袁慶艷，張源明，張邱兵，章桂銘，郁 潔，朱 健

高血壓是一種常見的心血管疾病，高血壓及其并發(fā)癥嚴重威脅著人們健康，但其發(fā)病機制仍未完全明確。最新研究表明，高血壓是一種慢性低度炎性反應(yīng)，同時提出T淋巴細胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)參與了高血壓的發(fā)生發(fā)展[1-2]。近年對于高血壓與T淋巴細胞亞群表達變化的報道較少見。本研究通過觀察新疆哈薩克族高血壓患者外周血T淋巴細胞亞群表達的變化，探討高血壓發(fā)病機制與T淋巴細胞亞群的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2012年9月—2013年1月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院高血壓門診收治的未經(jīng)降壓藥物治療的新疆哈薩克族高血壓患者20例作為高血壓組，高血壓診斷參考2005年世界衛(wèi)生組織/國際高血壓學(xué)會(WHO/ISH)高血壓診斷標準：收縮壓≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或舒張壓≥90 mm Hg。排除標準：經(jīng)實驗室和臨床檢查診斷為繼發(fā)性高血壓、風(fēng)濕性心臟病、急性腦血管病、急慢性感染、先天性心臟病、糖尿病、全身免疫系統(tǒng)性疾病、重要臟器功能衰竭等疾病之一者。另選取同期在本院體檢健康的同民族者20例作為對照組。操作程序均經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。

表1 兩組基本資料比較

注：*為χ2值

表2 兩組T淋巴細胞亞群表達水平比較

1.2 試劑與儀器 PE-抗CD8，F(xiàn)ITC-抗CD4，Percp-抗CD8三色標記的單克隆抗體(美國BD公司)，淋巴細胞分離液(美國SIGMA公司)，磷酸鹽緩沖液(PBS)(新西蘭Hyclone公司)，流式細胞儀(美國BD公司)，離心機(Multifuge X1R型，美國Thermo公司)。

1.3 T淋巴細胞分選 抽取受試者空腹外周靜脈血3 ml，使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝，標本在采集8 h內(nèi)測定。根據(jù)密度梯度離心法提取淋巴細胞，取淋巴細胞分離液3 ml加入離心管，然后將3 ml抗凝血與PBS緩沖液1∶1混勻后放入另一試管，小心加入呈有淋巴細胞分離液的離心管中，可見清晰的兩層液體界面。以1 600 r/min在離心機中離心20 min，離心半徑13.5 cm，離心管由上至下分為5層，第一層是淡粉色的血清層；第二層是白色絮狀樣外周血單核細胞層；第三層是透明的淋巴細胞分離液；第四層是粒細胞，又稱為棕黃層；第五層是紅細胞、血小板等。取第二層即淋巴細胞層，加入PBS洗滌3次，然后調(diào)整細胞密度為1×106/ml，加入20 μl三色標記的單克隆抗體，混勻后于4 ℃靜置30 min，PBS洗滌2次，再加入PBS 0.5 ml重懸，利用流式細胞儀測定T淋巴細胞亞群的表達。

2 結(jié)果

2.1 兩組基本資料比較 兩組性別、年齡、吸煙率、飲酒率、BMI、空腹血糖、CRP、TG、LDL-C、HDL-C比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05，見表1)。

3 討論

近年來，高血壓與炎癥之間的相關(guān)性也越來越受到關(guān)注。Chas等[3]提出，炎性細胞激活參與了高血壓的發(fā)生發(fā)展，并且為高血壓的治療提出了新的研究方向。Schmid-Sch?nbein等[4]研究發(fā)現(xiàn)，自發(fā)性高血壓鼠體內(nèi)存在著大量的T淋巴細胞浸潤。Dzielak[5]提出，當實驗鼠體內(nèi)缺乏T淋巴細胞時，可降低甚至避免高血壓的發(fā)生。表明T淋巴細胞的激活與高血壓的發(fā)生有關(guān)。

有研究提示，淋巴細胞在高血壓和血管重構(gòu)的病因和發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色，并指出T淋巴細胞在血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)形成過程中起關(guān)鍵作用，而AngⅡ又在高血壓的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用[6-9]。AngⅡ可促進炎性遞質(zhì)的形成，進而刺激T淋巴細胞。炎癥與高血壓可通過血管氧化應(yīng)激、內(nèi)皮損傷、血管壁重構(gòu)等機制相互影響和促進[10-11]。Madhur等[12]明確提出，高血壓患者白介素17(IL-17)血清水平明顯升高，并且其可進一步促進T淋巴細胞的活化增殖，IL-17作為一個危險因素促進了高血壓的發(fā)生發(fā)展。Navarro-Gonzalez等[13]提出，在高血壓合并糖尿病患者中，炎性遞質(zhì)白介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的血清水平是正常對照組的數(shù)倍。炎性遞質(zhì)可促進高血壓的發(fā)生，甚至加速高血壓惡化，引起心腦腎等靶器官的損害[14]。

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