖檢，病理組織學(xué)檢查及細(xì)菌學(xué)技術(shù)可確診，但不能用于大規(guī)模的牛結(jié)核病的流行病學(xué)調(diào)查。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)是普查牛結(jié)核使用最為廣泛的方法，該法價(jià)格低廉，但缺乏敏感性和特異性。?—干擾素方法是近20年來(lái)評(píng)價(jià)為最敏感，最特異的牛結(jié)核病診斷方法，已經(jīng)得到全世界的認(rèn)可，在OIE手冊(cè)上也是作為皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的替代或平行試驗(yàn)[16]。

本研究首先對(duì)青島瑞爾生物技術(shù)有限公司研發(fā)的牛?—干擾素試劑盒與prionics的試劑盒進(jìn)行了對(duì)比研究。對(duì)147份經(jīng)驗(yàn)證或多次試驗(yàn)證明為陽(yáng)性或陰性的樣品進(jìn)行檢測(cè)，國(guó)產(chǎn)試劑盒與prionics的試劑盒表現(xiàn)出了高度的一致性。對(duì)12份陽(yáng)性樣品的檢測(cè)，結(jié)果11份陽(yáng)性，對(duì)30份兩次變態(tài)反應(yīng)均為陽(yáng)性的樣品檢測(cè)，結(jié)果29份陽(yáng)性，試劑盒的敏感性為95.2%。對(duì)105份連續(xù)3年檢測(cè)為陰性的牛全血刺激培養(yǎng)，結(jié)果均為陰性，相對(duì)特異性為100%。與瑞士Prionics試劑盒的符合率為99.3%。分析?—干擾素檢測(cè)陰性的陽(yáng)性樣品，發(fā)現(xiàn)牛型和禽型PPD刺激的結(jié)果OD值均比較高，因此我們分析可能為混合感染，這與Amadori[13]的研究結(jié)果相似，遺憾的是我們并未分離非結(jié)核分枝桿菌。鑒于此種情況，我們可適當(dāng)?shù)卣{(diào)整判定標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)牛型和禽型OD值遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于陰性對(duì)照，但牛型—禽型≤0.1時(shí)，可判定牛型＞禽型為陽(yáng)性，或?yàn)榛旌细腥??？傮w而言，國(guó)產(chǎn)試劑盒具有很高的敏感性，特異性，完全能夠滿足檢測(cè)的需求。

本研究中對(duì)皮膚試驗(yàn)陽(yáng)性的138頭奶牛，105頭可疑奶牛和陰性的175頭奶牛共418頭用?—干擾素試驗(yàn)檢測(cè)，其中陽(yáng)性74頭。若將禽型OD—牛型OD＞0且牛型OD值-PBS值≥0.1判為禽型感染，則禽陽(yáng)性為27頭。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陽(yáng)性牛有超過(guò)一半?—干擾素試驗(yàn)檢測(cè)為陰性。其中皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)陰性和可疑牛中也有部分牛?—干擾素試驗(yàn)檢測(cè)為陽(yáng)性。不考慮皮膚試驗(yàn)可疑的情況（視為陰性），?—干擾素禽陽(yáng)性視為陰性，總體的?—干擾素陽(yáng)性數(shù)量低于皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)的陽(yáng)性數(shù)量，這與張喜悅[17]之前的研究非常吻合，與wood的研究結(jié)果也是一致的。但在一些國(guó)家的研究中得出了相反的結(jié)果，?—干擾素的陽(yáng)性率高于皮膚試驗(yàn)（Neill等，Domingo等，O.R. Gonza?lez Llamazares等[18-19]）。這可能是由于感染流行情況不同造成的。

從檢測(cè)數(shù)據(jù)可以看出部分皮內(nèi)變態(tài)陽(yáng)性牛呈現(xiàn)出假陽(yáng)性結(jié)果，這主要是由于皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)所應(yīng)用的免疫學(xué)診斷試劑結(jié)核菌素純蛋白衍生物（PPD）是多種抗原的混合物，所含的抗原為致病性分枝桿菌、環(huán)境分枝桿菌及BCG所共有，由于交叉反應(yīng)的存在，其非特異性的存在在所難免；若單獨(dú)用該方法檢出的PPD陽(yáng)性牛既實(shí)行“檢疫—撲殺”策略，勢(shì)必誤殺部分假陽(yáng)性牛；同時(shí)該法敏感性較低，而且與感染動(dòng)物接觸的單位個(gè)體會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性反應(yīng)，又因?yàn)樵谝卟≡缙陔A段和急性感染病例會(huì)發(fā)生假陰性反應(yīng)，這樣又可能忽略部分感染牛。

IFN-?試驗(yàn)的應(yīng)用也受到一定的限制，該法基于結(jié)核分枝桿菌細(xì)胞免疫原理，需要活的淋巴細(xì)胞，必須在采血后8小時(shí)內(nèi)培養(yǎng)，且需要有關(guān)的儀器設(shè)備并要求在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行，對(duì)基層牛場(chǎng)的使用有所限制，所以通常將其作為皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)的輔助試驗(yàn)，對(duì)皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)檢出的陽(yáng)性和可疑的牛進(jìn)行復(fù)檢。該法對(duì)皮內(nèi)變態(tài)試驗(yàn)后2—28天內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)其敏感性和特異性不受影響，采樣后48h內(nèi)即可出結(jié)果，對(duì)牛結(jié)核病的確診和流行病學(xué)調(diào)查提供了新的方法。此外，限制該法在國(guó)內(nèi)推廣的另一主要原因在于其價(jià)格昂貴，國(guó)外試劑盒檢測(cè)單份樣品的價(jià)格高達(dá)120余元，對(duì)于我國(guó)大規(guī)模用于檢疫難以實(shí)現(xiàn)。因此，國(guó)產(chǎn)試劑盒的誕生在很大程度上彌補(bǔ)了這一缺陷。

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生豬屠宰監(jiān)督管理職責(zé)已全部劃入農(nóng)業(yè)部

中國(guó)獸醫(yī)信息網(wǎng) 近日，商務(wù)部與農(nóng)業(yè)部完成了生豬屠宰監(jiān)督管理職責(zé)移交工作。根據(jù)第十二屆全國(guó)人大一次會(huì)議表決通過(guò)的《國(guó)務(wù)院機(jī)構(gòu)改革和職能轉(zhuǎn)變方案》（簡(jiǎn)稱《方案》）和中央編辦有關(guān)文件，商務(wù)部的生豬屠宰監(jiān)督管理職責(zé)劃入農(nóng)業(yè)部，包括起草相關(guān)法律法規(guī)草案，制定配套規(guī)章、規(guī)范；制定行業(yè)發(fā)展規(guī)劃；負(fù)責(zé)行業(yè)統(tǒng)計(jì)；負(fù)責(zé)屠宰環(huán)節(jié)質(zhì)量安全監(jiān)督管理，組織開展監(jiān)督檢查、技術(shù)鑒定等活動(dòng)。近日，商務(wù)部與農(nóng)業(yè)部完成了生豬屠宰監(jiān)督管理職責(zé)移交工作。

農(nóng)業(yè)和食品安全方面的專家分析，生豬飼養(yǎng)、屠宰、肉品流通和質(zhì)量監(jiān)管等分屬商務(wù)、衛(wèi)生、農(nóng)業(yè)、工商、食品、質(zhì)量等多個(gè)部門管理，責(zé)任不清，執(zhí)行力分散，此次調(diào)整或有助于類似”八個(gè)部門管不好一頭豬”頑疾的解決。

The Application of Gamma Interferon ELISA in Bovine Tuberculosis Detection

Zhou Peixiao1， Li Jing2， Zhang Luan2， Li Jie2， Cao Rui3， Zhang Xiyue4， Li Yan2
（1.The 8 Division Vet station of Xinjiang Production and Construction Corps，Shi Hezi 832000； 2.Xinjiang Production and ConstructionCorps Animal Husbandry and Veterinary Station，Urumqi 830063； 3.Qingdao Real BIOTechnology Co.，Ltd， Qing Dao 266100； 4. China Animal Health and Epidemiology Center， Qing Dao 266109）

In order to evaluate the effectiveness of gamma interferon test to detect bovine tuberculosis and the detection effect of a domestic kit， a comparative study was done between Prionics kits and the domestic kits using 42 positive samples and 105 negative samples. Then 3000 cattle from fi ve intensive farms were fi rst tested with single skin test， and 3 days later， 418 cattle including skin test positive and suspicious ones and some negative ones were tested with gamma interferon test. Results showed that the sensitivity and specif i city of the domestic kit were 95.2% and 100% respectively. and the coincidence was 99.3% with the Prionics kit，suggesting that the gamma interferon test was accurate and reliable for detection of bovine tuberculosis， and the domestic kit was as good as the Prionics kit. There were 138 skin test positive cattle and 105 suspicious cattle from 3000 tested cattle. In gamma interferon test， 74 /418 cattle were detected positive， and the coincidence rate was 60.5% with skin test （suspicious cattle considered as negative）.

bovine tuberculosis；?—interferon；ELISA；quarantine inspection

S858.23文獻(xiàn)識(shí)別碼：B

：1005-944X（2014）01-0067-05

李巖