文 靜，付 研

尾加壓素Ⅱ(urotensinⅡ，U-Ⅱ)最早是從魚尾部下垂體中分離出的調(diào)節(jié)肽[1]，近來已從人體中克隆出來，并發(fā)現(xiàn)人體內(nèi)一種孤立的G蛋白偶聯(lián)受體GPR14是其特異性受體。人尾加壓素Ⅱ(hU-Ⅱ)是迄今人體內(nèi)最強(qiáng)的縮血管活性肽[2-4]。hU-Ⅱ水平與心血管疾病如高血壓、充血性心力衰竭等有關(guān)，而最近研究表明，2型糖尿病(T2DM)患者血漿中hU-Ⅱ水平升高。早期診斷糖尿病血管并發(fā)癥并予以積極治療可延緩病情進(jìn)展，提高生活質(zhì)量。本研究旨在通過檢測糖尿病腎病患者血漿中hU-Ⅱ水平，研究T2DM腎病患者血漿hU-Ⅱ水平隨病情進(jìn)展而發(fā)生的變化，以探討hU-Ⅱ在糖尿病腎病病理生理機(jī)制中的作用及其臨床意義，并為糖尿病腎病的早期診斷提供參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取北京同仁醫(yī)院南區(qū)綜合內(nèi)科2008年10月—2009年5月住院的T2DM患者66例。其中男34例、女32例，年齡(63.4±9.0)歲。均符合1999年世界衛(wèi)生組織T2DM分型診斷標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 排除標(biāo)準(zhǔn) (1)患有自身免疫系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病、急性或慢性感染性疾病，各種病因?qū)е碌男牧λソ摺?2)陳舊性心肌梗死病史，心電圖示心肌缺血或冠狀動(dòng)脈造影示動(dòng)脈狹窄或閉塞。(3)既往有腦梗死或腦出血病史，經(jīng)CT或MRI證實(shí)存在腦梗死或腦出血改變。(4)留取標(biāo)本時(shí)有糖尿病急性并發(fā)癥，行血液透析，服用激素或腎毒性藥物。

1.3 方法

1.3.1 臨床參數(shù)測定 (1)一般資料采集：包括性別、年齡、體質(zhì)量、病程、血壓，冠心病(coronary heart disease,CHD)、腦血管疾病(cerebrovascular disease，CVD)病史。(2)生化指標(biāo)測定：隔夜禁食10～12 h后清晨空腹抽取肘靜脈血，分別測定空腹血糖(FPG)、血肌酐(Scr)、糖化血紅蛋白(HbA1c)。(3)腎小球?yàn)V過率〔eGFR(ml/min)〕=〔(140-年齡)×體質(zhì)量×(0.85女性)〕/〔72×Scr〕，Scr單位為mg/dl，年齡單位為歲，體質(zhì)量單位為kg。(4)留取24 h尿液，二甲苯防腐，測定24 h尿清蛋白總量，計(jì)算尿清蛋白排泄率(urinary albumin excretion rates,UAER)。

1.3.2 hU-Ⅱ的測定 抽取晨起空腹肘靜脈血 2 ml，注入含有 10% EDTA Na230 μl 和抑肽酶40 μl的試管中，混勻，4 ℃，3 000 r/min，離心10 min分離血漿，離心半徑為10 cm。經(jīng)酸化、洗脫、干燥、重溶等處理步驟后提取并采用放射免疫法分析測定血漿hU-Ⅱ。所用標(biāo)準(zhǔn)品為hU-Ⅱ，其放射活性的特異性與hU-Ⅱ有100%的交叉反應(yīng)，與多種心血管活性肽均無交叉反應(yīng)。

2 結(jié)果

2.1 不同尿蛋白水平組血漿hU-Ⅱ水平的變化 按照UAER將入選患者分為3組，A組：UAER<20 μg/min，為尿蛋白正常；B組：UAER 20～200 μg/min，為初期糖尿病腎??；C組：UAER>200 μg/min，為臨床糖尿病腎病。C組患者血漿hU-Ⅱ水平高于A、B組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；B組hU-Ⅱ水平高于A組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表1)。

Table1 Comparison of plasma hU-Ⅱ levels in different levels of urinary protein groups

組別例數(shù)年齡(歲)病程(年)血漿hU-Ⅱ(ng/L)A組2357.9±5.75.8±5.427.26±4.58 B組2059.7±8.99.6±4.634.83±4.82* C組2361.7±7.212.2±5.148.26±4.86*△F值3.1092.4735.498P值0.1340.1620.034

注：與A組比較，*P<0.05；與B組比較，△P<0.05；hU-Ⅱ=人尾加壓素-Ⅱ

2.2 不同腎功能組血漿hU-Ⅱ水平的變化 按照eGFR將入選患者分為3組，a組：eGFR>80 ml/min，為腎功能正常；b組：eGFR 51～80 ml/min，為腎功能不全代償期；c組：eGFR 20～50 ml/min，為腎功能不全失代償期。c組患者血漿hU-Ⅱ水平分別高于a、b組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；b組hU-Ⅱ水平高于a組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，見表2)。

Table2 Comparison of plasma hU-Ⅱ levels in different renal function groups

組別例數(shù)年齡(歲)病程(年)血漿hU-Ⅱ(ng/L)a組1957.3±6.15.0±3.626.78±4.86 b組2460.3±6.98.5±4.233.36±3.92* c組2362.4±7.712.8±6.248.95±7.43*△F值3.4212.8706.032P值0.1050.1730.036

注：與a組比較，*P<0.05；與b組比較，△P<0.05

2.3 相關(guān)性分析 對(duì)血漿hU-Ⅱ水平與年齡、病程、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、FPG、HbA1c、Scr、UAER、eGFR進(jìn)行Pearson相關(guān)分析，結(jié)果顯示hU-Ⅱ與eGFR呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，與FPG、HbA1c、Scr、UAER無直線相關(guān)性(P>0.05，見表3)。

表3 血漿hU-Ⅱ與其他臨床指標(biāo)的相關(guān)分析

注：eGFR=腎小球?yàn)V過率，F(xiàn)PG=空腹血糖，HbA1c=糖化血紅蛋白，Scr=血肌酐，UAER=尿清蛋白排泄率

3 討論

近年來，糖尿病已成為一種嚴(yán)重威脅人類健康常見的、多發(fā)的慢性代謝性疾病，糖尿病血管并發(fā)癥是T2DM的主要臨床特征之一，目前普遍認(rèn)為是多因素共同作用的結(jié)果。本研究就T2DM腎病患者血漿hU-Ⅱ水平的變化進(jìn)行了初步探討。

多基因和環(huán)境因素參與了糖尿病的發(fā)病，胰島素抵抗是T2DM的特征之一，而血管因子的紊亂參與了胰島素的抵抗。有研究發(fā)現(xiàn)，T2DM患者血漿中hU-Ⅱ水平升高，hU-Ⅱ可能不僅與糖尿病內(nèi)皮細(xì)胞損傷有關(guān)[5-6]，而且還與糖代謝有關(guān)，是一個(gè)有效的胰島素抑制肽，其作用可能通過GPR14受體作用在胰腺的β細(xì)胞來實(shí)現(xiàn)。

Totsune等[7]發(fā)現(xiàn)T2DM患者血漿及尿中hU-Ⅱ水平均明顯升高，且隨著腎功能的減退，血漿及尿中hU-Ⅱ水平明顯增加。由此推斷T2DM本身是導(dǎo)致血漿hU-Ⅱ水平升高的一個(gè)因素，在T2DM患者中腎衰竭也是血漿hU-Ⅱ水平升高的另一個(gè)因素。Langham等[8]和Shenouda等[9]研究顯示，在糖尿病患者的組織染色中hU-Ⅱ及其受體基因表達(dá)明顯增強(qiáng)，主要定位于腎小管上皮細(xì)胞；Matsushita等[10]認(rèn)為腎臟富含hU-Ⅱ的mRNA，并有分泌、排泄hU-Ⅱ的作用。近來還發(fā)現(xiàn)hU-Ⅱ具有強(qiáng)烈的促有絲分裂作用[11]。由此可以推斷，hU-Ⅱ及其受體基因在糖尿病腎病患者腎臟的大量表達(dá)上調(diào)可能直接參與其細(xì)胞外基質(zhì)增加的病理過程。hU-Ⅱ及其受體共同定位于腎小管上皮細(xì)胞，與腎小管在糖尿病腎病患者腎功能障礙中的主要病理作用相符[12]。

本研究顯示，血漿hU-Ⅱ與eGFR相關(guān)，前者隨后者水平的降低而升高；以UAER和eGFR進(jìn)行分組，結(jié)果顯示隨著糖尿病腎病的進(jìn)展，血漿hU-Ⅱ水平逐漸升高。同時(shí)該研究中患者血漿hU-Ⅱ水平與FPG、HbA1c、Scr、UAER無直線相關(guān)性。Totsune等[7]認(rèn)為，腎功能不全患者血漿hU-Ⅱ水平的升高可能由于腎臟排泄hU-Ⅱ減少而造成，但由于許多外周器官可能是血漿循環(huán)中hU-Ⅱ的來源，故不能排除在慢性腎衰竭時(shí)hU-Ⅱ產(chǎn)生增加的可能性[13-14]。

Langham等[8]發(fā)現(xiàn)血漿hU-Ⅱ水平在尚未出現(xiàn)清蛋白尿階段即已升高，而UAER依據(jù)尿清蛋白情況對(duì)糖尿病腎病程度進(jìn)行評(píng)估較hU-Ⅱ而言靈敏度低，本研究分別以UAER和eGFR分組，發(fā)現(xiàn)hU-Ⅱ水平變化一致。因此，把血漿hU-Ⅱ檢測與UAER、eGFR等指標(biāo)在臨床中聯(lián)合應(yīng)用，有助于早期確診糖尿病腎病。

本研究因臨床工作限制，研究例數(shù)較少、試驗(yàn)條件有限，如何在實(shí)際工作中更為準(zhǔn)確有效的測定和應(yīng)用hU-Ⅱ評(píng)價(jià)糖尿病腎病進(jìn)展，以及其對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變及大血管病變的相關(guān)影響仍有待進(jìn)一步探討。

綜上所述，血漿hU-Ⅱ水平可能參與糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展過程，把血漿hU-Ⅱ檢測與UAER、eGFR等指標(biāo)在臨床中聯(lián)合應(yīng)用，有助于早期確診糖尿病腎病，并可監(jiān)測其發(fā)展和評(píng)估預(yù)后，有利于糖尿病腎病的早期防治。

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