尚 睿，佟麗波

(佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科，黑龍江 佳木斯 154003)

子宮內(nèi)膜癌(Endometrial Carcinoma)是發(fā)生于子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，經(jīng)常發(fā)生于圍絕經(jīng)期和絕經(jīng)后的女性。目前，子宮內(nèi)膜癌是最常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，且每年有大約20萬(wàn)的新發(fā)病例，死亡率僅次于卵巢癌和宮頸癌，是死亡率排第3位的婦科惡性腫瘤。近年來(lái)，子宮內(nèi)膜癌的病例數(shù)有逐年增加的趨勢(shì)[1]。ER、PR與子宮內(nèi)膜癌的關(guān)系一直是國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)，子宮內(nèi)膜癌為激素依賴性腫瘤，ER、PR水平的高低在估計(jì)預(yù)后和臨床選擇內(nèi)分泌治療上具有重要意義。原癌基因PCNA 是細(xì)胞核內(nèi)DNA聚合酶D的輔助蛋白,是DNA合成所必須的物質(zhì),在細(xì)胞增殖過(guò)程的S期含量最高,與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。本研究采用免疫組織化學(xué)技術(shù)檢測(cè)子宮內(nèi)膜癌中PCNA、ER和PR的表達(dá)情況，并探討其與子宮內(nèi)膜癌病情的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科2012-03～2013-11病房住院的子宮內(nèi)膜癌患者95例，年齡30～58歲，平均(38±10)歲，臨床病例資料完整，且所有患者均未合并其他惡性腫瘤。參照國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟診斷標(biāo)準(zhǔn)，將子宮內(nèi)膜癌進(jìn)行病理分期：為子宮內(nèi)膜癌I 期58例、子宮內(nèi)膜癌II期22例、子宮內(nèi)膜腺癌III期15例。將三組根據(jù)組織學(xué)分級(jí)分為高分化、中分化和低分化組，所有患者的診斷均經(jīng)手術(shù)治療病理確診，術(shù)前均未接受放、化療及激素替代療法，且均排除第二原發(fā)癌。

1.2 方法

1.2.1 采用免疫組化方法檢測(cè)

PCNA、ER和PR兔抗人多克隆抗體、SP染色試劑盒、DBA顯示試劑盒以及其他試劑均在天津所羅門生物有限公司采購(gòu)。采用SP免疫組織化學(xué)方法，DAB顯色，蘇木素復(fù)染細(xì)胞核。

1.2.2 免疫組化結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)特異性棕黃色者為陽(yáng)性，未出現(xiàn)為陰性；PCNA、ER和PR均定位于細(xì)胞核。采用Sinicrope改良法判斷結(jié)果[2]。觀察10個(gè)高倍視野，計(jì)算陽(yáng)性百分率。半定量記分方法：①按陽(yáng)性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)的多少分為：0級(jí)：<5%，1級(jí)：<25%，2級(jí)：<50%，3級(jí)：>50%；②按著色細(xì)胞染色的強(qiáng)弱分為：0級(jí)：陰性，1級(jí)：弱，2級(jí)：中，3級(jí)：強(qiáng)。兩項(xiàng)記分之和判斷陽(yáng)性的程度：(-)：0；(+)：1～2;(++)：3～4；(+++)：5～6。免疫組化結(jié)果由2名專業(yè)病理醫(yī)師分別進(jìn)行獨(dú)立評(píng)估。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)四個(gè)免疫組化因子的表達(dá)分別進(jìn)行相關(guān)性分析；對(duì)每個(gè)免疫組化因子與各臨床病理因素的關(guān)系進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，并進(jìn)行多因素相關(guān)性分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1～4。

表1 PCNA在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

χ2=103.24，P<0.05。

表2 ER在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

χ2=49.97，P<0.05。

表3 PR在不同子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)

χ2=32.81，P<0.05。

表4 PCNA、ER和PR在子宮內(nèi)膜癌組織表達(dá)與臨床病理特征之間的關(guān)系(n，%)

3 討論

子宮內(nèi)膜癌是繼宮頸癌和卵巢癌之后的第3個(gè)最常見(jiàn)的婦科惡性腫瘤。多數(shù)患者有良好的預(yù)后，因?yàn)榻?jīng)常在早期階段就被發(fā)現(xiàn)。總體5年存活率約為80%[3]。EMC的最初的治療方法是手術(shù)。輔助治療是考慮到根據(jù)不同的臨床和手術(shù)病理風(fēng)險(xiǎn)因素的因素。大多數(shù)晚期患者和高風(fēng)險(xiǎn)的早期疾病患者需要額外的放射治療，單獨(dú)或聯(lián)合化療[4]。本試驗(yàn)中，我們通過(guò)對(duì)子宮內(nèi)膜癌中PCNA、ER和PR的表達(dá)陽(yáng)性率進(jìn)行檢測(cè)，探討其表達(dá)水平與子宮內(nèi)膜癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。

雌激素受體(estrogen receptor,ER)是一組存在于細(xì)胞內(nèi)的蛋白質(zhì)。它們是由雌激素激活的受體。孕酮受體(Progesterone receptor,PR)是在細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)的一種蛋白質(zhì)，由類固醇激素孕酮激活。ER和PR的表達(dá)通常與更好的預(yù)后相關(guān)。本次實(shí)驗(yàn)中我們檢測(cè)到子宮內(nèi)膜癌組織中ER表達(dá)陽(yáng)性率為54.74%，顯著低于正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜單純或復(fù)雜型增生組(P<0.01，P<0.01)，與子宮內(nèi)膜不典型增生組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；子宮內(nèi)膜癌組織中PR表達(dá)陽(yáng)性率為62.11%，顯著低于正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜單純或復(fù)雜型增生組(P<0.01，P<0.01)，與子宮內(nèi)膜不典型增生組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。子宮內(nèi)膜癌組織中ER和PR的表達(dá)與患者年齡無(wú)相關(guān)性；PR的表達(dá)與臨床分期有相關(guān)性(P<0.05)，與病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和肌層浸潤(rùn)深度無(wú)相關(guān)性；而ER的表達(dá)與臨床分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及肌層浸潤(rùn)深度有均無(wú)相關(guān)性。有報(bào)道稱EMC中激素受體表達(dá)陽(yáng)性率為ER 32%～77%，PR 54%～72%[4]。它們的表達(dá)與其他良好的預(yù)后因素聯(lián)系在一起，如疾病的早期階段，肌層浸潤(rùn)少，低腫瘤分級(jí)，無(wú)淋巴血管間隙受侵[5]。關(guān)于ER和PR表達(dá)對(duì)生存率的影響，目前還存在爭(zhēng)議。一些研究報(bào)道PR或ER表達(dá)陽(yáng)性對(duì)于預(yù)后的積極影響是相互獨(dú)立的，而其他研究卻不能證明這樣的調(diào)查結(jié)果。在EMC中，手術(shù)后的主要輔助治療手段是放射治療，而激素治療對(duì)于晚期或復(fù)發(fā)性疾病也是非常重要的。EMC對(duì)激素的反應(yīng)與腫瘤的分化程度直接相關(guān)，反過(guò)來(lái)，這又與激素受體狀態(tài)，特別是孕激素受體水平聯(lián)系在一起[6]。因此，知道這些激素受體的狀態(tài)對(duì)選擇治療方案有一定的幫助。

PCNA 是細(xì)胞核內(nèi)DNA 聚合酶D的輔助蛋白, 是DNA合成所必須的物質(zhì)，在細(xì)胞增殖過(guò)程的S期含量最高, 與細(xì)胞增殖密切相關(guān)。細(xì)胞的異常增殖對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展起了重要作用, 而與增殖相關(guān)基因的異常表達(dá)恰恰解釋了細(xì)胞的異常增殖[7]。本研究結(jié)果顯示子宮內(nèi)膜癌組織中PCNA表達(dá)陽(yáng)性率為89.47%，顯著高于正常子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜單純或復(fù)雜型增生組和子宮內(nèi)膜不典型增生組(P<0.01，P<0.01，P<0.01)。子宮內(nèi)膜癌組織中PCNA的表達(dá)與患者年齡、臨床分期、病理分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及肌層浸潤(rùn)深度有均無(wú)相關(guān)性。但是有研究顯示PCNA的陽(yáng)性表達(dá)與病理分級(jí)和淋巴轉(zhuǎn)移相關(guān), 隨著去分化和淋巴轉(zhuǎn)移的進(jìn)行PCNA 陽(yáng)性表達(dá)增加, 提示了患者的不良預(yù)后。在臨床期別和肌層浸潤(rùn)方面與PCNA則關(guān)系不明顯。子宮內(nèi)膜癌組織內(nèi)PCNA陽(yáng)性陽(yáng)性表達(dá)率相對(duì)于其他組差異顯著，可以為臨床判斷子宮內(nèi)膜病變良惡性的輔助指標(biāo)。

PCNA、ER和PR參與了子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生與發(fā)展，且PR在子宮內(nèi)膜癌的侵襲和轉(zhuǎn)移中起作用。本實(shí)驗(yàn)提示聯(lián)合檢測(cè)PCNA、ER和PR的表達(dá)可以為臨床治療子宮內(nèi)膜癌提供重要依據(jù)。免疫組化檢測(cè)PCNA、ER和PR過(guò)程的安全、快捷、可重復(fù)性高、價(jià)格低廉、便于隨訪等優(yōu)點(diǎn)，將會(huì)對(duì)為子宮內(nèi)膜癌的早期診斷提供新的途徑，并為腫瘤治療提供新的依據(jù)，以提高臨床的治療水平和優(yōu)化治療方案，為子宮內(nèi)膜癌患者提供循證醫(yī)學(xué)證據(jù)，使患者更多獲益。

[1]白蘭,王迪迪,朱貴明,等.ER及E-Cad在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及意義研究[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2012，35(5):1-3

[2]伊鐵忠，糜若然，朱莉.子宮內(nèi)膜癌PTEN、PCNA和C-erbB2的表達(dá)及其意義[J]．中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2006，22(2):127-128

[3]Parkin DM, Bray F, Ferlay J, et al.Global cancer statistics, 2002[J].CA Cancer J Clin, 2005,55：74-108

[4]Sunamchok Srijaipracharoen, Siriwan Tangjitgamol, Sujitra Tanvanich, et al.Expression of ER, PR, and Her-2/neu in Endometrial Cancer: A Clinicopathological Study[J].Asian Pacific Journal of Cancer Prevention, 2010, 11:215-220

[5]于洋,王興華.PTEN基因與子宮內(nèi)膜癌的研究現(xiàn)狀[J].黑龍江醫(yī)藥科學(xué),2009，32(1):60-61

[6]Decruze SB, Green JA.Hormone therapy in advanced and recurrent endometrial cancer: a systematic review[J].Int J Gynecol Cancer, 2007,17：964-78

[7]伊鐵忠,糜若然,朱莉.子宮內(nèi)膜癌PTEN PCNA和C-erbB-2的表達(dá)及其意義[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2006，22(2):127-128