江 紅 段濱紅 杜馥曼 向朝峰 仲 恒

（黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150036）

我國(guó)2型糖尿?。═2DM）患病率逐年攀升，而肥胖常是T2DM的伴隨和前導(dǎo)因素。但肥胖患者是否發(fā)生T2DM決定于胰島素抵抗的程度和β細(xì)胞的功能。最近研究發(fā)現(xiàn)，2型糖尿病患者尤其是肥胖的2型糖尿病患者存在胰高血糖素樣肽-1（GLP-1）分泌減少，B細(xì)胞對(duì)GLP-1的敏感性下降。最近上市的GLP-1類似物給糖尿病的治療帶來(lái)了新的希望［1］，但臨床應(yīng)用受限。既往研究發(fā)現(xiàn)，黃芪活性成分可以有效防治2型糖尿?。?-6］。本研究觀察黃芪對(duì)糖尿病大鼠血清GLP-1、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-18（IL-18）的影響，為糖尿病的治療提供新思路。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1．1 試劑和動(dòng)物 大鼠常規(guī)飼料購(gòu)自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。鏈脲佐菌素注射液（STZ）購(gòu)自Sigma公司。3周齡斷乳期雄性、健康清潔級(jí)大鼠60只，體質(zhì)量 55～70 g。 飼養(yǎng)環(huán)境清潔，室溫（24±3） ℃，每籠 5只，自由攝食、飲水，每周測(cè)量1次體質(zhì)量。購(gòu)自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。黃芪注射液由石家莊神威藥業(yè)提供。GLP-1、TNF-α、IL-18試劑盒為北京科美東雅生物技術(shù)有限公司產(chǎn)品。

1.2 模型制備 大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)選取40只大鼠以STZ 30mg/kg一次性腹腔內(nèi)注射，1周后測(cè)血糖，空腹血糖（FBG）>11.1mmol/L，并出現(xiàn)多飲、多尿癥狀為糖尿病大鼠成模標(biāo)準(zhǔn)。另20只正常喂養(yǎng)，為對(duì)照組。

1.3 分組與給藥 將成模大鼠隨機(jī)分為模型組與黃芪組，黃芪組每日將60mg/mL黃芪藥液按200mg/kg體質(zhì)量灌胃給藥，同時(shí)對(duì)照組和模型組灌胃等量的生理鹽水。

1.4 標(biāo)本采集與檢測(cè) 2周后，給予3組大鼠500 g/L葡萄糖按2 g/kg體質(zhì)量灌胃，30min后3組大鼠尾靜脈采血。應(yīng)用酶免法（ELISA）方法測(cè)定各組大鼠空腹血清GLP-1、IL-18、TNF-α水平及大鼠服糖后30min血清GLP-1水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件。兩組間比較采用t檢驗(yàn)。單因素相關(guān)性分析用Logistic回歸分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

模型組及黃芪組血清空腹及糖負(fù)荷后GLP-1水平低于對(duì)照組，TNF-α、IL-18水平高于對(duì)照組 （P＜0.01）。黃芪組血清空腹及餐后GLP-1水平高于模型組，TNF-α、IL-18 水平低于模型組（P＜0.05）。 GLP-1水平與IL-18、TNF-α呈負(fù)相關(guān)（相關(guān)系數(shù)r=-0.64，P＜0.05；r=-0.37，P＜0.05）。

表 1 各組大鼠 GLP-1、IL-18 、TNF-α 水平比較（±s）

表 1 各組大鼠 GLP-1、IL-18 、TNF-α 水平比較（±s）

與黃芪組比較，△P＜0.05；與對(duì)照組比較，*P＜0.01。

組 別 n GLP-1（pmol/L）服糖后GLP-1（pmol/L） IL-18（μg/L） TNF-α（ng/mL）對(duì)照組 20黃芪組 24 21.67±2.34 52.23±6.21 17.66±1.38 0.24±0.06 14.42±1.35* 35.67±4.34* 31.12±4.76* 0.51±0.18*模型組 288.79±0.73*△ 15.29±1.26*△ 42.16±7.81*△ 0.79±0.21*△

3 討 論

T2DM在伴有胰島素抵抗及β細(xì)胞功能受損的同時(shí)，胰高血糖素分泌增多也十分突出。GLP-1以葡萄糖濃度依賴性方式促進(jìn)胰腺泌分泌胰島素，同時(shí)減少胰島α細(xì)胞分泌胰高血糖素，降低血糖。目前已經(jīng)上市的GLP-1類似物由于其價(jià)格昂貴、半衰期短等缺點(diǎn)導(dǎo)致其無(wú)法在臨床中廣泛應(yīng)用。因此，如果能發(fā)現(xiàn)其他有效、經(jīng)濟(jì)的能夠促進(jìn)內(nèi)源性GLP-1分泌的物質(zhì)，對(duì)臨床糖尿病患者治療有重大意義。GLP-1是腸道黏膜L細(xì)胞分泌的一種激素，可促進(jìn)胰島β細(xì)胞增生、抑制β細(xì)胞凋亡、減少胰高血糖素的分泌［7］，在防止β細(xì)胞衰竭方面具有重要意義。GLP-1具有改善胰島素抵抗的作用［8］。同時(shí)GLP-1的促胰島素分泌作用具有葡萄糖濃度依賴性，不易引起低血糖；同時(shí)其具有減輕體質(zhì)量的功效，是目前2型糖尿病研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。

近年研究發(fā)現(xiàn)，許多炎癥因子參與了T2DM的發(fā)生發(fā)展，因此改善胰島素抵抗對(duì)防治T2DM具有重要意義。據(jù)報(bào)道，具有降糖作用的中藥達(dá)到70余種［9］，但國(guó)內(nèi)外關(guān)于中藥對(duì)2型糖尿病患者GLP-1水平影響的研究不多。本研究發(fā)現(xiàn)，模型組及黃芪組血清空腹及糖負(fù)荷后GLP-1水平低于對(duì)照組，TNF-α、IL-18水平高于對(duì)照組 （P＜0.01）。黃芪組血清空腹及餐后GLP-1水平高于模型組，TNF-α、IL-18水平低于模型組（P＜0.05）；GLP-1水平與 IL-18、TNF-α 呈負(fù)相關(guān)。黃芪可以升高2型糖尿病大鼠血清GLP-1水平，可以在臨床上作為GLP-1分泌的刺激劑，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果為糖尿病的早期預(yù)防及治療提供了一些論據(jù)。

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