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        致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸組成及營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

        2014-01-20 10:52:43霍彩琴田福東申麗威魏曉雙國(guó)博聞李文濱劉珊珊
        食品科學(xué) 2014年9期
        關(guān)鍵詞:東農(nóng)亞基組分

        拓 云,霍彩琴,田福東,申麗威,宋 波,藍(lán) 嵐,魏曉雙,國(guó)博聞,李文濱,劉珊珊,*

        致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸組成及營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

        拓 云1,霍彩琴2,田福東3,申麗威1,宋 波1,藍(lán) 嵐1,魏曉雙1,國(guó)博聞1,李文濱1,劉珊珊1,*

        (1. 東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 大豆生物學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,農(nóng)業(yè)部東北大豆生物學(xué)與遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,黑龍江 哈爾濱 150030;2.黑龍江禾田豐澤興農(nóng)科技開發(fā)有限公司,黑龍江 哈爾濱 150000;3.內(nèi)蒙古通遼市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院,內(nèi)蒙古 通遼 028015)

        結(jié)合模糊識(shí)別方法評(píng)價(jià)的數(shù)學(xué)模型法和聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織(Food and Agriculture Organiz ation/ World Health Organization,F(xiàn)AO/WHO)、雞蛋蛋白兩種模式下的化學(xué)分析法評(píng)價(jià)兩個(gè)致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白質(zhì)氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,解析α亞基缺失特性對(duì)大豆氨基酸組分及營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)的影響。用氨基酸分析儀測(cè)定氨基酸的組分和含量,α亞基缺失特性用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)確認(rèn),蛋白和脂肪含量用Perten 8620近紅外谷物分析儀測(cè)定。結(jié)果表明:1)致敏蛋白α亞基缺失型大豆的氨基酸總量、必需氨基酸總量、蛋白質(zhì)、油分含量不因α亞基的缺失而降低;2)致敏蛋白α亞基缺失型大豆的11S/7S比值在4.65以上,高于目前普遍報(bào)道的2.0~3.0;3)致敏蛋白α亞基缺失型大豆必需氨基酸含量接近或高于FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn);兩種模式下,α亞基缺失型大豆的5種化學(xué)評(píng)分及貼進(jìn)度值都很高,接近標(biāo)準(zhǔn)蛋白。致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白質(zhì)氨基酸組分平衡,11S/7S比值更優(yōu),營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)更高。

        大豆;α亞基缺失;氨基酸;營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

        大豆蛋白質(zhì)主要由7S和11S球蛋白組成,7S球蛋白是由α’(76 kD)、α(72 kD)、β(52~54 kD)3 個(gè)亞基組成的分子質(zhì)量為150 kD的三聚體[1-4]。大豆種子中7S和11S球蛋白含量相當(dāng),二者為負(fù)相關(guān);與11S球蛋白相比,7S球蛋白的含硫氨基酸含量及氨基酸總量低,營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)差[5],7S球蛋白的減少可導(dǎo)致11S球蛋白的補(bǔ)償性增加[6-7],從而提高大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)[7]。7S球蛋白功能特性也不及11S球蛋白,降低7S球蛋白的含量可以改善大豆蛋白的加工品質(zhì)[8]。研究表明,α亞基是大豆主要的致敏原之一[2,9]。目前工業(yè)上清除大豆致敏蛋白的物理[10]、化學(xué)[11]、降解[12-14]等方法存在清除不徹底,化學(xué)物質(zhì)殘留、加工成本高,酶特異性不強(qiáng)的弊端,無(wú)法獲得零抗原大豆產(chǎn)品。目前,為了徹底減少或除去致敏蛋白,改良大豆?fàn)I養(yǎng)與加工品質(zhì),育種家們已經(jīng)培育出了一系列能夠正常播種、生長(zhǎng)和收獲的7S球蛋白亞基缺失大豆品種[5,7,15-16]。

        蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的高低由必需氨基酸組分的種類、數(shù)量及各組分所占的比例決定。目前,蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)方法,主要有聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織和世界衛(wèi)生組織提出的蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)的必需氨基酸模式,氨基酸比值系數(shù)法及其衍生方法、不同模式的化學(xué)分析法、生物評(píng)價(jià)法和模糊識(shí)別方法評(píng)價(jià)的數(shù)學(xué)模型法。這些方法已成功應(yīng)用于家禽肉[17]、羅非魚飼料原料[18]、小米[19-20]、麥冬[21]、水果[22-23]等蛋白質(zhì)氨基酸的營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià),為人類合理利用這些蛋白質(zhì)資源提供了理論依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)用2012年獲得的2 個(gè)致敏蛋白α亞基缺失型大豆新品系,進(jìn)行氨基酸測(cè)定和大豆蛋白質(zhì)必需氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià),為致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白的科學(xué)合理利用、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值的提高及大豆亞基缺失突變體育種提供科學(xué)依據(jù)和理論支持。

        1 材料與方法

        1.1 材料與試劑

        東農(nóng)47為黑龍江省高油大豆品種、亞基表現(xiàn)為正常型;日B亞基表現(xiàn)為(α’+α)-亞基缺失型;Cb15和Cb80為東農(nóng)47和日B通過(guò)雜交-回交方式獲得,選育過(guò)程如圖1所示。2008年夏季配制雜交組合,F(xiàn)1代于當(dāng)年冬季南繁加代得到F2代,F(xiàn)2代種子經(jīng)過(guò)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)分析,篩選出α-亞基缺失型種子于2009年春季播種,用于回交。同樣的南繁加代及SDS-PAGE法篩選α-亞基缺失純合型種子用于每一輪回交的α-亞基缺失特性的供體親本。每一代都進(jìn)行亞基缺失檢測(cè),于2012年秋季獲得了兩個(gè)致敏蛋白α亞基缺失型大豆新品系Cb15和Cb80。

        圖1 致敏蛋白α亞基缺失型大豆新品系選育過(guò)程Fig.1 Procedures for the breeding of α-subunit deficient soybean lines

        Tris-HCl、β-巰基乙醇、考馬斯亮藍(lán)G-250、溴酚藍(lán)、甘氨酸、SDS、TEMED、丙烯酰胺,尿素、雙丙烯酰胺、過(guò)硫酸銨。

        1.2 儀器與設(shè)備

        Perten 8620近紅外谷物分析儀 美國(guó)福斯公司;日立L-8800氨基酸分析儀 日本日立公司;Mini-型蛋白質(zhì)電泳系統(tǒng) 美國(guó)Bio-Rad公司;PowerLook 2100 XL掃描儀 臺(tái)灣UMAX公司。

        1.3 方法

        1.3.1 SDS-PAGE梯度電泳分析及大豆球蛋白亞基含量測(cè)定

        α亞基缺失的檢測(cè)參照劉珊珊等[15-16,24-25]報(bào)道過(guò)的方法,略有改進(jìn):稱取5 mg大豆粉,加0.5 mL抽提緩沖液(0.05 mol/L Tris-HCl,pH 8.0,0.2% SDS,5 mol/L尿素)充分混勻,靜置過(guò)夜(室溫),再加10 μL巰基乙醇,充分混勻,4 ℃,18 000×g離心15 min,取8~13 μL上清液(0.75 mm玻璃板點(diǎn)樣8 μL;1.0 mm玻璃板點(diǎn)樣13 μL)進(jìn)行11.98%分離膠、4.38%濃縮膠的SDS-PAGE電泳(電泳條件15 mA/膠,20 min;30 mA/膠,70 min)及考馬斯亮藍(lán)染色直接用微波爐加熱水煮2~3 次,8 min/次,之后用PowerLook 2100 XL掃描儀掃描-SDSPAGE凝膠并保存圖片。

        大豆球蛋白各亞基相對(duì)含量定義為其光密度占該泳道總光密度的百分率。亞基含量測(cè)定采用美國(guó)Bio-Rad公司Quangtity One 4.6.2版本獲得原始數(shù)據(jù),利用Excel2003對(duì)原始數(shù)據(jù)進(jìn)行分析得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

        1.3.2 品質(zhì)分析

        利用Perten 8620近紅外谷物分析儀測(cè)定蛋白質(zhì)、脂肪含量;氨基酸含量按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 18246—2000《飼料中氨基酸的測(cè)定》方法,利用日立L-8800氨基酸分析儀測(cè)定:大豆樣品0.100 g、6 mol/L HCl 10 mL加入安瓿瓶,混勻后封口,于110 ℃烘箱內(nèi)水解24 h,冷卻后定容至50 mL,用0.45 μm水相濾頭過(guò)濾200 μL溶液于大口離心管中,再于60 ℃烘箱內(nèi)濃縮盡液體后,加入1 mL 0.02 mol/L HCl混勻,制得樣品溶液上機(jī)測(cè)定。

        1.3.3 氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)

        氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值根據(jù)聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織(Food and Agriculture Organization/World Health Organization,F(xiàn)AO/WHO)氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式和雞蛋模式進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)定;化學(xué)分析法的氨基酸評(píng)分(amino acid score,AAS)、化學(xué)評(píng)分(chemical score,CS)、必需氨基酸指數(shù)(essential amino acid index,EAAI)、氨基酸比值系數(shù)分(score of ratio coeffieient of aoino acid,SRCAA)和必需氨基酸相對(duì)比值(essential amino acid relative ratio,EAARR)根據(jù)錢愛(ài)萍等[18]的方法計(jì)算;模糊識(shí)別法評(píng)價(jià)根據(jù)錢愛(ài)萍[17]、顏孫安[20]等的方法計(jì)算。用Excel分析原始數(shù)據(jù),得到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 致敏蛋白α亞基缺失型大豆主要品質(zhì)特性分析

        表1 致敏蛋白α亞基缺失型大豆品質(zhì)特征分析Table 1 Quality characteristic analysis of soybean seeds with α subunit deficiency

        由表1可知,伴隨日B的α亞基缺失特性的導(dǎo)入,Cb15和Cb80的蛋白質(zhì)、脂肪含量較東農(nóng)47提高到43.8%、44.9%;脂肪含量降低為21.7%、20.4%;蛋白質(zhì)和脂肪總含量比兩親本都高,分別為65.5%、65.3%。根據(jù)脂肪含量大于20%,同時(shí)蛋白質(zhì)和脂肪總含量高于63%為“雙高(高油、高蛋白)”品種的標(biāo)準(zhǔn),這兩個(gè)品種均屬于“雙高”型品系。

        2.2 致敏蛋白α亞基缺失型大豆球蛋白亞基分析

        圖2 致敏蛋白α亞基缺失型大豆SDS-PAGE圖譜分析Fig.2 SDS-PAGE profile analysis of soybean seeds with α subunit deficiency

        α亞基缺失特性經(jīng)2 次回交,4 次自交導(dǎo)入中國(guó)高油大豆品種東農(nóng)47,獲得Cb15與Cb80兩個(gè)優(yōu)良品系,兩品系7S球蛋白亞基組成如圖2所示。α亞基缺失特性穩(wěn)定遺傳,各亞基條帶清楚,分辨效果較好。Cb15和Cb80的7S球蛋白均由α’和β兩個(gè)亞基組成,11S球蛋白由A3、A1A2A4、B3、B1B2、B4和A56 個(gè)亞基組成,各亞基含量測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

        表2 致敏蛋白α亞基缺失型大豆球蛋白亞基相對(duì)含量分析Table 2 Subunit contents of soybean storage protein in soybean seeds with α subunit deficiency %

        由表2可知,伴隨α亞基缺失性狀的導(dǎo)入,Cb15和Cb80的7S球蛋白和11S球蛋白組分的相對(duì)含量均發(fā)生了變化。Cb15和Cb80的7S球蛋白相對(duì)含量分別為13.54%、13.16%,與輪回親本東農(nóng)47相比分別降低了6.15%和6.53%,;7S組分的α’亞基相對(duì)含量提高,分別為6.87%和5.67%;β亞基相對(duì)含量降低,分別為6.67%和7.48%。11S球蛋白組分亞基相對(duì)含量的變化,主要體現(xiàn)在A1A2A4、B3、B1B2、A54 個(gè)亞基上,其中A1A2A4和A5亞基相對(duì)含量變化最明顯。與東農(nóng)47相比,以上兩株系的A1A2A4亞基大幅降低,由17.13%降低至11.62%和7.90%;A5亞基增幅較大,分別為12.31%和11.50%。Cb15的11S球蛋白相對(duì)含量總量與東農(nóng)47接近,而Cb80降低為61.21%。姜振峰[26-27]、簡(jiǎn)爽[28]、蔣濤[29]、劉春[30]等的研究表明,大豆7 S球蛋白相對(duì)含量總量均值范圍為23.54%~29.96%,11S球蛋白為57.51%~69.80%。本實(shí)驗(yàn)獲得的致敏蛋白α亞基缺失型株系Cb15和Cb80的11 S球蛋白相對(duì)含量范圍與上述研究一致,但7 S球蛋白相對(duì)含量明顯偏低。另外,Cb15和Cb80株系的11S+7S相對(duì)含量總量稍低于東農(nóng)47,但11S/7S比值分別為4.93和4.65,遠(yuǎn)大于東農(nóng)47的(比值為3.38),更高于上述研究報(bào)道的2.0~3.0。

        2.3 致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸組成分析

        表3 致敏蛋白α亞基缺失型種子氨基酸組成分析Table 3 Amino acid analysis of soybean seeds with α subunit deficiency %

        由表3可知,Cb15和Cb80二者氨基酸組分齊全,與東農(nóng)47和日B一致,含有包括蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、組氨酸、精氨酸等9 種必需氨基酸(半必需氨基酸)在內(nèi)的17 種氨基酸,此結(jié)果與前人研究結(jié)果相符[15,31]。Cb15和Cb80的17 種氨基酸組分當(dāng)中,含量居前兩位的由高到低依次是:谷氨酸>天冬氨酸;含硫氨基酸蛋氨酸(0.58%、0.62%)、胱氨酸(0.76%、0.77%)含量最低;Cb15除蛋氨酸、胱氨酸,Cb80除絲氨酸、胱氨酸、酪氨酸外,二者其余氨基酸組分含量均高于東農(nóng)47;二者氨基酸總量和必需氨基酸總量都比東農(nóng)47和日B高,氨基酸總量分別為41.94%、41.07%,較東農(nóng)47提高了3.05%和2.18%;必需氨基酸總量分別為14.47%、14.61%,較東農(nóng)47增加了0.58%和0.92%。該結(jié)果表明,致敏蛋白α亞基缺失型大豆的氨基酸組分沒(méi)有改變,氨基酸總量和必需氨基酸總量未降低,與Takahashi等[32]的研究結(jié)果相似。

        2.4 致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)

        根據(jù)現(xiàn)代營(yíng)養(yǎng)學(xué)的觀點(diǎn),食物蛋白質(zhì)的氨基酸組成越接近人體蛋白的組成,并為人體消化吸收時(shí),該食物的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值才越高[33]。上述數(shù)據(jù)和結(jié)果尚不能全面反應(yīng)致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸組分與人體蛋白組分的差異以及其所含必需氨基酸組分是否平衡,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高低體現(xiàn)不明顯,有待氨基酸營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)分析。由于組氨酸是嬰幼兒、尿毒癥患者、幼齡動(dòng)物的必需氨基酸,而大豆又是嬰幼兒奶粉、動(dòng)物飼料的重要添加原料,因此將其參數(shù)也列為以下評(píng)價(jià)中。

        2.4.1 FAO/WHO模式和全蛋模式對(duì)致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸的評(píng)價(jià)結(jié)果

        表4 致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸含量與FAO/WHO模式和全蛋模式的比較Table 4 Comparison of amino acids between soybeans without α-subunit with the FAO/WHO and the whole egg reference patterns mg/g pro

        由表4可知,全蛋模式必需氨基酸各組分含量標(biāo)準(zhǔn)比FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn)高。致敏蛋白α亞基缺失型大豆Cb15、Cb80的必需氨基酸含量較平衡:蘇氨酸、纈氨酸、蛋氨酸+胱氨酸含量低于FAO/WHO模式標(biāo)準(zhǔn);其余必需氨基酸含量都高于FAO/WHO標(biāo)準(zhǔn);氨基酸總值都大于FAO/WHO的367.00 mg/g pro標(biāo)準(zhǔn),分別為406.62、394.88 mg/g pro。此外,Cb15的各必需氨基酸組分含量及氨基酸總量都高于日B(蘇氨酸除外),但與東農(nóng)47接近。

        2.4.2 FAO/WHO模式和全蛋白模式下5種化學(xué)分析方法的營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

        表5 兩種參考模式下致敏蛋白α亞基缺失型大豆的AASS、CCSS、EAAI、SRCAA、EAARRTable 5 AAS, CS, EAAI, SRCAA and EAARR of soybeans without α-subunit in the FAO/WHO and the whole egg reference patterns

        致敏蛋白α亞基缺失型大豆氨基酸在FAO/WHO、雞蛋蛋白質(zhì)兩種氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式下的5種化學(xué)評(píng)價(jià)方法測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表5。FAO/WHO和雞蛋蛋白質(zhì)兩種模式下AAS、CS、EAAI、SRCAA、EAARR這5種化學(xué)評(píng)分都很高,但前者評(píng)價(jià)結(jié)果高于后者。在兩種參考蛋白模式下,蛋氨酸+胱氨酸都是致敏蛋白α亞基缺失型大豆Cb15、Cb80的第一限制氨基酸,且Cb80的5種化學(xué)評(píng)分AAS、CS、EAAI、SRCAA、EAARR都高于Cb15。東農(nóng)47、日B、Cb15、Cb80的SRCAA值非常接近,在FAO/WHO模式下都高約99.80;在全蛋模式下都高約99.70。根據(jù)SRCAA值的大小,這4 個(gè)材料的排序結(jié)果都為:東農(nóng)47>Cb80>日B>Cb15;根據(jù)EAARR值得大小排序,F(xiàn)AO/WHO模式下的結(jié)果為日B>Cb80>東農(nóng)47>Cb15,在全蛋模式下為東農(nóng)47>Cb80>Cb15>日B。這表明,α亞基缺失不會(huì)降低大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;α亞基缺失大豆蛋白質(zhì)擁有與正常型大豆蛋白質(zhì)同樣高、甚至更高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。

        2.4.3 模糊識(shí)別法的營(yíng)養(yǎng)評(píng)價(jià)

        表6 致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白質(zhì)相對(duì)于兩種模式下標(biāo)準(zhǔn)蛋白的貼近度Table 6 Similarity of a-subunit deficient soybean protein in the FAO/WHO and the whole egg reference patterns

        由表6可知,以FAO/WHO模式蛋白為標(biāo)準(zhǔn),α亞基缺失型大豆Cb15、Cb80的貼進(jìn)度值與東農(nóng)47和日B的差別不大,都接近標(biāo)準(zhǔn)蛋白的貼進(jìn)度,在0.94~0.96之間,大小排序?yàn)椋喝誃>Cb80,東農(nóng)47>Cb15。全蛋模式下的貼進(jìn)度整體上小于FAO/WHO模式,變化范圍為0.88~0.91,排序?yàn)椋簴|農(nóng)47>日B>Cb15>Cb80。

        3 結(jié) 論

        致敏蛋白α亞基缺失型大豆蛋白質(zhì)、脂肪、總氨基酸、總必需氨基酸含量不因α亞基缺失而降低;致敏蛋白α亞基缺失型大豆致敏性降低,11S/7S比例更優(yōu),氨基酸組成平衡,營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高;α亞基缺失能夠改善大豆蛋白的營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)。

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        Amino Acid Composition and Nutritional Assessment of A llergenic Protein α-Subunit-Deficient Soybean Lines

        TUO Yun1, HUO Cai-qin2, TIAN Fu-dong3, SHEN Li-wei1, SONG Bo1, LAN Lan1, WEI Xiao-shuang1, GUO Bo-wen1, LI Wen-bin1, LIU Shan-shan1,*
        (1. Key Laboratory of Soybean Biology, Ministry of Education, Key Laboratory of Soybean Biology and Breeding/Genetics, Ministry of Agriculture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2. Heilongjiang Hetian Feng Ze Agricultural Science and Technology Development Co. Ltd., Harbin 150000, China; 3. Agriculture Science Institute of Tongliao City, Tongliao 028015, China)

        Assessment of protein nutritional value by mathematical modeling based on fuzzy pattern recognition according to the FAO/WHO standards and the whole egg protein pattern was conducted on two allergenic protein α-subunitdeficient soybean lines so as to explore the effects of amino acid composition on the nutritional value of soybean with the characteristics of α-subunit defici ency. Amino acids were detected by an automatic amino acid analyzer. SDS-PAGE was used to analyze the confirmation of α-subunit deficiency. A near infrared grain analyzer was used for the determination of protein and oil. The results indicated that the contents of essential amino acids, total amino acids, protein and oil were not decreased in soybean seeds with α-subunit deficiency. Meanwhile, the 11S/7S ratio in soybean seeds with α-subunit deficiency exceeded 4.65, which was higher than known values of 2.0–3.0 for the public. In addition, the content of essential amino acids was similar to or higher than those recommended by the FAO/WHO and the whole egg patterns. Furthermore, the scores from five chemical analysis methods in the two patters and the results from the developed mathematical m odel were similar to the standards in this study. In conclusion, the α-subunit deficient soybean lines have balanced amino acid composition, reasonable 11S/7S ratio, and higher nutrition value.

        soybean; α-subunit deficiency; amino acid; nutrition assessment

        S565.1

        A

        1002-6630(2014)09-0224-05

        10.7506/spkx1002-6630-201409044

        2013-06-28

        國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(31371650;31071440);黑龍江省普通高等學(xué)校青年骨干支持計(jì)劃項(xiàng)目(1155G12);轉(zhuǎn)基因生物新品種培育重大專項(xiàng)(2013ZX08004-004)

        拓云(1988—),男,碩士研究生,研究方向?yàn)榇蠖惯z傳育種。E-mail:tuoyun2010@163.com

        *通信作者:劉珊珊(1972—),女,教授,博士,研究方向?yàn)榇蠖蛊焚|(zhì)育種。E-mail:ars336699@aliyun.com

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