羅 紅

中國醫(yī)科大學(xué)四平醫(yī)院病理科，吉林 四平 136000

EGFR在150例子宮內(nèi)膜病變中表達的研究

羅 紅

中國醫(yī)科大學(xué)四平醫(yī)院病理科，吉林 四平 136000

目的本研究檢測表皮生長因子受體家族中EGFR在子宮內(nèi)膜腺癌、不典型增生子宮內(nèi)膜及復(fù)雜增生子宮內(nèi)膜及正常增生期子宮內(nèi)膜等病變中的表達意義，并分析了EGFR與子宮內(nèi)膜腺癌之間的關(guān)聯(lián)性。

表皮生長因子受體；子宮內(nèi)膜病理學(xué)；免疫組織化學(xué)

研究顯示在多種腫瘤組織和相關(guān)血清表達中EGFR均顯示異常［1］。同時其和與腫瘤的轉(zhuǎn)移存在一定的相關(guān)性［2］。目前我國對于EGFR與子宮內(nèi)膜癌之間的聯(lián)系尚無從良性子宮內(nèi)膜病變進行等級相關(guān)研究的報道。本文針對EGFR與子宮內(nèi)膜腺癌之間的發(fā)生發(fā)展進行了如下研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2010年～2014年我院就診的婦科患者，所有患者均通過病理診斷確診為子宮內(nèi)膜癌。150例患者，CH（子宮內(nèi)膜復(fù)雜型增生）、NE（正常增生期的子宮內(nèi)膜組織）各30例，AH（子宮內(nèi)膜非典型增生）患者30例，EC（子宮內(nèi)膜癌）患者60例。150例患者的治療方法主要為手術(shù)方式，排除激素治療患者、放療患者以及化療患者。根據(jù)婦產(chǎn)科FIGO臨床分級標(biāo)準(zhǔn)，可將150例患者分為Ⅰ期的患者17例、Ⅱ期的患者19例、Ⅲ期的患者14例、Ⅳ期的患者10例；組織學(xué)分級，G1（高分化）、G2（中分化）、G3（低分化）分別為25 例、18 例、17例；所有患者均存在子宮內(nèi)膜病變情況。

1.2 檢測方法

標(biāo)本采集后，應(yīng)保持相同的保存環(huán)境，免疫組化試劑盒為PV9000試劑盒，準(zhǔn)備工作完成后即可進行染色。對患者進行免疫組化學(xué)檢測時，可采用以下方法進行，具體步驟為：先對切片進行包埋處理，一般可選擇石蠟進行包埋，將包埋厚度控制在3 μm范圍內(nèi)；然后采用梯度乙醇及二甲苯對切片進行水化處理和脫蠟處理，采用過氧化氫3%凈化室內(nèi)空氣，保持10 min的相同室溫，以此降低內(nèi)源性過氧化物酶活性；采用PH值為9.0的緩沖液EDTA進行抗原修復(fù)，保持高壓高溫狀態(tài)，滴加鼠抗人EGFR單克隆抗體（1∶50），室溫保濕盒中孵育60 min；先后滴加放大系統(tǒng)試劑1和試劑2，分別在室溫保濕孵育20 min和30 min，上述步驟均采用PBS進行漂洗。當(dāng)DAB出現(xiàn)明顯的顯色反應(yīng)后，復(fù)染蘇木素，然后進行脫水處理，待呈透明狀后，進行封片處理。設(shè)置分組，分別設(shè)為陰性組及陽性組，陰性組為PBS患者，陽性組為陽性患者。

1.3 評分方法

經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn)，EGFR染色主要呈棕黃色，陽性定位主要包括細(xì)胞漿及細(xì)胞膜兩種。選擇雙盲法進行檢測時，如隨機選擇高倍鏡視野10個，腫瘤細(xì)胞及腺上皮陽性細(xì)胞數(shù)不少于1000個，那可分為以下幾種評分方法［3］：第一種，按照顯色反應(yīng)進行評分，根據(jù)是否出現(xiàn)顯色現(xiàn)象、顯色深淺等情況評價染色的強度。無顯色反應(yīng)為0分，淺黃色、棕黃色、棕褐色分別為1分、2分、3分；第二種，按照陽性細(xì)胞數(shù)量算出比例，然后進行評分。陰性為0分，陽性細(xì)胞小于或等于10%為1分，陽性細(xì)胞為11%至50%為2分，陽性細(xì)胞為51%至75%為3分，陽性細(xì)胞大于75%為4分。兩種評分之間相乘多得結(jié)果為每例患者的染色積分，若患者則積分大于或等于3分，則可評價為免疫反應(yīng)陽性。

1.4 統(tǒng)計處理

本研究采用統(tǒng)計軟件SPSS14.0進行數(shù)據(jù)分析，采用Spearman等級相關(guān)分析方法，檢驗水準(zhǔn)α=0.01。

2 結(jié)果

2.1 EGFR 在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達情況

EGFR 在NE組、CH組、AH組及EC組的表達呈現(xiàn)遞增趨勢，具有顯著的等級相關(guān)性，spearman等級相關(guān)系數(shù)為0.579，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表1。

2.2 EGFR對于各類型子宮內(nèi)膜病變的表達意義

在本組60例患者中，經(jīng)統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)，當(dāng)患者病理分期出現(xiàn)增高現(xiàn)象時，EGFR陽性率也會隨之增高，當(dāng)患者的腫瘤分化出現(xiàn)降低現(xiàn)象時，EGFR陽性率會隨之降低，分化程度可分為G1、G2、G3以及病理分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的陽性表達spearman等級相關(guān)系數(shù)分別為0.460和0.336，其表達增加有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），見表2。

2.3 EGFR 在CH及NE中的表達

見圖A與圖B，在AH及CH中的表達見圖C與圖D。

A.正常增生；B.復(fù)雜增生；C.非典型增生；D.子宮內(nèi)膜腺癌

3 討論

EGFR屬于原癌基因c-erbB1中的一種表達產(chǎn)物，可以說是表皮生長因子受體中的一份子。對于細(xì)胞來說，在細(xì)胞生理過程中ER家族可以說是占據(jù)了極為重要的角色。EGFR的分布較為廣泛，尤其是在哺乳動物身上，無論是其廣上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，還是膠質(zhì)細(xì)胞和角質(zhì)細(xì)胞等，在細(xì)胞表面都存在EGFR，因為對于細(xì)胞來說，EGFR信號通路有著極為重要的作用，其低于細(xì)胞的生長、增殖及分化等有一定的影響［3］。本文研究顯示，當(dāng)正常子宮內(nèi)膜出現(xiàn)轉(zhuǎn)化傾向時，EGFR會出現(xiàn)逐漸上升現(xiàn)象。且比EC、AH、CH、NE之間的EGFR對比有統(tǒng)計學(xué)差異，并有等級相關(guān)性（P＜0.01）。有研究表明EGFR的異常表達可能與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)［4］?？勺鳛榕袛嘧訉m內(nèi)膜癌浸潤和轉(zhuǎn)移的重要指標(biāo)。EGFR 在低分化腺癌組的表達明顯高于高分化腺癌組（P＜0.01）。

表1 EGFR在NE、CH、AH、EC各組中的表達

表2 EGFR陽性率與腫瘤分化程度

綜上所述，在子宮內(nèi)膜腺癌病變過程中，該蛋白具有明顯的促癌作用，是腫瘤惡化的原因之一。相關(guān)研究顯示抑制EGFR基因表達可部分逆轉(zhuǎn)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)基因的表達。臨床使用EGFR抑制劑可有效地抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖。

［1］孟麗榮，李田，李小毛． PTEN和EGFR與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生和發(fā)展研究的最新進展［J］．腫瘤，2010，10（5）：162-163．

［2］楊唯寧，艾志宏，滕銀成． EGFR過表達對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響［J］．現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展，2011，04（10）：208-209．

［3］王卓然，宋巍，孫壯狀． TGF-β1與EGFR在子宮內(nèi)膜癌患者內(nèi)膜組織中的表達及意義［J］．中國優(yōu)生與遺傳雜志，2010，14（7）：68-69．

［4］陳晶晶，陳柯，王曉秋． 子宮內(nèi)膜癌組織中Id-1、VEGF-C和EGFR的表達及臨床意義［J］．臨床與實驗病理學(xué)雜志，2010，04（2）：102-103．

R737.33

B

1674-9316（2014）09-0061-03

10.3969/J.ISSN.1674-9316.2014.09.035

方法采用免疫組化染色法，對正常EC（子宮內(nèi)膜癌組織）、AH（子宮內(nèi)膜非典型增生組織）、CH（子宮內(nèi)膜復(fù)雜性增生組織）及NE（正常增生期子宮內(nèi)膜組織）共150例中的EGFR 表達進行檢測。

結(jié)果EGFR在EC、AH、CH、NE這幾種子宮內(nèi)膜病變中具有陽性表達率逐漸升高且存在等級相關(guān)性，spearman等級相關(guān)系數(shù)為0.579，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。EGFR 的表達與腫瘤的組織分化程度、病理分期等級相關(guān)，spearman等級相關(guān)系數(shù)分別為0.460和0.336，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）。

結(jié)論EGFR 與子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)生及腫瘤的病理學(xué)行為相關(guān)，過度表達提示預(yù)后不良。