李曉燕

HPLC法測(cè)定黃菊消銀丸中鹽酸小檗堿的含量

李曉燕

（河南省商丘市第一人民醫(yī)院，商丘476000）

目的建立黃菊消銀丸中鹽酸小檗堿的含量測(cè)定方法。方法采用HPLC法，色譜條件為：色譜柱：Eclipse XDB-C18；流動(dòng)相：乙腈-0.05mol／l磷酸二氫鉀溶液（50∶50）（每100ml中加十二烷基硫酸鈉0.4g，再以磷酸調(diào)p H為4.0）；流速：1.0 ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：345nm。結(jié)果鹽酸小檗堿進(jìn)樣量在0.09418～1.8836μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=0.9993），平均回收率為98.59%，RSD =0.98%（n=6）。結(jié)論本方法操作簡(jiǎn)便，專(zhuān)屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確，可用于黃菊消銀丸的質(zhì)量控制。

鹽酸小檗堿；高效液相色譜法；黃菊消銀丸

黃菊消銀丸，是由黃連、金銀花、野菊花、蒲公英等藥材加工制成的復(fù)方制劑，具有清熱利膽，涼血解毒之功效，用于肝膽濕熱及血瘀引起的銀屑病，癥見(jiàn)皮膚瘙癢、起屑等。原標(biāo)準(zhǔn)中僅有顯微鑒別，沒(méi)有定量指標(biāo)，本文以方中君藥黃連的有效成分鹽酸小檗堿為指標(biāo)，建立了黃菊消銀丸中鹽酸小檗堿的高效液相測(cè)定方法，操作簡(jiǎn)便，省時(shí)，準(zhǔn)確，可作為黃菊消銀丸的質(zhì)量控制方法。

1 儀器與試藥

Thermo U3000型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器；鹽酸小檗堿對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110713-200911）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1色譜條件色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6× 150mm，5um）；流動(dòng)相：乙腈-0.05mol／l磷酸二氫鉀溶液（50∶50）（每100ml中加十二烷基硫酸鈉0.4g，再以磷酸調(diào)p H為4.0）為流動(dòng)相［1］；流速1.0ml·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)345nm；進(jìn)樣量10μl。

2.2線性關(guān)系考察取鹽酸小檗堿對(duì)照品約10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。按照“2.1”項(xiàng)色譜條件，分別進(jìn)樣1、3、5、10、12、15、18、20μl，記錄鹽酸小檗堿峰面積值，以峰面積積分值（Y）對(duì)對(duì)照品進(jìn)樣量（X）進(jìn)行線性回歸，得回歸方程：Y=627.38X+0.16r =0.9993。結(jié)果表明，鹽酸小檗堿對(duì)照品進(jìn)樣量在0.09418～1.8836μg范圍內(nèi)與峰面積值呈良好的線性關(guān)系。

2.3對(duì)照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品約10mg，精密稱(chēng)定，置100ml量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

2.4供試品溶液及陰性對(duì)照溶液的制備取本品約8.0g，研細(xì)，精密稱(chēng)定，置50ml量瓶中，加入甲醇-鹽酸（100∶1）的混合液適量，超聲處理30分鐘，放冷，加甲醇-鹽酸（100∶1）的混合液至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。另取缺黃連的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對(duì)照溶液。

2.5干擾試驗(yàn)取上述3種溶液，按照上述色譜條件，分別注入高效液相色譜儀，進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖，結(jié)果表明供試品溶液在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)的位置上，有相應(yīng)的色譜峰，而陰性對(duì)照溶液在此保留時(shí)間無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.6精密度試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD=1.02%（n=5），表明精密度良好。

2.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取同一對(duì)照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進(jìn)樣測(cè)定，RSD=1.05%，供試品溶液在6小時(shí)內(nèi)峰面積基本穩(wěn)定。

2.8加樣回收率試驗(yàn)稱(chēng)取6份已測(cè)得鹽酸小檗堿含量的供試品（含量為8.33ug／g），每份約4.0g，精密稱(chēng)定，置50m1量瓶中，另分別精密加入對(duì)照品溶液（濃度為0.03255mg／m1）1.00m1，制備成供試品溶液，分別測(cè)定鹽酸小檗堿的含量，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 加樣回收率試驗(yàn)結(jié)果（n，%）

2.9樣品測(cè)定取3批樣品，按“2.4”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，各進(jìn)樣10μl，按外標(biāo)法計(jì)算鹽酸小檗堿的含量，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 3批樣品中鹽酸小檗堿的含量（μg／g）

3 討論

鹽酸小檗堿是黃連的有效成分，本文建立的高效液相色譜法測(cè)定鹽酸小檗堿的含量，該方法操作簡(jiǎn)便，雜質(zhì)對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，重復(fù)性好，對(duì)控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量具有重要意義。

本文參考有關(guān)文獻(xiàn)［2-3］，針對(duì)本制劑的制備工藝及輔料的特性和影響因素，通過(guò)試驗(yàn)證明，超聲處理30分鐘提取較為完全，且操作簡(jiǎn)便快捷，故采用超聲提取。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì)中國(guó)藥典2010年版.一部.［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2009：285.

［2］劉鈺華，梁健欽.HPLC測(cè)定胃安膠囊中鹽酸小檗堿的含量［J］.華夏醫(yī)學(xué)，2010，23（2）：155-157.

［3］謝學(xué)淵，唐慧慧，狄亞敏.HPLC法測(cè)定前列通顆粒中鹽酸小檗堿的含量［J］.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2012，28（02）：161-163.（本文編輯：蘇 玲 本文校對(duì)：柳詩(shī)全 收稿日期：2013-10-25）

胃病患者的幾款藥膳

山藥百合大棗粥將山藥90克，百合40克，大棗15枚、薏苡仁30克及大米適量共煮粥。每日食2次。山藥具有補(bǔ)脾和胃之功能；百合清熱潤(rùn)燥；大棗、薏苡仁健脾和胃，諸物合用具有滋陰養(yǎng)胃、清熱潤(rùn)燥的作用。本粥特別適合中醫(yī)辨證屬胃陰不足者，患者常表現(xiàn)為胃脘隱痛、饑不欲食、口干咽燥、形體消瘦、舌紅少苔、脈細(xì)。

砂仁羊肉湯將砂仁10克，白胡椒3克，生姜數(shù)片及適量羊肉共煮湯，熟后放入適量食鹽。每周3次。其中砂仁溫中化濕、行氣和中；白胡椒、生姜辛溫理氣；羊肉辛溫補(bǔ)虛、養(yǎng)胃散寒。砂仁羊肉湯具有健脾散寒、溫胃止痛的作用，特別適合胃病中醫(yī)辨證屬脾胃虛寒者，患者常表現(xiàn)為胃脘隱痛、喜暖喜按、泛吐清水、四肢不溫、神疲乏力、舌淡苔白、脈細(xì)。

木耳炒肉片將黑木耳干品15克用溫水發(fā)好、洗凈，豬瘦肉60克切片放入油鍋中炒兩分鐘后，加入發(fā)好的黑木耳同炒，再加食鹽適量，清湯少許，燜燒5分鐘即可食。每周3次。其中黑木耳益胃滋腎、調(diào)理中氣，與豬瘦肉合用，可補(bǔ)益脾胃、調(diào)理中氣。特別適合因?yàn)榍橹静粫乘碌奈覆?，中醫(yī)辨證屬肝氣犯胃者，患者常表現(xiàn)為胃脘脹滿(mǎn)、疼痛連及胸脅、噯氣反酸，每因情志因素而發(fā)，苔薄白、脈弦。

——中國(guó)中醫(yī)藥報(bào)

Determination of Berberine Hydrochloride in Huangjuxiaoyin pill by HPLC

Li Xiaoyan
（Shangqiushi the first people's hospital shangqiushi 476000）

ObjectiveTo set up a method to determination of berberine hydrochloride in Huangjuxiaoyin Pill.MethodThe content of berberine hydrochloride determined by HPLC.The chromatographic system consisted of C18 column，using acetonitrile-0.05mol／l potassium dihydrogen phosphate（50：50）（Each 100ml plus twelve sodium dodecyl sulfate 0.4g，and then the phosphoric acid adjust p H to 4）as mobile phase.The content was detected at a waveleng of 345 nm，the flow rate was 1.0 ml·min-1.Resultshe berberine hydrochloride have a good tincar rolatim in the range of 0.09418～1.8836μg（r=0.9993），the average recovery was 98.59%and RSD=0.98%（n=6）.ConclusionThe established method is simple，sensitive and accuracy.It can be used for quality control of Huangjuxiaoyin Pill.

Berberine hydrochloride；HPLC；Huangjuxiaoyin Pill

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.04.094

：1672-2779（2014）-04-0150-02