成景松，朱小莉（陜西省安康市白河縣人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 725800）

生化儀器廠家在出廠時提供了檢測系統(tǒng)的分析性能的資料，數(shù)據(jù)和結(jié)論說明檢測系統(tǒng)的分析性能符合臨床要求，才允許出廠。但是，投入到具體的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室，由于檢測條件的改變，比如溫度、電壓波動、試劑的改變，必須在實(shí)驗(yàn)室的具體條件下，用實(shí)驗(yàn)去證實(shí)檢測系統(tǒng)的基本分析性能[1－2]?；诖四康?，現(xiàn)將投入運(yùn)行的兩臺國產(chǎn)生化儀器在常規(guī)條件下對其方法性能進(jìn)行評價，從而評判這些常規(guī)項目的服務(wù)質(zhì)量。

1 材料與方法

1.1 檢測儀器 梅州康立AFT－500E電解質(zhì)分析儀（以下簡稱儀器1）和深圳邁瑞B(yǎng)S－800全自動生化分析儀（以下簡稱儀器2）。

1.1.1 AFT－500E分析項目及使用試劑 分析鉀（K）、鈉（Na）、氯（Cl）、鈣（Ca）4個項目，校準(zhǔn)液和質(zhì)控液為康立公司原裝配套，方法為直接離子選擇性電極法。

1.1.2 BS－800分析項目及使用試劑 檢測總膽紅素（TBIL，采用重氮法）、總蛋白（TP，采用雙縮脲法）、清蛋白（ALB，采用溴甲酚綠法）、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT，采用連續(xù)監(jiān)測法）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST，采用連續(xù)監(jiān)測法）、堿性磷酸酶（ALP，采用連續(xù)監(jiān)測法）、γ－谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（γ－GT，采用γ－谷氨酰4硝基苯胺連續(xù)監(jiān)測法）、尿素（Ure，采用脲酶紫外速率法）、肌酐（Cr，采用苦味酸法）、尿酸（UA，采用尿酸酶紫外法）、糖（GLU，采用氧化酶法）、總膽固醇（TC，采用氧化酶法）、三酰甘油（TG，采用GPO－PAP酶法）、高密度脂蛋白膽固醇（HDLC，直接一步法）、淀粉酶（AMY，采用麥芽七糖苷底物酶法）、肌酸激酶（CK，采用N－乙酰半胱氨酸連續(xù)監(jiān)測法）、乳酸脫氫酶（LDH，采用LDH－L連續(xù)監(jiān)測法）、磷（P，采用磷鉬酸紫外法）18個項目。除AMY、CK試劑分別為浙江伊利康生物技術(shù)有限公司和上海科華生物工程股份有限公司提供外，剩下16個項目試劑均為邁瑞公司配套試劑。18個項目用邁瑞復(fù)合校準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)。質(zhì)控品為英國RANDOX人基質(zhì)定值質(zhì)控血清。

1.2 方法 所有分析項目按照儀器和試劑原廠家配套說明書設(shè)置和操作，用Westgard多規(guī)則控制方法進(jìn)行常規(guī)室內(nèi)質(zhì)控[3]，并且根據(jù)室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則進(jìn)行重新定值[4]。根據(jù)美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）發(fā)布的EP5－A2（臨床化學(xué)設(shè)備操作精密度評價標(biāo)準(zhǔn)指南）文件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，每天對穩(wěn)定的試驗(yàn)樣品（凍干人血清）測定2次（2次測定時間間隔大于2h），每次測定2遍，共測定20d，取得80個數(shù)據(jù)，結(jié)果剔除離群值[5]，計算批內(nèi)、批間不精密度標(biāo)準(zhǔn)差（s）。以實(shí)驗(yàn)獲得的批內(nèi)不精密度分別與廠家聲明的批內(nèi)不精密度和1／4CLIA′88（美國臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法規(guī)室間評估指標(biāo)）指標(biāo)比較，以實(shí)驗(yàn)獲得的批間不精密度分別與廠家聲明的批間不精密度和1／3CLIA′88指標(biāo)比較，并且作χ2檢驗(yàn)，判斷可接受性。

2 結(jié) 果

22個常規(guī)生化項目中，（1）批內(nèi)精密度：P不能接受廠家聲明的批內(nèi)精密度性能和CLIA′88固定限指標(biāo)的1／4，5個項目即Na、TC、GLU、Ure、ALB不能接受CLIA′88固定限指標(biāo)的1／4。（2）批間精密度：ALT不能接受廠家聲明的批間精密度性能，3個項目即Cl、Na、Ure不能接受CLIA′88固定限指標(biāo)的1／3。結(jié)果見表1。

表1 不精密度試驗(yàn)結(jié)果及廠家聲明不精密度和CLIA′88指標(biāo)

續(xù)表1 不精密度試驗(yàn)結(jié)果及廠家聲明不精密度和CLIA′88指標(biāo)

3 討 論

3.1 按照CLSI出版的EP5－A2文件評價實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)用方法的精密度，可準(zhǔn)確、客觀的得出各項目批內(nèi)、批間、天間和總不精密度，為了簡單起見，按文獻(xiàn)介紹，可按EP5－A2文件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，然后直接對所有數(shù)據(jù)作均值和標(biāo)準(zhǔn)差的統(tǒng)計，求出批間的變異（即總不精密度）[6]。著名的Westgard和Ceroblewski等提出高效檢驗(yàn)對精密度要求的觀點(diǎn)，從中引出批內(nèi)不精密度CV應(yīng)是CLIA指標(biāo)的1／4，批間不精密度CV應(yīng)是CLIA指標(biāo)的1／3，做法簡單、明確。所以從20世紀(jì)90年代起，國際上推薦使用總不精密度，并且為了更好地檢出不穩(wěn)定的誤差，已明確提出檢測系統(tǒng)的批內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為美國的臨床實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評估允許誤差（TE，允許總誤差）即CLIA′88的1／4，批間標(biāo)準(zhǔn)差s應(yīng)為該允許誤差的1／3。1／4允許誤差范圍為批內(nèi)不精密度判斷限，1／3允許誤差范圍為批間不精密度判斷限，小于或等于判斷限的，檢測系統(tǒng)的不精密度屬可接受；大于判斷限的表示不精密度不符合要求。達(dá)到這樣要求的檢測系統(tǒng)，可認(rèn)為它的隨機(jī)誤差屬于可接受的低水平[7－8]。

3.2 與廠家聲明的精密度性能指標(biāo)比較，在常規(guī)條件下，只有P不能接受廠家聲明的批內(nèi)精密度性能，ALT不能接受廠家聲明的批間精密度性能，說明儀器1和儀器2聲明的精密度性能大部分是符合常規(guī)條件下的，P和ALT不能接受可能廠家是在最佳條件下做出的性能指標(biāo)或者廠家當(dāng)時標(biāo)本的決定性水平和本實(shí)驗(yàn)室不同。

根據(jù)相關(guān)要求，在實(shí)際工作中，給定的分析方法的允許總誤差必須小于分析物CLIA固定界限，批內(nèi)不精密度應(yīng)是CLIA固定限的1／4，并且將批間不精密度降低到1／3的CLIA固定限目標(biāo)[6－7]。根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其中儀器1的Na項目批內(nèi)、批間不精密度都超過了CLIA′88固定限的相應(yīng)指標(biāo)，Cl項目的批間不精密度超過了CLIA′88固定限的1／3；儀器2的Ure項目批內(nèi)、批間不精密度都超過了CLIA′88固定限的相應(yīng)指標(biāo)，另外有4個項目（P、TC、GLU、ALB）批內(nèi)不精密度超過了CLIA′88固定限的1／4。

3.3 廠家聲明的精密度性能與CLIA固定限的相應(yīng)指標(biāo)相比，除P和ALT以外，其余項目全部能接受，說明部分國產(chǎn)儀器和試劑雖然聲明的精密度性能指標(biāo)比較真實(shí)，但個別指標(biāo)不夠嚴(yán)格，除廠家要嚴(yán)格按六西格馬質(zhì)量管理和要求生產(chǎn)[9]，進(jìn)一步改善儀器性能外，也建議主管部門制定出更嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)審批企業(yè)的生產(chǎn)。在臨床實(shí)驗(yàn)室常規(guī)條件下，除嚴(yán)格按廠家說明書維護(hù)好儀器外，對于儀器1類型的儀器，因?yàn)殡姎庑阅芤蟾撸纳剖覂?nèi)條件，嚴(yán)格穩(wěn)定室內(nèi)電壓，定期更換電極。而對于儀器2類型的儀器，每天要對試劑針、樣品針、攪拌系統(tǒng)、清洗系統(tǒng)進(jìn)行擦拭，并且設(shè)置好項目測試順序，防止攜帶污染和交叉污染。另外要制訂更高的質(zhì)量目標(biāo)，嚴(yán)格控制全過程質(zhì)量，最好優(yōu)選方法，找到性能更佳的替代方法，如更換試劑廠家等。改進(jìn)后，要重新評價其方法性能，提高方法可接受性，以保證常規(guī)檢驗(yàn)工作中的質(zhì)量。

3.4 國家最新發(fā)布了行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS－T403－2012（臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項目分析質(zhì)量指標(biāo)）文件，從2013年8月1日實(shí)施。該文件對總誤差、不精密度和偏倚作出了具體規(guī)定，明確指出總誤差、不精密度和偏倚指標(biāo)分別主要用于室間質(zhì)量評價、室內(nèi)質(zhì)量控制管理和正確度驗(yàn)證。這些指標(biāo)的制訂是根據(jù)檢驗(yàn)項目的個體內(nèi)生物學(xué)變異和個體間生物學(xué)變異同時考慮目前可實(shí)現(xiàn)的分析質(zhì)量水平，所以本次國家發(fā)布的質(zhì)量指標(biāo)是很科學(xué)的。但單純從指標(biāo)上與CLIA比較，WS－T 403－2012標(biāo)準(zhǔn)更嚴(yán)格，例如ALT的WS－T 403－2012總誤差為16%，不精密度CV為6%，而CLIA總誤差為20%，1／3CLIA為6.7%；TP的WS－T 403－2012總誤差為5%，不精密度CV為2%，而CLIA總誤差為10%，1／3CLIA為3.3%。作者從2013年5月起按照WS－T 403－2012標(biāo)準(zhǔn)設(shè)定質(zhì)量目標(biāo)，進(jìn)行改進(jìn)，重新評估這22項常規(guī)指標(biāo)后，所有項目批內(nèi)、批間精密度已能達(dá)到廠家聲明標(biāo)準(zhǔn)和批間不精密度低于CLIA1／3指標(biāo)，只有個別項目如Ure、Na、Cl批內(nèi)不精密度尚未低于CLIA1／4指標(biāo)，只有在以后的工作中更換進(jìn)口試劑和（或）更換進(jìn)口儀器后再重新評估。

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