海祺旻，沈德良，劉琮琳，張金盈

冠心病(coronary heart disease，CHD)的病理基礎(chǔ)是全身大、中等動脈發(fā)生粥樣硬化，多種炎性和免疫反應(yīng)參與其中[1]。血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)是一種與冠心病有關(guān)的新的炎性標(biāo)志物，而且可能直接參與動脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展，能獨(dú)立預(yù)測冠脈事件[2]。但PAF在不同類型冠心病中的表達(dá)水平及其與冠脈病變嚴(yán)重程度的關(guān)系尚不清楚，本研究通過檢測各型冠心病患者血漿PAF水平，探討其表達(dá)水平及與冠脈Gensini積分的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年7—12月因疑似冠心病在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院住院并行冠脈造影術(shù)(CAG)者140例，其中男71例(50.7%)，女69例(49.3%)；年齡32～85歲，平均(57±10)歲。依據(jù)冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]，將受試者分為冠心病組(108例)和對照組(32例)。再將冠心病組分為：(1)不穩(wěn)定型心絞痛(unstable angina pectoris，UAP)組(41例)，入選標(biāo)準(zhǔn)：典型心絞痛癥狀；發(fā)作時心電圖ST段暫時性壓低>1 mm或抬高>3 mm，緩解后，迅速恢復(fù)正?；蚪咏＃恍募∶刚＃痪嗄┐伟l(fā)作24 h以內(nèi)；排除梗死后心絞痛、瓣膜病、肥厚性心肌病、貧血等。(2)穩(wěn)定型心絞痛(stable angina pectoris，SAP)組(37例)，入選標(biāo)準(zhǔn)：勞累性心絞痛，發(fā)作性質(zhì)在2個月內(nèi)無改變或運(yùn)動試驗(yàn)陽性。(3)急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)組(30例)，入選標(biāo)準(zhǔn)：持續(xù)胸痛30 min以上；至少相鄰兩個導(dǎo)聯(lián)ST段抬高超過0.2 mV；血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)及肌鈣蛋白T水平升高超過正常值水平上限2倍以上。所有受試者均接受心電圖、胸部X線、超聲心動圖、肝腎功能等檢查。排除瓣膜性心臟病、心肌病、惡性腫瘤、急慢性感染性疾病、嚴(yán)重肝腎功能不全等疾病。完善吸煙史、飲酒史、高血壓病史等相關(guān)信息。AMI組CAG前臨時一次性服用氯吡格雷400 mg、阿司匹林300 mg，其余受試者均于CAG前12 h服用氯吡格雷400 mg、阿司匹林300 mg。所有受試者未曾服用影響PAF水平的藥物。

1.2 實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)檢測方法 AMI組和UAP組患者于入院后即刻真空采血針穿刺靜脈抽取第一管靜脈血1.8 ml，置于含有0.2 ml 2%乙二胺四乙酸(EDTA)的塑料管中，立即送檢驗(yàn)科檢測總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)等；取第二管靜脈血1.8 ml，置于含有0.2 ml 2% EDTA的塑料管中，立即4 ℃，離心半徑為16.1 cm，3 000 r/min離心10 min，取上清液(血漿)，置于-80 ℃冰箱中待測PAF。采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定PAF水平，嚴(yán)格按照試劑盒的程序操作。試劑盒為武漢伊萊瑞特生物科技有限公司產(chǎn)品，PAF單位為μg/L，檢測范圍為0.31～20.00 μg/L，板內(nèi)、板間差異系數(shù)<10%。SAP組和對照組于入院次日清晨空腹采肘靜脈血，檢測方法同上。

1.3 CAG方法 經(jīng)肱動脈采用Judkins法，多體位投照，取左前斜位、右前斜位及頭腳軸狀位投影觀察冠脈病變，分別對右冠狀動脈、左主干、左前降支、左回旋支等冠狀動脈血管的阻塞病變以通用直徑法進(jìn)行評價。造影結(jié)果由同1名經(jīng)驗(yàn)豐富的?？漆t(yī)師在不知受試者分組情況下判讀評定。冠脈Gensini積分以前降支、回旋支、右冠狀動脈為基本單位，左主干病變視為雙支[4]。

2 結(jié)果

2.1 冠心病組與對照組一般資料的比較 冠心病組與對照組的吸煙、高血壓、糖尿病、高脂血癥、腦血管病發(fā)生率及TC、TG、HDL、LDL水平間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其余指標(biāo)間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

表1 冠心病組與對照組的一般資料比較

注：TC=總膽固醇，TG=三酰甘油，HDL=高密度脂蛋白，LDL=低密度脂蛋白；*為χ2值，余檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量值為t值

2.2 冠心病組與對照組及冠心病各亞組間PAF水平比較 對照組、冠心病組的PAF水平分別為(6.27±1.35)、(12.26±2.02)μg/L，兩組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-12.734，P<0.05)。SAP組、UAP組、AMI組的PAF水平分別為(10.61±1.97)、(13.01±1.48)、(13.31±1.36)μg/L，3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=19.517，P<0.05)，亞組間兩兩比較顯示：UAP組與SAP組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-7.433，P<0.05)，AMI組與SAP組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-7.760，P<0.05)，UAP組與AMI組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(q=-0.898，P>0.05)。

2.3 PAF水平與Gensini積分及檢測指標(biāo)的相關(guān)性 冠心病組和對照組血漿PAF水平與Gensini積分呈正相關(guān)，同時與TC、HDL、LDL水平呈正相關(guān)(P<0.05，見表2)。

表2 PAF水平與Gensini積分及檢測指標(biāo)的相關(guān)性

Table2 Correlation between PAF and Gensini score and detection indexes

Gensini積分TCTGHDLLDLr值 0 642 0 6470 262 0 297 0 718P值<0 05<0 050 110<0 05<0 05

注：PAF=血小板活化因子

3 討論

近年來研究表明，炎性反應(yīng)在動脈粥樣硬化從發(fā)生發(fā)展到最終斑塊表面破裂并發(fā)血栓形成的各個階段中均起著重要作用[5]。在此過程中，多種炎性因子參與其中，通過不同的生化途徑發(fā)揮作用[6-8]。

PAF是一種具有生物活性的內(nèi)源性磷脂，具有多種潛在生物學(xué)作用，其化學(xué)本質(zhì)為1-0-烷基-2-乙?；?Sn-甘油-3-磷脂膽堿[9]。PAF由中性粒細(xì)胞、血小板、肥大細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞等分泌產(chǎn)生，以其前體存在，當(dāng)上述細(xì)胞受到炎性因子、免疫復(fù)合物、自由基等刺激時合成分泌[10]。PAF由乙酰水解酶(PAF-AH)降解[11]，代謝產(chǎn)物為無生物活性的PAF前體[12]。

研究發(fā)現(xiàn)，PAF主要通過兩方面參與粥樣硬化過程。一方面，PAF可以誘導(dǎo)血小板的活化，PAF是迄今發(fā)現(xiàn)的體內(nèi)最強(qiáng)的血小板活化刺激因子[13]，可與分布在血小板質(zhì)膜外側(cè)表面的特異性受體血小板活化因子受體(PAF receptor)結(jié)合[14-15]，從而通過G蛋白介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)通路激活GTP酶[16]和磷酸肌醇特異性的磷脂酶C(PLC)，誘導(dǎo)血小板活化，使其在冠狀動脈內(nèi)黏附、聚集、釋放炎性遞質(zhì)，通過炎性途徑和免疫途徑促進(jìn)冠狀動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展[17]。另一方面，PAF能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞的轉(zhuǎn)化。Váradi等[18]研究發(fā)現(xiàn)，氧化損傷時，內(nèi)皮細(xì)胞會產(chǎn)生PAF，后者能引起巨噬細(xì)胞產(chǎn)生超氧化物陰離子，促使LDL氧化變性為氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)，從而直接損傷內(nèi)皮組織，誘導(dǎo)單核細(xì)胞滲入內(nèi)皮下分化為巨噬細(xì)胞，分化的巨噬細(xì)胞又通過“清道夫受體”(scavenger receptors)吞噬ox-LDL，轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞[19-20]。PAF乙酰水解酶能夠降解PAF，保護(hù)載脂蛋白B-100不被氧化變性，從而拮抗了動脈粥樣硬化發(fā)展[21]。

本研究結(jié)果表明，冠心病患者的PAF水平高于對照者；不同類型冠心病患者的血漿PAF水平也不同，UAP組、AMI組均高于SAP組。而且，血漿PAF水平與冠脈病變嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，PAF水平隨冠狀動脈狹窄程度加重而升高，提示PAF參與了冠狀動脈粥樣硬化形成和發(fā)展階段，并可作為冠心病臨床診斷和判斷冠心病病變嚴(yán)重程度的依據(jù)。本研究還發(fā)現(xiàn)不同類型冠心病患者的血脂水平也存在差異，且血脂水平與PAF水平也呈正相關(guān)，這與既往對高血脂促進(jìn)冠脈粥樣硬化的認(rèn)識是一致的，同時提示血脂與PAF在粥樣硬化及血管壁炎性反應(yīng)中可能存在相互作用，這還有賴于進(jìn)一步的研究證實(shí)。

綜上所述,PAF通過多條途徑參與冠脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展，是冠脈粥樣硬化的危險因素。PAF有可能作為預(yù)測冠心病嚴(yán)重程度的標(biāo)志物，這為判斷并評估由冠脈粥樣硬化導(dǎo)致的冠脈狹窄提供了新的觀測指標(biāo)。

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