孫玉標(biāo)

(蒙山縣第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西蒙山546700)

BC3000 Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀模式轉(zhuǎn)換對結(jié)果的影響

孫玉標(biāo)

(蒙山縣第二人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，廣西蒙山546700)

目的觀察BC-3000Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀全血與稀釋血兩種模式切換對結(jié)果的影響。方法取20份全血與稀釋血交叉測定各3次，對儀器直接測定的WBC、HGB、MVC、PLT結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果全血模式轉(zhuǎn)換為稀釋模式后，3次結(jié)果無顯著差異，稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式后，第一次與后兩次除MCV外，有顯著差異。結(jié)論模式轉(zhuǎn)換后對第一次的全血測定有影響。

血細(xì)胞分析；全血模式；預(yù)稀釋模式

BC-3000Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀設(shè)有全血與稀釋血兩種模式，方便使用靜脈血或末梢血檢測。由于末梢血干擾因素較多，與靜脈血存在一定差異[1]，常用靜脈血測定，但對某些特殊患者，如新生兒、嬰幼兒、大面積燒傷等采集靜脈血有困難者用末梢血檢測。在工作中根據(jù)需要變換檢測模式，發(fā)現(xiàn)稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式后有些結(jié)果有差異，為了確定是否因模式轉(zhuǎn)換引起結(jié)果變動(dòng)，我們進(jìn)行了以下試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑深圳邁瑞B(yǎng)C-3000Plus；原裝配套試劑；質(zhì)控物：邁瑞全血質(zhì)控物；40μl硅化微量吸管；塑料試管及EDTA－K2抗凝管。

1.2 樣本來源全血：隨機(jī)抽取當(dāng)天20份EDTAK2抗凝血。抗凝血嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程采集[2]，并在采集后1h內(nèi)進(jìn)行分析。稀釋血：在分析儀取兩次稀釋液共1.4ml，用40μl硅化微量吸管吸取40μl上述混勻的抗凝血，注入盛有稀釋液的試管中混勻，當(dāng)作稀釋的末梢血使用，每管稀釋的血液足夠重復(fù)測定3次。放置3min后檢測，檢測前再次混勻，在30min內(nèi)進(jìn)行分析。

1.3 比較項(xiàng)目儀器直接測定的白細(xì)胞WBC、血紅蛋白HGB、平均紅細(xì)胞體積MVC、血小板PLT。

1.4 方法確定每天運(yùn)行的本批號(hào)全血質(zhì)控物批間CV附合要求，測量當(dāng)天全血質(zhì)控物在控后，切換稀釋模式測稀釋血。一份稀釋血連測3次。再換全血模式。一份抗凝血連測3次。不斷換模式，循環(huán)檢測。注意每次測定先混勻血液，靜置約5s后把采樣針移到血液三分之二下吸樣，避免吸入混勻產(chǎn)生的氣泡，在吸樣過程中，采樣針頭與容器底部要保持一定距離。記錄20份全血樣品的第一次、第二次、第三次結(jié)果，分別計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。同理處理20份稀析樣品的結(jié)果見表1。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。所采集的數(shù)據(jù)均符合正態(tài)分布，經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)可知方差具有齊性。計(jì)量資料均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x± s)表示，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)的方差分析和LSD檢驗(yàn)，P<0.05為差異有顯著性意義。

2 結(jié)果

由表1可見，全血模式轉(zhuǎn)換為稀釋模式后，三次結(jié)果無顯著差異。稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式后，后兩次結(jié)果無顯著差異，第一次與后兩次比較除MCV外，有顯著差異。

表1 兩種模式變換后測定結(jié)果(x±s)

3 討論

BC-3000Plus采用電阻抗法對細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，當(dāng)吸取的定量樣本被定量的導(dǎo)電溶液稀釋后，就被送到檢測單元，樣本中的細(xì)胞在恒定負(fù)壓的作用下通過檢測小孔的時(shí)候，電極兩端形成一個(gè)同細(xì)胞體積大小成比例的脈沖變化，脈沖的個(gè)數(shù)與通過小孔的細(xì)胞數(shù)相當(dāng)，脈沖的幅度與細(xì)胞的體積成正比。稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式后，儀器執(zhí)行自動(dòng)清洗一次，可能是清洗后管道殘留有液體，對只需13μl的微量樣品的全血測定有影響。第一次測量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板比后兩次低，說明通過小孔的細(xì)胞數(shù)變少；采用分光光度法測量的血紅蛋白結(jié)果也偏低，同樣表明進(jìn)入檢測單元的樣品量與后兩次相比變少。平均紅細(xì)胞體積與脈沖的幅度有關(guān)，與數(shù)量無關(guān)，故變化不明顯。全血模式轉(zhuǎn)換為稀釋模式是直接變屏轉(zhuǎn)換，沒有清洗，結(jié)果重復(fù)性好。

根據(jù)ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室—質(zhì)量和能力的專用要求,同樣檢驗(yàn)應(yīng)用不同的程序需要進(jìn)行比對，使用這款儀器在比對稀釋血與全血測定時(shí)要留意模式轉(zhuǎn)換對結(jié)果的影響，把稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式的第一次結(jié)果舍去。儀器需要校準(zhǔn)時(shí)，按使用說明書上的要求先驗(yàn)證重復(fù)性，連續(xù)計(jì)數(shù)11次，取第2到第11次的計(jì)數(shù)結(jié)果，確保精密度在允許范圍。在工作中，稀釋模式轉(zhuǎn)換為全血模式后，先按一次計(jì)數(shù)鍵進(jìn)行本底測量，再測標(biāo)本也達(dá)到消除影響的效果。

儀器設(shè)置兩種檢測模式以方便不同人群的檢測需要，行內(nèi)公認(rèn)采靜脈抗凝血用全血模式測定比用末梢血稀釋測定結(jié)果穩(wěn)定，受干擾因素少。但對某些采集靜脈血有困難，可采手指末梢防凝全血代替末梢稀釋測定[3]，只要抗凝劑比例合適，采血操作規(guī)范，在全血模式測定也得到理想的結(jié)果，并且可避免儀器反復(fù)切換模式執(zhí)行自動(dòng)清洗對結(jié)果影響。

[1]羅來主,余建華,郭海燕,等.末梢血與靜脈血分別在同一儀器上作血細(xì)胞計(jì)數(shù)誤差率的探討[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(3):327.

[2]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3版,南京:東南大學(xué)出版社,2006:121-122.

[3]何磊.三種采血模式血液分析儀測定結(jié)果分析[J].中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)2009,6(19):116-117.

R446.11+1

A

1674-1129(2014)04-0434-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.04.024

2013-12-05；

2014-04-30)