羅 婭

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，四川 雅安 625014）

5 個(gè)費(fèi)約果品種果實(shí)多酚類(lèi)物質(zhì)含量及其抗氧化能力比較

羅 婭

（四川農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，四川 雅安 625014）

以5 個(gè)新西蘭主栽費(fèi)約果品種為試材，比較不同費(fèi)約果品種果實(shí)多酚類(lèi)物質(zhì)含量和抗氧化能力的差異。結(jié)果表明：費(fèi)約果果實(shí)富含多酚類(lèi)物質(zhì)，特別是原花青素，且具有較強(qiáng)的抗氧化能力。不同基因型和果實(shí)不同部分（果皮、果肉和果漿）總酚、總黃酮、原花青素含量和抗氧化能力均有顯著差異。在5 個(gè)品種中，“Anatoki”具有最高的總酚、總黃酮、原花青素含量和鐵離子還原能力，且費(fèi)約果果實(shí)的果皮積累總酚、總黃酮和原花青素最多，其次是果肉，果漿含量最少。

費(fèi)約果；果實(shí)；多酚物質(zhì)；鐵離子還原能力

費(fèi)約果（Feijoa sellowiana Berg.）是桃金娘科多年生亞熱帶常綠灌木果樹(shù)[1]，原產(chǎn)南美東北部和東部地區(qū)，目前在美國(guó)加利福尼亞和新西蘭廣泛栽培[1-2]。費(fèi)約果成熟果實(shí)會(huì)散發(fā)出類(lèi)似鳳梨和番石榴或者鳳梨和草莓的混合香味，因此也被稱(chēng)為“鳳梨番石榴”[3]。

費(fèi)約果生物活性物質(zhì)的藥理學(xué)研究表明，費(fèi)約果提取物中因含有各種精油成分、黃酮、原花青素和異黃酮等酚類(lèi)化合物，具有抗菌、抗癌、抗氧化和促進(jìn)免疫能力的潛在應(yīng)用價(jià)值[4-10]。費(fèi)約果果實(shí)由果皮、果肉和果漿三部分組成，關(guān)于果實(shí)生物活性物質(zhì)的研究主要集中在單一或個(gè)別品種可食用部分果漿中，因此難以揭示品種間和果實(shí)各組成部分的差異性。此外，關(guān)于費(fèi)約果原花青素的定量分析還未見(jiàn)公開(kāi)報(bào)道[11]?；谝陨蠁?wèn)題，本研究以5 個(gè)新西蘭主栽費(fèi)約果品種的果皮、果肉和果漿為材料，比較其總酚、總黃酮、原花青素含量和抗氧化能力的差異，旨在為新西蘭與我國(guó)新引進(jìn)的費(fèi)約果資源的深度開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

供試費(fèi)約果品種為“Anatoki”、“Kakariki”、“Barton”、“Unique”和“Apollo”，于2011年4月從新西蘭Matamata果園購(gòu)后立即運(yùn)往新西蘭梅西大學(xué)采后實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行隨機(jī)分組，每組至少有5 個(gè)果實(shí)，重復(fù)3 組。每組果實(shí)分別進(jìn)行人工刨皮和剝離果肉的工作，收集果皮、果肉和果漿，并分別稱(chēng)質(zhì)量，用液氮速凍后再進(jìn)行凍干處理，稱(chēng)質(zhì)量后置于－30 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

2,4,6-三吡啶基三嗪（2,4,6-tris（2-pyridyl）-striazine，TPTZ） 美國(guó)Sigma公司；槲皮素、沒(méi)食子酸、福林酚 新西蘭梅西大學(xué)食品、營(yíng)養(yǎng)和人類(lèi)健康實(shí)驗(yàn)室。

1.2 方法

1.2.1 果實(shí)質(zhì)量的測(cè)定

用電子天平分別對(duì)5 個(gè)品種果實(shí)單果以及果實(shí)果皮、果肉和果漿各部分的鮮質(zhì)量和干質(zhì)量進(jìn)行稱(chēng)量。

1.2.2 果實(shí)生物活性物質(zhì)的提取

取0.2 g樣品置于80%丙酮溶液中，室溫下抽提1 h后，4 500×g冷凍離心10 min，收集上清液用于總酚、總黃酮含量和鐵離子還原能力（ferric reducing ability of plasma，F(xiàn)RAP）的測(cè)定。

1.2.3 總酚含量的測(cè)定

參照Molan等[12]的方法進(jìn)行測(cè)定。在96 孔酶標(biāo)板中分別加入12.5 μL上清液，250 μL 2% Na2CO3，室溫反應(yīng)5 min后，加入12.5 μL 50%福林-酚，室溫反應(yīng)30 min。用ELX 808酶標(biāo)儀測(cè)定650 nm波長(zhǎng)處吸光度，計(jì)算總酚含量，以g/100 g沒(méi)食子酸為單位（以干質(zhì)量計(jì)，下同）。

1.2.4 總黃酮含量的測(cè)定

參照Chang等[13]的方法進(jìn)行測(cè)定。在96 孔酶標(biāo)板中分別加入30 μL上清液，90 μL 95%乙醇，6 μL 10% AlCl3，6 μL 1 mol/L CH3COOK和168 μL去離子水后，室溫反應(yīng)40 min。用ELX 808酶標(biāo)儀測(cè)定415 nm波長(zhǎng)處的吸光度，計(jì)算總黃酮含量，以g/100 g槲皮素為單位（以干質(zhì)量計(jì)，下同）。

1.2.5 FRAP的測(cè)定

參照Benzie等[14]的方法，略作修改。在96 孔酶標(biāo)板中分別加入8.5 μL上清液，275 μL TPTZ工作液，然后放于37 ℃的恒溫箱中避光反應(yīng)30 min 。用ELX 808酶標(biāo)儀測(cè)定595 nm波長(zhǎng)處的吸光度，計(jì)算FRAP值，以g/100 g FeSO4·7H2O為單位（以干質(zhì)量計(jì)，下同）。

1.2.6 原花青素含量的測(cè)定

1.2.6.1 原花青素的提取

參照Boateng等[9]的方法略作修改。取0.1 g樣品置于2 mL 70%丙酮溶液中室溫下抽提1 h后，超聲波抽提20 min，4 500×g、4 ℃離心10 min，收集上清液并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀去除丙酮，然后加水定容至3 mL用于原花青素的測(cè)定。

1.2.6.2 原花青素含量的測(cè)定

取0.5 mL提取液，分別加入3.0 mL丁醇-鹽酸（95∶5，V/V）溶液，0.1 mL 2%鐵鹽試劑（30 g/L硫酸鐵銨溶于2 mol/L HCl中），充分混勻，用錫箔紙包裹試管后沸水浴60 min。冷卻至室溫，測(cè)定550 nm波長(zhǎng)處的吸光度。

為預(yù)防樣品吸光度大于0.6，抽提液用70%的丙酮進(jìn)行稀釋。原花青素含量以g/100 g無(wú)色花青素為單位（以干質(zhì)量計(jì)，下同），計(jì)算公式如下：

1.3 數(shù)據(jù)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)使用Minitab 15.0軟件進(jìn)行ANOVA統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)結(jié)果以±s表示，并進(jìn)行鄧肯氏新復(fù)極差多重比較分析（P＜0.05），實(shí)驗(yàn)重復(fù)3 次。

2 結(jié)果與分析

2.1 5 個(gè)費(fèi)約果品種果實(shí)構(gòu)成特點(diǎn)

表1 5 個(gè)費(fèi)約果品種果皮、果肉和果漿組成比例Table1 Proportion of skin, cortex and locule in feijoa fruits from five varieties

由表1可知，果肉是費(fèi)約果果實(shí)的主要組成部分，分別占果實(shí)鮮質(zhì)量和干質(zhì)量的60.50%～70.33%和62.00%～70.50%。果皮和果漿所占果實(shí)比例以及果實(shí)的單果鮮質(zhì)量受基因型的影響顯著，在5 個(gè)品種中，“Apollo”果實(shí)鮮質(zhì)量最大（97.39 g），其次是“Anatoki”，“Kakariki”和“Unique”，最后是“Barton”。“Apollo”果實(shí)的特點(diǎn)是果皮較?。r質(zhì)量比例13.17%，干質(zhì)量比例16.33%），果肉較厚（鮮質(zhì)量比例70.33%，干質(zhì)量比例70.50%）；而“Barton”的果實(shí)特點(diǎn)與之相反，具有較厚的果皮（鮮質(zhì)量比例19%，干質(zhì)量比例22.33%）和較少的果肉（鮮質(zhì)量比例62.5%，干質(zhì)量比例61.83%）；其余3 個(gè)品種果實(shí)組成特點(diǎn)較為相似。盡管5 個(gè)品種果實(shí)大小存在顯著差異，然而主要食用部分果漿所占果實(shí)比例卻無(wú)顯著差異，說(shuō)明消費(fèi)者或加工者從5 個(gè)品種中均可獲得相同含量的果漿。

2.2 費(fèi)約果多酚類(lèi)物質(zhì)含量與鐵離子還原能力分析

5 個(gè)費(fèi)約果品種果皮、果漿和果肉中的總酚、總黃酮、原花青素含量和FRAP值見(jiàn)表2。為深入了解基因型與不同果實(shí)部位多酚類(lèi)物質(zhì)含量和鐵離子還原能力間的差異，利用一般線性模型對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)一步分析（表3、4），分析結(jié)果表明費(fèi)約果是一種富含多酚的水果，且基因型和果實(shí)不同部位顯著影響費(fèi)約果總酚、總黃酮、原花青素含量和抗氧化能力。在5 個(gè)品種中，“Anatoki”總酚含量（10.31 g/100 g）、原花青素含量（0.83 g/100 g）和FRAP值（16.56 g/100 g）均為最高；“Apollo”、“Barton”、“Kakariki”和“Unique”總酚含量差異不顯著，范圍在4.90～6.21 g/100 g之間；“Barton”總黃酮含量最高（0.23 g/100 g）（表3）。果實(shí)不同部位中，果皮富含總酚、總黃酮和原花青素，且具有較高的抗氧化能力，其次是果肉，最后是果漿（表4）。

表2 5個(gè)費(fèi)約果品種果實(shí)不同部位生物活性物質(zhì)含量和抗氧化能力比較Table2 Comparison of phenolic compounds and ferric reducing activity among different organs and among five feijoa cultivars

表3 5 個(gè)費(fèi)約果品種全果生物活性物質(zhì)含量和抗氧化能力比較Table3 Comparison of phenolic compounds and ferric reducing activity among five feijoa cultivars

表4 費(fèi)約果不同果實(shí)部位多酚類(lèi)物質(zhì)含量和抗氧化能力比較Table4 Comparison of phenolic compounds and ferric reducing activity among skin, cortex and locule

2.3 FRAP值與全果總酚、總黃酮和原花青素含量的相關(guān)性分析

基于所有測(cè)定材料的相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)（表5），抗氧化能力（FRAP值）與全果總酚、總黃酮和原花青素含量均呈極顯著正相關(guān)（P＜0.01）。FRAP值與“Apollo”、“Anatoki”、“Kakariki”、“Barton”和“Unique”全果總酚含量的相關(guān)系數(shù)分別為0.96、0.86、0.96、0.98和0.95。除“Anatoki”的FRAP值與原花青素含量的相關(guān)系數(shù)高于FARP值和總酚含量、總黃酮含量的相關(guān)系數(shù)外，其余品種FRAP值與原花青素以及總黃酮含量的相關(guān)系數(shù)均低于FRAP與總酚含量的相關(guān)系數(shù)，說(shuō)明在其余4 個(gè)費(fèi)約果品種中，總酚對(duì)抗氧化能力的貢獻(xiàn)率最高，其次是原花青素，而總黃酮的貢獻(xiàn)率最低。

表5 FRAP值與總酚、總黃酮和原花青素含量的相關(guān)性分析Table5 Correlation analysis between FRAP and total phenolics, total flavonoids or procyanidines

3 討 論

越來(lái)越多的消費(fèi)者開(kāi)始關(guān)注飲食與健康之間的關(guān)系，特別是新鮮果蔬，因其富含生物活性物質(zhì)和具有較高的抗氧化能力，在保持人類(lèi)健康和預(yù)防慢性疾病上發(fā)揮著重要作用?，F(xiàn)已有大量關(guān)于熱帶和亞熱水果如芒果、番石榴、枇杷、石榴、黑莓、藍(lán)莓和獼猴桃等生物活性物質(zhì)的研究[15-19]，然而關(guān)于不同費(fèi)約果品種與果實(shí)組成的多酚類(lèi)物質(zhì)含量與鐵離子還原能力差異還未見(jiàn)報(bào)道。

本研究表明，基因型和果實(shí)部位顯著影響費(fèi)約果多酚類(lèi)物質(zhì)含量和鐵離子還原能力。新西蘭5 個(gè)主栽品種中，“Apollo”具有較高的多酚類(lèi)物質(zhì)含量和鐵離子還原能力。總酚、總黃酮和原花青素等物質(zhì)主要集中在費(fèi)約果果實(shí)的果皮中，其次是果肉，果漿積累最少。這種在果實(shí)果皮中積累大量酚類(lèi)物質(zhì)的特征在莓類(lèi)、棗、柑橘、蘋(píng)果、葡萄和番茄等水果中也有體現(xiàn)[20-21]。

費(fèi)約果是一種富含酚類(lèi)物質(zhì)（1.76～11.77 g/100 g，以干質(zhì)量計(jì)）的水果，其總酚含量與Haminiuk等[22]在評(píng)價(jià)費(fèi)約果的總酚含量（5.442 g/100 g，以干質(zhì)量計(jì)）中具有可比性。從現(xiàn)有文獻(xiàn)資料分析，具有較高酚類(lèi)物質(zhì)含量的水果包括草莓（0.18～0.32 g/100 g，以鮮質(zhì)量計(jì)）、藍(lán)莓（0.077～0.820 g/100 g，以鮮質(zhì)量計(jì)）和黑莓（0.17～0.31 g/100 g，以鮮質(zhì)量計(jì)）[18,23-28]。結(jié)合表1和表2，5 個(gè)費(fèi)約果品種果皮、果肉和果漿總酚含量分別在0.93～2.98 g/100 g，0.55～1.35 g/100 g和 0.17～0.53 g/100 g（均以鮮質(zhì)量計(jì)）之間（數(shù)據(jù)未列出），由此說(shuō)明費(fèi)約果果皮總酚含量遠(yuǎn)高于草莓、藍(lán)莓和黑莓，果肉總酚含量高于草莓和黑莓，與藍(lán)莓相當(dāng)或高于藍(lán)莓，而果漿總酚含量與草莓、藍(lán)莓和黑莓相當(dāng)。因此，從營(yíng)養(yǎng)學(xué)角度來(lái)看，食用整個(gè)水果是一個(gè)更好的選擇。在拉丁美洲，人們就食用整個(gè)水果[11]。

原花青素，又稱(chēng)縮合單寧，是一類(lèi)通過(guò)植物類(lèi)黃酮次生代謝途徑合成的多酚類(lèi)化合物，因具有較強(qiáng)的抗氧化能力和對(duì)人類(lèi)健康的保護(hù)作用而受到廣泛關(guān)注。本研究表明，費(fèi)約果原花青素含量范圍在0.23～1.4 g無(wú)色花青素/100 g之間，由于費(fèi)約果原花青素的定量報(bào)道非常有限，因此很難在同一物種間進(jìn)行比較。具有高含量原花青素的水果主要是葡萄（0.001～0.16 g兒茶素/100 g，以干質(zhì)量計(jì)）、草莓（0.002～0.05 g兒茶素/100 g，以干質(zhì)量計(jì)）和蘋(píng)果（0.017～0.05 g兒茶素/100 g，以干質(zhì)量計(jì)）[29]。費(fèi)約果原花青素高效液相色譜（high performance liquid chromatography，HPLC）的精確定量與定性分析有待進(jìn)一步研究。

植物材料抗氧化能力的測(cè)定可采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH）自由基清除率、Trolox等價(jià)抗氧化能力（trolox equivalent antioxidant capacity，TEAC）、氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity，ORAC）和FRAP等方法，其中FRAP法因方法簡(jiǎn)單、反應(yīng)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用于樣品總抗氧化能力的測(cè)定。本研究中FRAP與總酚、總黃酮和原花青素密切相關(guān)，這在很多研究中都有類(lèi)似報(bào)道[30]。當(dāng)然也有FRAP與酚類(lèi)物質(zhì)不相關(guān)的，這主要取決于植物材料多酚類(lèi)物質(zhì)的組成。根據(jù)生物活性物質(zhì)與抗氧化能力的關(guān)系，研究認(rèn)為費(fèi)約果果實(shí)最主要的抗氧化物質(zhì)是總酚和原花青素。

在新西蘭，商業(yè)種植的費(fèi)約果約有一半進(jìn)入加工領(lǐng)域，制成果汁、酒精飲料和果醬，另一半則進(jìn)入鮮果銷(xiāo)售市場(chǎng)[31]。工業(yè)加工和食用均會(huì)造成大量廢棄物（果皮和大部分果肉），然而本研究表明這些果實(shí)廢棄物仍含有大量有價(jià)值的生物活性物質(zhì)，如總酚、總黃酮和原花青素，因此合理地分離和利用這些物質(zhì)，并將其應(yīng)用于食品和保健產(chǎn)業(yè)是可行的，且能帶來(lái)經(jīng)濟(jì)效益。另外，盡管5 個(gè)品種果實(shí)大小不一，但是可食用部分占果實(shí)的比例卻無(wú)顯著差異，消費(fèi)者或加工者可以從5個(gè)品種中獲得相同含量的果漿，而大果型品種“Apollo”則會(huì)產(chǎn)生更多的廢棄物。

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Polyphenolic Compounds and Antioxidant Activity of Fruits from Five Feijoa Varieties

LUO Ya
(College of Horticulture, Sichuan Agricultural University, Ya’an 625014, China)

Fruits from f ve feijoa varieties were investigated for differences in polyphenolic compounds and antioxidant activity. The results showed that feijoa fruits contained abundant phenolics, especially proanthocyanidins, and displayed high ferric reducing ability. Signif cant differences were noticed among varieties and among fruit organs. Among 5 varieties,‘Anatoki’ had the highest contents of total phenolics, total f avonoids, proanthocyanidins and ferric reducing ability. Among different fruit organs, skin accumulated the highest total phenols, total f avonoids and proanthocyanidins, followed in order by cortex and locule.

feijoa; fruit; polypenolic compounds; ferric reducing activity

S668.4

A

1002-6630（2014）23-0088-04

10.7506/spkx1002-6630-201423018

2013-12-31

四川農(nóng)業(yè)大學(xué)“雙支計(jì)劃”項(xiàng)目（06370501）；四川農(nóng)業(yè)大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目（6309215）；四川農(nóng)業(yè)大學(xué)研究生創(chuàng)新基金項(xiàng)目（04313004）

羅婭（1979 —），女，副教授，博士，主要從事果樹(shù)生物技術(shù)研究。E-mail：luoya945@163.com