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        新疆哈薩克族高血壓患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)的變化

        2014-02-08 05:32:22袁慶艷張源明張邱兵章桂銘
        中國全科醫(yī)學(xué) 2014年26期
        關(guān)鍵詞:離心管亞群外周血

        袁慶艷,張源明,張邱兵,章桂銘,郁 潔,朱 健

        高血壓是一種常見的心血管疾病,高血壓及其并發(fā)癥嚴(yán)重威脅著人們健康,但其發(fā)病機制仍未完全明確。最新研究表明,高血壓是一種慢性低度炎性反應(yīng),同時提出T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的炎性反應(yīng)參與了高血壓的發(fā)生發(fā)展[1-2]。近年對于高血壓與T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)變化的報道較少見。本研究通過觀察新疆哈薩克族高血壓患者外周血T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)的變化,探討高血壓發(fā)病機制與T淋巴細(xì)胞亞群的相關(guān)性。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取2012年9月—2013年1月新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院高血壓門診收治的未經(jīng)降壓藥物治療的新疆哈薩克族高血壓患者20例作為高血壓組,高血壓診斷參考2005年世界衛(wèi)生組織/國際高血壓學(xué)會(WHO/ISH)高血壓診斷標(biāo)準(zhǔn):收縮壓≥140 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或舒張壓≥90 mm Hg。排除標(biāo)準(zhǔn):經(jīng)實驗室和臨床檢查診斷為繼發(fā)性高血壓、風(fēng)濕性心臟病、急性腦血管病、急慢性感染、先天性心臟病、糖尿病、全身免疫系統(tǒng)性疾病、重要臟器功能衰竭等疾病之一者。另選取同期在本院體檢健康的同民族者20例作為對照組。操作程序均經(jīng)新疆醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn),受試者均簽署知情同意書。

        表1 兩組基本資料比較

        注:*為χ2值

        表2 兩組T淋巴細(xì)胞亞群表達(dá)水平比較

        1.2 試劑與儀器 PE-抗CD8,F(xiàn)ITC-抗CD4,Percp-抗CD8三色標(biāo)記的單克隆抗體(美國BD公司),淋巴細(xì)胞分離液(美國SIGMA公司),磷酸鹽緩沖液(PBS)(新西蘭Hyclone公司),流式細(xì)胞儀(美國BD公司),離心機(Multifuge X1R型,美國Thermo公司)。

        1.3 T淋巴細(xì)胞分選 抽取受試者空腹外周靜脈血3 ml,使用乙二胺四乙酸(EDTA)抗凝,標(biāo)本在采集8 h內(nèi)測定。根據(jù)密度梯度離心法提取淋巴細(xì)胞,取淋巴細(xì)胞分離液3 ml加入離心管,然后將3 ml抗凝血與PBS緩沖液1∶1混勻后放入另一試管,小心加入呈有淋巴細(xì)胞分離液的離心管中,可見清晰的兩層液體界面。以1 600 r/min在離心機中離心20 min,離心半徑13.5 cm,離心管由上至下分為5層,第一層是淡粉色的血清層;第二層是白色絮狀樣外周血單核細(xì)胞層;第三層是透明的淋巴細(xì)胞分離液;第四層是粒細(xì)胞,又稱為棕黃層;第五層是紅細(xì)胞、血小板等。取第二層即淋巴細(xì)胞層,加入PBS洗滌3次,然后調(diào)整細(xì)胞密度為1×106/ml,加入20 μl三色標(biāo)記的單克隆抗體,混勻后于4 ℃靜置30 min,PBS洗滌2次,再加入PBS 0.5 ml重懸,利用流式細(xì)胞儀測定T淋巴細(xì)胞亞群的表達(dá)。

        2 結(jié)果

        2.1 兩組基本資料比較 兩組性別、年齡、吸煙率、飲酒率、BMI、空腹血糖、CRP、TG、LDL-C、HDL-C比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05,見表1)。

        3 討論

        近年來,高血壓與炎癥之間的相關(guān)性也越來越受到關(guān)注。Chas等[3]提出,炎性細(xì)胞激活參與了高血壓的發(fā)生發(fā)展,并且為高血壓的治療提出了新的研究方向。Schmid-Sch?nbein等[4]研究發(fā)現(xiàn),自發(fā)性高血壓鼠體內(nèi)存在著大量的T淋巴細(xì)胞浸潤。Dzielak[5]提出,當(dāng)實驗鼠體內(nèi)缺乏T淋巴細(xì)胞時,可降低甚至避免高血壓的發(fā)生。表明T淋巴細(xì)胞的激活與高血壓的發(fā)生有關(guān)。

        有研究提示,淋巴細(xì)胞在高血壓和血管重構(gòu)的病因和發(fā)生發(fā)展中扮演著重要角色,并指出T淋巴細(xì)胞在血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)形成過程中起關(guān)鍵作用,而AngⅡ又在高血壓的發(fā)生發(fā)展中起關(guān)鍵作用[6-9]。AngⅡ可促進(jìn)炎性遞質(zhì)的形成,進(jìn)而刺激T淋巴細(xì)胞。炎癥與高血壓可通過血管氧化應(yīng)激、內(nèi)皮損傷、血管壁重構(gòu)等機制相互影響和促進(jìn)[10-11]。Madhur等[12]明確提出,高血壓患者白介素17(IL-17)血清水平明顯升高,并且其可進(jìn)一步促進(jìn)T淋巴細(xì)胞的活化增殖,IL-17作為一個危險因素促進(jìn)了高血壓的發(fā)生發(fā)展。Navarro-Gonzalez等[13]提出,在高血壓合并糖尿病患者中,炎性遞質(zhì)白介素6(IL-6)和腫瘤壞死因子α(TNF-α)的血清水平是正常對照組的數(shù)倍。炎性遞質(zhì)可促進(jìn)高血壓的發(fā)生,甚至加速高血壓惡化,引起心腦腎等靶器官的損害[14]。

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        2 Peterson JR,Sharma RV,Davission RL.Reactive oxygen species in the neuropathogenesis of hypertension[J].Curr Hypertens Rep,2006,8(3):232-241.

        3 Chas CU,Lee RT,Rifai N,et al.Blood pressure and inflammation in apparently healthy men[J].Hypertension,2001,38(3):399-403.

        4 Schmid-Sch?nbein GW,Seiffge D,DeLano FA,et al.Leukocyte counts and activation in spontaneously hypertensive and normotensive rats[J].Hypertension,1991,17(3):323-330.

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        9 李青霞,龐曉.原發(fā)性高血壓患者清晨血壓升高與血漿內(nèi)皮素和血管緊張素Ⅱ的相關(guān)性研究[J].中國全科醫(yī)學(xué),2012,15(1):164.

        10 楊盼,牟建軍.肥胖高血壓患者不同糖耐量情況下血脂及超敏C反應(yīng)蛋白的變化[J].實用心腦肺血管病雜志,2013,21(2):32.

        11 Guzik TJ,Hoch NE,Brown KA,et al.Role of the T cell in the genesis of angiotensin Ⅱ induced hypertension and vascular dysfunction[J].J Exp Med,2007,204(10):2449-2460.

        12 Madhur MS,Lob HE,McCann LA,et al.Interleukin 17 promotes angiotensin Ⅱ-induced hypertension and vascular dysfunction[J].Hypertension,2010,55(2):500-507.

        13 Navarro-Gonzalez J,Mora-Fernandez C,Gomez-Chinchon M,et al.Serum and gene expression profile of tumor necrosis factor-alpha and interleukin-6 in hypertensive diabetic patients:effect of amlodipine administration[J].Int J Immunopathol Pharmacol,2010,23(1):51-59.

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        20 羅健,張源明,王凌鵬,等.電壓依賴性鉀通道1.3在自發(fā)性高血壓大鼠外周血淋巴細(xì)胞表達(dá)的變化[J].心血管康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志,2010,19(4):342-345.

        21 戴向軍,張源明,侯秀麗,等.新疆哈薩克族高血壓患者外周血淋巴細(xì)胞Kv1.3通道的表達(dá)[J].中華高血壓雜志,2012,20(2):175-178.

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