諶韋洪

珠海市人民醫(yī)院急診科，廣東珠海519000

Nrf2在膿毒癥急性肝損傷（ALI）中的作用機(jī)制研究

諶韋洪

珠海市人民醫(yī)院急診科，廣東珠海519000

目的探討與分析Nrf2（核因子相關(guān)因子）在ALI（膿毒癥急性肝損傷）中的作用機(jī)制，旨在為膿毒癥的防治提供指導(dǎo)依據(jù)。方法將2010年9月—2013年9月于我院接受治療的40例膿毒癥急性肝損傷患者作為研究對(duì)象，以數(shù)字隨機(jī)法將其分為對(duì)照組與觀察組各20例，于術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)采集患者血清樣本，分離血清，同時(shí)采集患者病理組織，測(cè)定其Nrf2表達(dá)水平。結(jié)果①觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對(duì)來(lái)說(shuō)比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對(duì)照組的（262.43±6.96）IU/L，P＜0.05；②觀察組患者不同時(shí)間段內(nèi)病理組織中Nrf2表達(dá)水平相較對(duì)照組而言，2 d后為（0.31±0.02）uL，升高幅度較為顯著，P＜0.05。結(jié)論Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中有其關(guān)鍵的抗氧化應(yīng)激作用，可將其作為膿毒癥防治的重要判定指標(biāo)。

核因子；膿毒癥；急性肝損傷；Nrf2

膿毒癥主要由感染相關(guān)因子所引起，是全身炎癥的綜合反應(yīng)，是復(fù)雜的全身性病理過程，其發(fā)病機(jī)制相對(duì)來(lái)說(shuō)比較復(fù)雜，同時(shí)其臨床治療也存在一定的難度[1]。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)報(bào)告顯示，我國(guó)最近幾年來(lái)，膿毒癥的發(fā)病率與死亡率呈逐年上升的趨勢(shì)，且臨床領(lǐng)域尚未總結(jié)出針對(duì)膿毒癥急性肝損傷的有效干預(yù)措施[2]?；诖?，為進(jìn)一步研究Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中的作用機(jī)制，明確其表達(dá)規(guī)律，我院將最近幾年來(lái)收治的40例ALI患者作為研究對(duì)象，進(jìn)行了前瞻性研究分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2010年9月—2013年9月于我院接受治療的40例膿毒癥急性肝損傷患者作為研究對(duì)象。按照隨機(jī)數(shù)字法將其分為對(duì)照組與觀察組各20例。對(duì)照組患者中男性12例，女性8例；年齡在47～82歲之間，平均年齡（62.3±2.3）歲。觀察組患者中男性14例，女性6例；年齡在44～79歲之間，平均年齡（61.2±3.3）歲。納入研究的兩組患者均符合膿毒癥急性肝損傷疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，且兩組患者在性別、年齡等一般資料的對(duì)比上并無(wú)明顯差異（P＞0.05），具有較強(qiáng)的可比性。

1.2 一般方法

對(duì)觀察組患者于術(shù)后在其腹腔內(nèi)注入姜黃素，嚴(yán)格根據(jù)患者體質(zhì)量確定給藥劑量，一般為100 mg/kg。對(duì)對(duì)照組則注射同等劑量的生理鹽水。分別于術(shù)后6 h、12 h、1 d、2 d采集患者血清，從其肋間心尖搏動(dòng)最強(qiáng)處進(jìn)針采血，并分離血清，測(cè)定其肝功能狀況。同時(shí)在手術(shù)過程中，取患者腹腔內(nèi)部所分裂的肝臟病理組織，置入

溫度在-80℃的環(huán)境下存儲(chǔ)，并選用蛋白質(zhì)印跡法測(cè)定患者肝臟組織中的Nrf2表達(dá)水平。同時(shí)取病理組織的10%，使用中性甲醛固定，行石蠟包埋，切片，染色后，觀察其肝臟組織的病理改變情況，同時(shí)記錄不同時(shí)間段兩組患者血清內(nèi)ALT（丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶）水平的變化情況。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

選用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 19.0對(duì)上述匯總數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料選用±s）表示，組間對(duì)比進(jìn)行t檢驗(yàn)，以P＜0.05時(shí)為有顯著性差異和統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者不同時(shí)間段血清內(nèi)ALT水平比較

兩組患者血清內(nèi)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平伴隨著時(shí)間的推移在逐漸升高，但相較對(duì)照組患者而言，觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對(duì)來(lái)說(shuō)比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對(duì)照組的（262.43±6.96）IU/L，兩組數(shù)據(jù)相較，差異顯著，P＜0.05，詳細(xì)情況如表1所示。

表1 兩組患者不同時(shí)間段血清內(nèi)ALT水平比較（±s）

表1 兩組患者不同時(shí)間段血清內(nèi)ALT水平比較（±s）

組別例數(shù)ALT(IU/L) 6h 12h 1d2d對(duì)照組觀察組20 20 tP 87.22±4.12 65.65±2.42 43.247＜0.05 122.74±5.41 99.11±2.21 52.697＜0.05 184.14±5.32 133.38±3.74 46.214＜0.05 262.43±6.96 162.44±6.52 56.247＜0.05

2.2 兩組患者不同時(shí)間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較

觀察組自6 h后，病理組織中Nrf2蛋白水平逐漸上升，但在1 d后有所下降，觀察組患者不同時(shí)間段內(nèi)病理組織中Nrf2表達(dá)水平相較對(duì)照組而言，升高幅度較為顯著，P＜0.05，詳細(xì)情況如表2所示。

表2 兩組患者不同時(shí)間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較（s）

表2 兩組患者不同時(shí)間段病理組織中Nrf2蛋白水平比較（s）

組別例數(shù)Nrf2蛋白（uL）6h 12h 1d2d觀察組對(duì)照組20 20 tP 0.51±0.02 0.24±0.02 49.286＜0.05 0.91±0.01 0.51±0.02 31.287＜0.05 0.87±0.02 0.11±0.02 56.924＜0.05 0.31±0.02 0.21±0.01 36.698＜0.05

3 討論

膿毒癥常見于嚴(yán)重創(chuàng)傷、燒傷、休克及大型外科手術(shù)并發(fā)癥中，同時(shí)也是引起多臟器官受損的主要原因。據(jù)相關(guān)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，嚴(yán)重性膿毒癥所致死亡率高達(dá)55%，且呈現(xiàn)顯著逐年上升的態(tài)勢(shì)[4]。因此，強(qiáng)化對(duì)膿毒癥的研究對(duì)降低疾病所致死亡率有十分重要的臨床意義。

Nrf2屬于在轉(zhuǎn)錄因子中的一種，是氧化應(yīng)激的敏感性感受器，同時(shí)也是人體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的重要轉(zhuǎn)錄因子，是抗氧化應(yīng)急的重要部分。一般在正常情況下，Nrf2主要以異源二聚體形式存于人體細(xì)胞質(zhì)中，并在激活后，與其抑制物相關(guān)的蛋白分離，并進(jìn)入人體細(xì)胞核內(nèi)，與Maf蛋白產(chǎn)生合成反應(yīng)，并構(gòu)成異二聚體，激活病理基因的表達(dá)[5]。但人體內(nèi)Nrf2表達(dá)水平失衡，缺失或出現(xiàn)激活障礙，則可能加重細(xì)胞毒性，導(dǎo)致細(xì)胞功能出現(xiàn)障礙，甚至凋亡[6-7]。

在本組研究中，兩組患者血清內(nèi)丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶水平伴隨著時(shí)間的推移在逐漸升高，但相較對(duì)照組患者而言，觀察組患者血清內(nèi)ALT水平升高幅度較低，改善情況相對(duì)來(lái)說(shuō)比較明顯，觀察組患者在治療2 d后血清內(nèi)ALT水平降低至（162.44±6.52）IU/L，明顯低于對(duì)照組的（262.43±6.96）IU/L，兩組數(shù)據(jù)相較，差異顯著。觀察組患者病理組織中Nrf2蛋白水平，在術(shù)后1d內(nèi)明顯上生，同時(shí)在24 h后，有緩慢下降的表現(xiàn)，同時(shí)提示，激烈的氧化應(yīng)激反應(yīng)可能對(duì)患者的內(nèi)源性保護(hù)系統(tǒng)產(chǎn)生影響，降低患者細(xì)胞核內(nèi)Nrf2水平，使其轉(zhuǎn)錄活性降低。同時(shí)由于膿毒癥患者肝臟組織內(nèi)積累了大量的毒素，兩者共同作用于患者的炎癥細(xì)胞，則可能導(dǎo)致不同種類的炎癥介質(zhì)產(chǎn)生表達(dá)反應(yīng)，進(jìn)而增加了人體肝組織中Nrf2的表達(dá)。由此可知，Nrf2在膿毒癥急性肝損傷中有其關(guān)鍵的抗氧化應(yīng)激作用，可將其作為膿毒癥防治的重要判定指標(biāo)。

[1]胡勇,張愛華,黃曉欣，等.Nrf2和Keapl mRNA表達(dá)在燃煤型砷中毒肝損傷中作用[J].中國(guó)公共衛(wèi)生,2012,28(6):780-782.

[2]邱萍,劉平平,孔德松，等.復(fù)方銀杏制劑對(duì)急性酒精性肝損傷小鼠的防護(hù)作用及其機(jī)制[J].中國(guó)藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志,2014(3):373-379.

[3]許偉華,Tobias A Beyer,楊法林，等.膽總管結(jié)扎所致肝損傷中Nrf2對(duì)細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)和基因表達(dá)的影響[J].山東大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）,2010,48 (10):39-43,72.

[4]孫健.Nrf2與肝細(xì)胞凋亡在非酒精性脂肪性肝病小鼠中的作用及相互關(guān)系[D].山東大學(xué),2011.

[5]李曉沖.小鼠NAFLD模型建立及Nrf2缺失對(duì)肝臟中CYP2A5表達(dá)的影響[D].東北農(nóng)業(yè)大學(xué),2013.

[6]黃中偉.膿毒癥大鼠肺損傷演變與炎癥因子變化關(guān)系[C].//2013北京協(xié)和急診醫(yī)學(xué)國(guó)際高峰論壇論文集，2013:458-458.

[7]李晶菁,張霞,陳瑜，等.N rf2在膿毒癥大鼠肝組織中的表達(dá)及姜黃素的干預(yù)作用[J].重慶醫(yī)學(xué),2013(24):2873-2876.

Nrf2 in acute liver injury in sepsis(ALI)study in the mechanism of action

ZHAN Weihong
Emergency department of Zhuhai People's Hospital，Guangdong 519000，China

ObjectiveTo investigate and analysis of Nrf2(nuclear factor ALI(factor)on acute liver injury in sepsis sepsis)in the mechanism of action,and provide guidance to prevention and treatment for sepsis.Methods40 cases of acute liver damage in patients with sepsis from 2010 September to 2013 September in our hospital as the research object,by randomly divided into control group and observation group with 20 cases in each group,at different postoperative time points were collected serum samples collected at the same time,separation of serum,pathological tissue of patients,determination the expression level of Nrf2.ResultsThe observation group ALT level in the sera of patients with increasing amplitude was low,to improve the situation is relatively obvious,the patients in observation group were reduced,serum levels of ALT after 2D treatment to(162.44±6.52)IU/L,significantly lower than the control group(262.43±6.96)IU/L,P＜0.05.The observation group patients in different period of pathological tissue levels of Nrf2 expression compared with the control group,2D was(0.31±0.02)uL,increased significantly,P＜0.05.ConclusionNrf2 is the key of oxidative stress in acute liver injury in sepsis,which can be used as an important index to judge the prevention and treatment of sepsis.

Nuclear factor;Sepsis;Acute liver injury;Nrf2

R394

A

1672-5654（2014）09（c）-0003-02

2014-07-02）

諶韋洪（1963-），男，本科，副主任醫(yī)師，研究方向：急診醫(yī)學(xué)。