王 凱 胡福良

（浙江大學動物科學學院，杭州310058）

國際蜂膠研究動態(tài)
——第43屆國際養(yǎng)蜂大會蜂膠論文評析

王 凱 胡福良

（浙江大學動物科學學院，杭州310058）

2013年9月29日至10月4日在烏克蘭首都基輔舉行的第43屆國際養(yǎng)蜂大會（XXXXIII International Apimondia Congress）吸引了世界120個國家和地區(qū)的8500多名蜂業(yè)同仁。本文對參加此次學術(shù)交流的蜂膠相關(guān)的論文進行介紹與評述，旨在為關(guān)注該領(lǐng)域?qū)W術(shù)動態(tài)與產(chǎn)業(yè)發(fā)展的同仁提供參考。

1 學術(shù)交流大會概況

此次學術(shù)交流大會的主題是“Beyond the Hive: Beekeeping and Global Challenges”（超越蜂箱——養(yǎng)蜂業(yè)與全球性挑戰(zhàn)），共有來自85個國家的超過1000名科學家參與。大會組委會從征集到的超過1200份摘要中遴選出340份學術(shù)報告，收錄到此次大會的論文集中。學術(shù)交流大會從9月30日開始一直持續(xù)到10月3日，大會主辦方也將所有學術(shù)論文組織了七個專題論壇：蜂療、蜂業(yè)經(jīng)濟、授粉與蜜粉源植物、養(yǎng)蜂技術(shù)及蜂產(chǎn)品品質(zhì)、蜜蜂生物學、蜜蜂健康、養(yǎng)蜂業(yè)與農(nóng)村發(fā)展，與此同時，組委會也組織了一系列圓桌會議，就養(yǎng)蜂業(yè)關(guān)注的熱點問題進行討論。

參加本次會議交流的與蜂膠相關(guān)的論文共有49篇，其中口頭報告21篇，墻報28篇。這49篇論文大部分集中于蜂療和養(yǎng)蜂技術(shù)與品質(zhì)兩個專題中，其中蜂療專題收錄口頭報告14篇，墻報23篇；養(yǎng)蜂技術(shù)與蜂產(chǎn)品品質(zhì)專題收錄口頭報告6篇，墻報5篇。另外還有一篇蜂膠相關(guān)的口頭報告收錄于蜜蜂健康專題中。在國家分布方面，論文作者來自10個國家，在21篇口頭報告中，印度尼西亞有4篇論文位居第一，其次是中國、土耳其和東道主烏克蘭，分別有3篇，巴西、俄羅斯有2篇，其他作者分別來自摩洛哥、法國、保加利亞和澳大利亞。23篇墻報的論文作者來自14個國家，土耳其以8篇排名第一，其次是巴西5篇，哥倫比亞、匈牙利、俄羅斯均有2篇，阿爾及利亞、波蘭、葡萄牙等9個國家均各有1篇。下面著重針對此次大會上蜂膠研究相關(guān)的口頭報告分別進行介紹。

2 蜂膠的藥理活性研究

2.1 蜂膠的抗菌活性

蜂膠具有很好的抗菌活性，對細菌、真菌的生長都有一定的抑制作用。來自巴西Apis Flora Indl.公司的Andresa A.Berretta等研究了巴西蜂膠乙醇提液（EPPAFR）黏膜吸附劑在流行外陰陰道念珠菌病治療中的作用。流行外陰陰道念珠菌（CandidiasisVulvovaginal）是女性陰道感染的主要原因之一，臨床治療通常采用多烯類及唑類抗真菌藥物進行治療，但這些藥物通常存在很強的毒副作用，且易造成病菌的耐藥性。他們采用不同劑型的粘膜吸附劑，配合使用蜂膠醇提物，采用體內(nèi)外實驗相結(jié)合的方法進行研究。他們的實驗結(jié)果證實EPP-AFR對真菌生長的不同階段均有抑制作用，而蜂膠乙醇提液中的橙花叔醇也同抗真菌活性密切相關(guān)，同時蜂膠提取液與真菌共孵育6～8小時效果最佳。液流學的及粘膜吸附結(jié)果顯示，采用1%羧乙烯聚合物和1%殼聚糖是最佳的假塑性配方，且粘性最小，毒性極低。在Balb/c小鼠上的實驗顯示，含有粘膜吸附劑的蜂膠醇提液具有良好的抗真菌活性，同市售抗真菌藥物Neo Quimica療效類似。

抗生素抵抗一直是公共衛(wèi)生安全的一大挑戰(zhàn)，近年來將蜂產(chǎn)品運用于耐抗生素細菌引起疾病的治療受到人們的廣泛關(guān)注。來自烏克蘭巴卡莫列茨國立醫(yī)科大學的OksanaKorbut等研究聯(lián)合使用蜂膠、抗生素對耐抗生素型沙門氏菌（Salmonella）的治療效果。他們將48株細菌進行體外培養(yǎng)，研究15種抗生素與不同濃度蜂膠對這些細菌生長的抑制作用。將3 mg/ml蜂膠與不同抗生素聯(lián)合使用，可使最小抑菌濃度（MIC）減少5到20倍。提高蜂膠濃度至5 mg/ml能進一步減少MIC。同時蜂膠對多種沙門氏菌菌株均有效果，增強了抗生素的殺菌效果，提高抗生素的抗微生物活性。他們還將10%蜂膠酊劑用于口腔治療（1～2滴/天，1天3次，持續(xù)7天），也證實聯(lián)合療法比單一使用抗生素效果更佳。蜂膠治療效果可能同細胞吞噬及抗菌活性有關(guān)。

在牙髓壞死及牙髓炎癥中，糞腸球菌（Enterococcus faecalis）是最容易造成牙髓治療術(shù)后感染的病原菌，且耐藥性極強。通常使用的消毒、沖洗并不能有效殺滅糞腸球菌，且不能對糞腸球菌的菌膜造成傷害。來自印尼愛爾朗加大學的Tamara Yuanita等研究了東爪哇蜂膠提取物對糞腸球菌菌膜的影響及最低殺菌濃度（MBC）。結(jié)果表明，制備得到的東爪哇蜂膠提取液可以有效殺滅糞腸球菌，特別是6%的蜂膠提取液能有效損傷糞腸球菌菌膜。

幼蟲芽孢桿菌（Paenibacillus larvae）孢子是美洲幼蟲?。ˋmerican Foulbrood Disease,AFB）的主要病原。來自土耳其哈杰特泰佩大學的AygünSchiesser研究了蜂膠對不同基因型幼蟲芽孢桿菌的預防效果。通過對來自14個不同地區(qū)的4種幼蟲芽孢桿菌（Eric I,Eric II,Eric III,Eric IIII）的研究發(fā)現(xiàn)，蜂膠提取物能有效抑制幼蟲芽孢桿菌的增值，這種抑制效果同蜂膠使用劑量密切相關(guān)。這也提示可將蜂膠作為治療美幼病的預防及輔助治療手段。

2.2 蜂膠對疾病的防治作用

蜂膠具有多種藥理活性，在疾病預防、治療中應用廣泛。為了進一步闡明中國蜂膠（楊樹型）的抗炎作用機制，來自中國浙江大學的王凱等研究了中國蜂膠抗炎活性的分子機制。他們采用中國蜂膠乙醇提取物作為研究對象，分析其化學組成，并研究了中國蜂膠乙醇提取物的體外抗炎作用。高效液相色譜分析結(jié)果表明，中國蜂膠乙醇提取物含豐富的黃酮類化合物，主要包括蘆丁、楊梅酮、槲皮素、山奈酚、芹菜素、松屬素、柯因和高良姜素等。接著又發(fā)現(xiàn)中國蜂膠乙醇提取物能顯著抑制脂多糖（LPS）誘導小鼠RAW 264.7細胞系相關(guān)炎癥因子（一氧化氮、IL-1β、IL-6）的產(chǎn)生，并能夠抑制炎癥過程中iNOS,IL-1β和IL-6基因的mRNA表達水平，而且這種效果具時間依賴、劑量依賴效應。此外，中國蜂膠乙醇提取物能抑制IκBα和AP-1蛋白的磷酸化，但不影響IκBα蛋白的降解。報告基因結(jié)果顯示中國蜂膠乙醇提取物能有效抑制TNF-α刺激引起的HEK 293T細胞的NF-κB通路的激活。該研究為理解中國蜂膠的抗炎作用及其作用機制提供了新思路，并為中國蜂膠未來在替代及補充療法中的應用提供依據(jù)。

瘧疾是世界上最重要的寄生蟲病之一，它主要是由伯氏瘧原蟲（Plasmodium berghei）引起的。來自印尼印尼愛爾朗加大學的James S Hutagalung等研究了蜂膠提取物的抗瘧原蟲活性。他們在BALB/c小鼠中接種瘧原蟲，并連續(xù)4天口服不同濃度的蜂膠提取物，肝、脾組織病理學結(jié)果證實蜂膠醇提物能有效抑制寄生蟲的繁殖，并很好地維持了肝臟、脾臟的功能，同時蜂膠提取物也能很好地增強機體的免疫反應。

來自摩洛哥西迪·默罕默德·本·阿卜杜拉大學的LyoussiBadiaa等研究蜂膠對糖尿病及其并發(fā)癥的保護作用。糖尿病及其并發(fā)癥主要是由炎癥及氧化應激造成的，其主要表現(xiàn)為活性氧（ROS）水平的升高，過量產(chǎn)生的ROS會造成脂質(zhì)過氧化及蛋白質(zhì)的氧化過程。蜂膠的抗氧化、氧自由基清除能力主要歸功于蜂膠中豐富的酚酸及黃酮類化合物?？诜淠z可以顯著緩解大鼠因鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）誘導產(chǎn)生的糖尿病癥狀，包括緩解胰島素抵抗，降低糖基化血紅蛋白含量，抑制肝酶的產(chǎn)生，同時升高肝腎谷胱甘肽過氧化物酶（Glutathione peroxidase）的含量等。他們也研究了楊樹型蜂膠中主要活性成分咖啡酸苯乙酯（CAPE）及巴西綠蜂膠中主要活性成分阿替匹林C的抗糖尿病效果，發(fā)現(xiàn)CAPE能有效減少心臟組織ROS的生成，同時在大鼠感染性休克急性炎癥模型中，使用CAPE能有效降低促炎性細胞因子、提供抗炎性細胞因子的生成。而阿替匹林C的效果主要同抑制一氧化氮及前列腺素E2的生成有關(guān)。這些研究顯示蜂膠、蜂膠中的主要活性成分對預防、控制糖尿病具有非常重要的意義。

3 蜂膠在畜禽生產(chǎn)中的應用研究

蜂膠在畜禽生產(chǎn)中有著非常廣泛的應用。近年來奶牛蹄病一直是奶牛業(yè)的重大問題，該病會對奶牛生產(chǎn)造成巨大影響，長期治療成本很高。來自烏克蘭盧甘斯克國立農(nóng)業(yè)大學的VitalyIzdepskyy等研究蜂膠精油對奶牛牛蹄壞死過程的治療作用。他們研制出了一種含蜂膠精油及硅膠吸附劑的外用藥膏，在膿性壞死牛蹄部分使用該藥膏具有明顯的凈化及解毒功效，同時能減輕繃帶同傷口的粘連，增加傷口附近抗菌物質(zhì)的含量，阻止毒素在組織間的擴散，從而維持、促進傷口附近的微循環(huán)功能。該種藥膏相較于傳統(tǒng)抗生素藥物而言，對牛蹄部位化膿性壞死具有更持久、更有效的治療效果。來自土耳其穆斯塔法·基馬爾大學的Sibel－Canogullari等研究了飼料中添加蜂膠及蜂花粉對（日本）鵪鶉生長性能及機體組成的影響。他們在日糧中添加0.5或10 mg/kg的蜂膠提取物，實驗結(jié)果表明蜂膠并不能影響鵪鶉的體重增加、飼料效率及體組成（p＞0.05）。

4 蜂膠的化學成分及質(zhì)量控制研究

蜂膠的化學成分取決于其地理來源、植物分布情況以及當?shù)氐臍夂驐l件，而蜂膠的化學成分是蜂膠發(fā)揮生物學活性的基礎(chǔ)。來自巴西圣瑪利亞聯(lián)邦大學的ElisabeteDockhorn等分析了不同季節(jié)采集得到的巴西南部蜂膠的化學成分，共采集了10個蜂膠樣本，包括春季1個樣本，夏季4個樣本，秋季2個樣本，冬季3個樣本。他們通過高效液相色譜（HPLC）結(jié)果分析了蜂膠中的13種代表性化合物的含量，包括綠原酸、咖啡酸、槲皮素、楊梅酮、木樨草素等?？Х人?、蘆丁、木樨草素、芹菜素、山奈酚在除了秋季、冬季采集的蜂膠樣本中均被檢出；木樨草素、5－糖苷僅在秋季和冬季采集的2個樣本中檢出；類似地，花旗松素僅在三個冬季采集和一個秋季采集的樣本中被檢出；而迷迭香酸（rosmarinic acid）在兩個冬季采集的樣本中被檢出；芹菜素在除了兩個采集于春季、夏季的樣本之外，均被檢出。他們的研究進一步證實了蜂膠中的成分的確與季節(jié)密切相關(guān)，而秋季和冬季采集得到的蜂膠樣本成分更為豐富。

來自保加利亞科學院的Bankova院士是國際蜂膠研究領(lǐng)域的領(lǐng)軍人物，此次她也帶來了有關(guān)俄羅斯Perm（楊樹-樺樹-山楊型）蜂膠的化學成分以及其抗菌活性研究的新進展。她們發(fā)現(xiàn)Perm蜂膠的總黃酮、總酚酸含量符合國際蜂聯(lián)對楊樹型蜂膠標準的特征，其中酚酸類含量為24±2%，類黃酮和黃酮醇含量約為3.6±0.5%，二氫黃酮和二氫黃酮醇類含量約為6.3± 0.3%。而蜂膠樣本具有高黃酮類化合物的也表現(xiàn)出更強的抗菌活性，其最小抑菌濃度（MIC）值也更小。這些研究結(jié)果證實多酚類化合物與MIC之間存在一定的轉(zhuǎn)化關(guān)系。

來自法國國立昂熱大學的BoisardSéverine等研究了法國BFA蜂膠提取物的化學成分及抗氧化活性。BFA蜂膠是由法國“Ballot-FlurinApiculteurs”公司提供的由法國不同地區(qū)24個蜂膠樣本混合組成。他們對BFA蜂膠采用五種不同溶劑進行提取，包括水、70%乙醇、甲醇、二氯甲烷及四種混合溶劑，采用高效液相色譜（HPLC）、高效液相色譜/質(zhì)譜（HPLC/MS）、核磁共振（NMR）等方法分析BFA蜂膠的主要成分，采用DPPH、ORAC法分析了BFA蜂膠的體外抗氧化活性。結(jié)果顯示，不同溶劑（水溶劑除外）提取蜂膠均含酚酸、酚酸酯、黃酮類化合物，而水提取蜂膠主要含酚酸類化合物。蜂膠的抗氧化活性很強，是新近批準用于歐洲食品添加劑迷迭香（rosemary）提取物的2～5倍。但蜂膠提取物中溶劑殘留問題仍需注意。

來自澳大利亞悉尼大學的Colin Duke等研究了澳洲袋鼠島蜂膠類型及其分布。澳洲袋鼠島同澳洲大陸相對隔離，蜜蜂采集蜂膠的來源相對獨立、固定。前期研究Duke等已經(jīng)從3種植物來源中鑒別得到5種類型的蜂膠。主要蜂膠類型都富含prenylatedcinamate類化合物和prenylatedstilbence類衍生物，這在其他地區(qū)蜂膠中是不太常見的。五類蜂膠的分布也為袋鼠島蜂膠的深度開發(fā)利用與質(zhì)量控制提供了依據(jù)。他們對從2006年至2013年源自72個蜂場采集得到的超過400個蜂膠樣本進行化學成分分析，分析方法包括高效液相色譜法（HPLC）、薄層色譜法（TLC）、核磁共振質(zhì)譜法（NMR）等，同時他們也成功將三類蜂膠同他們的植物來源進行對應。

來自浙江大學動物科學學院的平舜等報告了中國楊樹型蜂膠的代表性黃酮類化合物：松屬素、柯因及高良姜素。中國研究者通常以8種黃酮（蘆丁、楊梅酮、槲皮素、山奈酚、芹菜素、松屬素、柯因、高良姜素）作為評價中國蜂膠質(zhì)量的重要指標，但鮮有報道此8種黃酮是否在中國楊樹型蜂膠中確實存在。該研究從中國15個省份采集了53個中國蜂膠樣本，分析了這些樣本中的黃酮類化合物。研究結(jié)果表明，8種黃酮類化合物并不一定全部出現(xiàn)于中國蜂膠提取物中，特別是楊梅酮、槲皮素、芹菜素在很多蜂膠樣本中都未檢出，而松屬素、柯因、高良姜素卻在所有中國蜂膠中檢測到，且這3種黃酮相對含量也很高。盡管中國蜂膠提取物的化學成分十分復雜，不同地區(qū)、不同季節(jié)采集的蜂膠化學成分差異很大，采用該研究所選定的標志性黃酮類化合物仍可為蜂膠的質(zhì)量控制提供重要參考。

來自浙江大學動物科學學院的張翠平等報告了對中國市場上流通的蜂膠、蜂膠半成品中楊樹膠摻假情況的調(diào)查報告，研究采用水楊苷作為標志物，采用高效液相色譜法對67個樣本進行了檢測。其中23個樣本未檢測出水楊苷，而66%的樣本中檢測到水楊苷的存在，這也意味著這些樣本可能摻有楊樹膠。在所測樣本中有50個是蜂膠產(chǎn)品，而同一廠家生產(chǎn)的不同蜂膠產(chǎn)品的檢測結(jié)果完全一致，13個蜂膠生產(chǎn)廠家的27個蜂膠產(chǎn)品中均可檢測出水楊苷。該研究為蜂膠產(chǎn)品的真實性提供重要參考依據(jù)。

5 結(jié)語

國際養(yǎng)蜂大會之行，讓我們更多地了解世界蜂業(yè)的發(fā)展動態(tài)，掌握國際蜂業(yè)研究和關(guān)注熱點，領(lǐng)略世界蜂業(yè)取得的最新成果。蜂膠研究作為蜂產(chǎn)品研究的熱點領(lǐng)域，近年來發(fā)展很快，研究水平穩(wěn)步提高?？上驳氖?，中國作為蜂膠生產(chǎn)第一大國，在此次大會上也有很突出的表現(xiàn)。他山之石，可以攻玉，相信在了解蜂膠研究最新進展的基礎(chǔ)上，在國內(nèi)同行的共同努力下，一定能夠?qū)⑽覈淠z基礎(chǔ)研究及開發(fā)利用推上新的臺階。