傅祝能，孫海芳，孫蘭青，王賢芳，陳林海，吳榮輝，方?？?/p>

(義烏市中心醫(yī)院，浙江 義烏 322000)

端粒酶是一種核糖核蛋白酶，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，腫瘤細(xì)胞中端粒酶呈特異性地表達(dá)[1],國(guó)內(nèi)研究多對(duì)各種腫瘤組織細(xì)胞端粒酶的定性或半定量的研究,直接取脫落細(xì)胞對(duì)宮頸癌等進(jìn)行端粒酶實(shí)時(shí)熒光定量PCR的檢測(cè)研究報(bào)道少見(jiàn),故此我們進(jìn)行該項(xiàng)研究。

一、對(duì)象與方法

1.一般對(duì)象。選正常對(duì)照組26例,體檢健康女性,年齡20-56(34.8±6.8)歲，CINⅠ-Ⅱ組28例,年齡18-75(36.9±5.6)歲，CIN Ⅲ組21例，年齡21-78(39.8±5.5)歲；CIN患者中HPV陽(yáng)性CIN組26例，HPV陰性CIN組23例，宮頸癌組24例,其HPV檢測(cè)全陽(yáng)性，年齡26-82(49.5±7.7)歲，各疾病組采集標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)前均未進(jìn)行手術(shù)治療。

2.方法。檢測(cè)標(biāo)本采用女性宮頸粘膜脫落細(xì)胞標(biāo)本,使用采樣刷插入宮頸采集，緊貼宮頸口稍用力轉(zhuǎn)動(dòng)3圈，將采樣刷放入流式熒光雜交法檢測(cè)HPV[2]，HPV標(biāo)本均當(dāng)天采集，次日檢測(cè)完畢。采集標(biāo)本放-70℃保存?zhèn)錂z，采用美國(guó)某公司7500 Fast Real-Time PCR System型進(jìn)行端粒酶定量檢測(cè)前取出，以SYBR為熒光染料，以293細(xì)胞為陽(yáng)性對(duì)照，試劑盒購(gòu)自上海某醫(yī)藥科技有限公司，2個(gè)月內(nèi)檢測(cè)完。

二、結(jié) 果

各組觀察指標(biāo)如下(見(jiàn)附表)。

三、討 論

本文采用TRAP實(shí)時(shí)熒光定量法進(jìn)行女性宮頸粘膜脫落細(xì)胞端粒酶活性定量研究，方法簡(jiǎn)捷，重復(fù)性強(qiáng)，結(jié)果顯示，CIN Ⅲ組、HPV陽(yáng)性CIN組及宮頸癌組的宮頸粘膜脫落細(xì)胞端粒酶定量值明顯高于正常女性，表明女性CIN患者的宮頸粘膜脫落細(xì)胞端粒酶活性定量結(jié)果升高，在CINⅠ-Ⅱ組階段及HPV陰性的CIN組其升高不明顯，而進(jìn)入CIN Ⅲ組階段或HPV陽(yáng)性CIN組的端粒酶活性定量結(jié)果升高更明顯，其升高已具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，即其進(jìn)一步惡變發(fā)展為宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)更大，而一旦發(fā)生惡變，進(jìn)入宮頸癌階段，因而，采取女性宮頸粘膜脫落細(xì)胞進(jìn)行端粒酶活性定量檢測(cè)可作為鑒別診斷CIN和宮頸癌的方法之一[3]。綜上所述，宮頸粘膜脫落細(xì)胞端粒酶熒光定量測(cè)定，可作為鑒別診斷CIN和宮頸癌的手段，尤其可作為女性婦科對(duì)宮頸癌的有效篩查和早期診斷手段之一。

附表 各組觀察指標(biāo)比較

注:與正常女性組比較，△P<0.05,△△P<0.01

[1]Shay JW,Wright WE.Telomerase activing in human canaer[J].Current Opinion in oncology,1996,8:66-71.

[2]傅祝能，吳榮輝，郭小妹，等.用流式熒光雜交技術(shù)調(diào)查浙江義烏婦女HPV感染及分型[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2011,29(8):570-571.

[3]傅祝能，王香梅，單小云，等.端粒酶和姊妹染色單體互換在惡性腫瘤診斷中的價(jià)值[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2005，28(5):500-502.