詹秀蘭

【摘 要】本文基于實(shí)驗(yàn)室水質(zhì)檢測操作中四個常規(guī)測定參數(shù)—微生物、高錳酸鹽指數(shù)、氨氮、總氮，在操作過程中對測定結(jié)果產(chǎn)生影響的注意事項(xiàng)進(jìn)行分析。

【關(guān)鍵詞】實(shí)驗(yàn)室；水質(zhì)檢測；參數(shù)

0.引言

水是生命之源、生產(chǎn)之要、生態(tài)之基。水質(zhì)檢測是我國進(jìn)行水資源管理與保護(hù)的重要基礎(chǔ)和手段，水質(zhì)檢測提供的水質(zhì)信息十分重要。

1.實(shí)驗(yàn)室微生物、高錳酸鹽指數(shù)、氨氮、總氮的測定

1.1微生物的檢測

微生物檢測是水質(zhì)檢測中一個不可忽視的部分，對于微生物檢測的精確程度要求也越來越高。怎樣提高微生物檢測率，我認(rèn)為可以從以下幾個方面考慮。

1.1.1嚴(yán)格用具的清洗

保證檢測用具的真正清潔、無菌是保證檢測精度的第一步。因此必須保證用具（包括采樣瓶、平皿、吸管等）清洗符合要求，因此不但清洗時要及時更換清洗液，使之達(dá)到一定濃度，而且用具清洗必須徹底，無殘留。

1.1.2加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室無菌環(huán)境的控制，保持四壁光潔，嚴(yán)禁掛塵

大量細(xì)菌能夠附著在空氣中的粉塵中，濃度可以達(dá)到107個/L—108個/L，因此必須保持檢測室、尤其是無菌室四壁及地面光潔，無菌室內(nèi)還要盡量少放置物品，便于消毒殺菌。潮濕也是細(xì)菌滋生的一大因素。

1.1.3合理存放及使用培養(yǎng)基

大家使用的合成培養(yǎng)基，一般為粉末狀，應(yīng)置于5℃-25℃，避光、干燥保存，并在保質(zhì)期內(nèi)使用。若培養(yǎng)基粉末變黃、變粘，則很可能變質(zhì)。已配制好的培養(yǎng)基應(yīng)于4℃冰箱保存，并盡快使用。使用時，應(yīng)將培養(yǎng)基均勻加熱，使之熔化。若使用電爐加熱，應(yīng)避免熱糊。待其冷卻至60℃左右，方可進(jìn)行接種。培養(yǎng)基以其基體均一，色澤光亮、透明為優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基。

1.1.4定期殺菌、標(biāo)準(zhǔn)接種

每次接種前，將無菌室紫外燈打開30min，打開潔凈工作臺20min后，方可工作。工作完畢后，再將紫外燈打開30min殺菌。經(jīng)常用酒精或來蘇爾進(jìn)行器具滅菌。另外，微生物檢測室盡量避免外來人員出入，減少空氣流動，避免不潔空氣的帶入。在樣品移至無菌室前，先將采樣瓶體外壁連同盛裝樣品的容器一同用酒精棉擦拭，然后換上無菌工作服、拖鞋、手套、口罩等，再將其移至無菌室內(nèi)。接種時，動作準(zhǔn)確，迅速，不要讓樣品灑落，造成交叉污染。

1.2高錳酸鹽指數(shù)的測定

1.2.1水浴加熱時間必須嚴(yán)格控制

采用酸性高錳酸鉀法測定高錳酸鹽指數(shù)，測定只是規(guī)定時間內(nèi)以高錳酸鉀為氧化劑處理水樣時所消耗的量，反應(yīng)時間將直接影響測定的結(jié)果，因此對樣品進(jìn)行水浴加熱時，一定要在水浴沸騰后將樣品放入水浴鍋中，水浴沸騰，開始計(jì)時，并嚴(yán)格控制時間為30min±2min，以提高數(shù)據(jù)的精密性。若水浴加熱時間過長，樣品測定值會增大、反之則減小。

1.2.2 KMnO4溶液的濃度必須準(zhǔn)確標(biāo)定

滴定時室溫下反應(yīng)慢，溶液加熱至70℃-80℃，但溫度不能高于90℃（酸性條件下，H2C2O4會部分分解）。滴定剛開始的時候，滴定反應(yīng)速度較慢，當(dāng)?shù)稳氲腒MnO4與H2C2O4反應(yīng)生成Mn2+而起到催化劑的作用后，反應(yīng)速度才逐漸加快，因此高錳酸鉀溶液標(biāo)定時的滴定速度在開始時不宜太快，應(yīng)等第一滴KMnO4紅色褪去之后再滴入第二滴，否則所加入的KMnO4來不及反應(yīng)即在酸性溶液中分解，從而影響高錳酸鉀溶液標(biāo)定的準(zhǔn)確度。終點(diǎn)的判斷，用KMnO4溶液滴定至溶液出現(xiàn)粉紅色并維持0.5min～1.0min不褪色時，即認(rèn)為達(dá)到滴定終點(diǎn)。

1.3氨氮的測定（HJ535-2009）

1.3.1對檢測用水的要求

氨氮的測定通常采用納氏試劑比色法，實(shí)驗(yàn)過程對水的要求很高，應(yīng)嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)用水的質(zhì)量，最好采用進(jìn)行二次加工得到無氨水，或者采用復(fù)合樹脂交換柱制得的新鮮去離子水。在實(shí)際操作中，一般控制試劑空白吸光度不超0.030（光程l0mm比色皿），這樣可大大減少因?yàn)闊o氨水的質(zhì)量控制不好而產(chǎn)生的測定誤差。另外納氏試劑在配制時應(yīng)注意，按方法（HJ535-2009）配制時配制的溶液要靜置過夜，將上層清液移入聚乙烯瓶中密封保存，然后放入冰箱中低溫冷藏，以防顏色逐漸加深。

1.3.2實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的影響

氨氮的測定應(yīng)選擇在無氨氣的環(huán)境中進(jìn)行，不應(yīng)有揚(yáng)塵，按鹽類化合物，所使用的試劑、玻璃器皿等實(shí)驗(yàn)用品要單獨(dú)存放，因?yàn)椴Ａ髅髽O易吸附空氣中的氨，因而造成測定的偏差。而且玻璃器皿的洗滌應(yīng)避免采用重鉻酸鉀洗液，因?yàn)榇讼匆阂赘街谌萜魃希哂袕?qiáng)烈的氧化性，影響氨氮的測定。玻璃器皿在必要時可用（1+9）的鹽酸浸泡，且清洗、涼干后在空氣中存放時間不宜太長即可用來進(jìn)行樣品的分析測定。

1.3.3反應(yīng)條件的影響

（1）PH值的影響。

由氨氮顯色反應(yīng)原理可知，顯色溶液的濃度影響反應(yīng)平衡，對顯色效果有明顯影響。實(shí)驗(yàn)表明：水樣pH值<6，反應(yīng)靈敏度較低，吸光度值隨pH值的減小而降低；pH值在6～8時，吸光度值較高；pH值>10時，出現(xiàn)大量的紅棕色沉淀。因此，水樣保存時如果加入了濃硫酸，在測定前要用堿中和至pH值為6～8，此外，為保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，水樣與標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值應(yīng)盡量一致，以免造成誤差。

（2）溫度的影響。

溫度會影響納氏試劑與氨氮的反應(yīng)速度，并影響溶液的顯色效果。實(shí)驗(yàn)表明，反應(yīng)溫度為25℃時，顯色最安全；20℃時吸光度無明顯改變，但顯色不完全；當(dāng)溫度達(dá)到30℃時，溶液褪色，吸光度出現(xiàn)明顯偏低現(xiàn)象。因此，實(shí)驗(yàn)顯色溫度應(yīng)控制在20℃～25℃，以保證實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果的可靠性。

（3）反應(yīng)時間的影響。

反應(yīng)時間小于l0min，溶液顯色不完全；l0min～30min顏色較穩(wěn)定；30min～45min顏色有加深趨勢；45min～90min顏色逐漸減褪。因而，用納氏試劑光度法測定水中氨氮時，顯色時間應(yīng)控制在l0min～30min，以盡快的速度進(jìn)行比色，達(dá)到分析的精密度和準(zhǔn)確度。

1.3.4總氮的測定（GB/T11894-1989）

總氮是指水體中所有含氮化合物中的氮含量，反映水體富營養(yǎng)化程度的重要指標(biāo)之一。通常采用堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法（ GB/T11894-1989） 測定。此法測定總氮雖然看似簡單，但是此方法要求空白值的吸光度不得超過0.030，并不是很容易做到。所以有很多細(xì)節(jié)方而的問題需要注意。

（1）玻璃器皿的清潔。

在總氮的高溫消解過程中，玻璃器皿壁上難以清洗的有機(jī)物和其他物質(zhì)會混入介質(zhì)中而造成空白值偏大或者平行性較差，所以所有玻璃器皿最好用鹽酸（1+9）或者硫酸（l+35）浸泡，清洗后再用無氨水沖洗數(shù)次，比色時用的石英比色皿也要用鹽酸（1+9）清潔干凈。

（2）消解溫度、壓力和時間的控制。

消解時應(yīng)嚴(yán)格按照分析方法規(guī)定的消解的溫度為120℃～124℃，（此時鍋內(nèi)壓力1.1kg/cm2～1.4kg/cm2）控制。消解時，（GB11894-1989）中要求達(dá)到規(guī)定的溫度和壓力后開始計(jì)時，筆者的經(jīng)驗(yàn)是直接打開放氣閥加熱一段時間，充分排出蒸氣滅菌器內(nèi)的冷空氣、放出熱蒸氣后再關(guān)閉放氣閥消解，并且將消解溫度控制在123℃，消解三十分鐘后，自然降壓至與外界相同時再打開放氣閥放氣，然后打開鍋蓋。其目的是為了保證總消解時間足夠長，過硫酸鉀分解完全，這樣測定結(jié)果更為理想。

2.結(jié)語

實(shí)驗(yàn)室水質(zhì)檢測結(jié)果的質(zhì)量決定于檢測過程完成的質(zhì)量，過程存在質(zhì)量缺陷，將導(dǎo)致檢測結(jié)果不準(zhǔn)確、不正確和不合理，因此，實(shí)驗(yàn)室操作要在細(xì)節(jié)上下功夫，盡量避免誤差。 [科]

【參考文獻(xiàn)】

[1]生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)、生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法（GB/T5750.1-5750.13-2006）.