張紅琳

（重慶市北碚區(qū)農(nóng)業(yè)委員會(huì)，400715）

煙草根莖提取物對(duì)辣椒茶黃螨的殺螨活性研究

張紅琳

（重慶市北碚區(qū)農(nóng)業(yè)委員會(huì)，400715）

以石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水5種溶劑對(duì)煙草根莖的平行提取物及順序提取物為材料，研究其對(duì)辣椒茶黃螨的觸殺毒力。試驗(yàn)結(jié)果表明，在不同溶劑的平行提取物及順序提取物中，分別以乙醇提取物對(duì)辣椒茶黃螨的致死率最高，48 h校正死亡率分別為89.56%和81.77%，分別顯著高于其他溶劑處理；乙醇平行提取物及順序提取物對(duì)辣椒茶黃螨的致死中濃度分別為0.935 7和1.100 8 mg/mL，顯著高于對(duì)照噠螨酮的0.133 6 mg/mL，乙醇提取物對(duì)辣椒茶黃螨的毒殺效果較噠螨酮差。

煙草根莖；辣椒茶黃螨；殺螨活性

。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試煙草根莖平行提取物：稱(chēng)取5份上述粉末，每份100 g，分別裝入5個(gè)10 L的燒瓶，以6∶1的比例依次分別向5個(gè)磨口瓶中加入600 mL的水、丙酮、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯和石油醚，密閉，每日振搖3次，于25℃浸漬1周。過(guò)濾，將水浸液加熱濃縮為浸膏狀，丙酮、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯和石油醚浸提液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)為浸膏狀，獲得5種溶劑的植物平行提取物浸膏，4℃存放于冰箱內(nèi)備用。

供試煙草根莖順序提取物：稱(chēng)取100 g煙草根莖粉末，先用600 mL石油醚30～60℃冷浸1周，過(guò)濾，殘?jiān)鼈溆茫瑸V液濃縮揮發(fā)后獲得石油醚提取物浸膏，4℃存放于冰箱內(nèi)備用；過(guò)濾后的殘?jiān)僖?00 mL乙醇冷浸1周，過(guò)濾，將濾液濃縮定容獲得乙醇順序提取物浸膏；殘?jiān)侔葱蛴帽?、乙醇和水重?fù)上述操作，分別獲得丙酮、乙醇和水的順序提取物浸膏。

稱(chēng)取上述平行提取物與順序提取物浸膏少量，加入3%的吐溫-80，以蒸餾水稀釋配制成5 mg/mL溶液，對(duì)供試對(duì)象進(jìn)行生物測(cè)定。

1.2 試驗(yàn)方法

①茶黃螨的生物測(cè)定 參照FAO推薦的測(cè)定螨類(lèi)抗藥性的標(biāo)準(zhǔn)方法——玻片浸漬法[14]進(jìn)行并改進(jìn)。將載玻片一端貼上雙面膠帶，將供試螨背部粘于雙面膠帶上，每玻片40頭，于溫度（26±1）℃、RH 60%～80%的環(huán)境下放置4 h，用解剖鏡檢查，剔除死亡和不活潑的個(gè)體，記載活螨數(shù)。而后，將帶螨的玻片一端浸入相應(yīng)濃度的藥液中，浸漬5 s后取出，用濾紙吸除螨體及其周?chē)嘤嗨幰海曫B(yǎng)條件下放置3 d，每24 h檢查一次。用毛筆輕觸螨體5次，以螨足均不動(dòng)者為死亡，試驗(yàn)重復(fù)3次。以清水加相應(yīng)量吐溫-80的溶液為對(duì)照。進(jìn)行毒力測(cè)定時(shí)，每種藥液按預(yù)試梯度配制5個(gè)濃度，每個(gè)濃度重復(fù)3次，計(jì)算致死中濃度。

②數(shù)據(jù)處理 采用校正死亡率來(lái)評(píng)判各提取物對(duì)茶黃螨的生物活性，計(jì)算方法如下：校正死亡率（%）=[（處理組死亡率-對(duì)照組死亡率）/（1-對(duì)照組死亡率）]×100%。校正死亡率經(jīng)反正弦轉(zhuǎn)化后，進(jìn)行方差分析，比較各處理結(jié)果間的差異。由SPSS 14.0軟件完成One-Way ANOVA之Duncan's檢驗(yàn)和試驗(yàn)數(shù)據(jù)的方差分析[15]。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙草根莖平行提取物對(duì)辣椒茶黃螨的室內(nèi)觸殺毒力

從表1看出，水、乙醇、丙酮、乙酸乙酯和石油醚粗提物對(duì)辣椒茶黃螨的48 h校正死亡率分別為57.35%、89.56%、76.03%、58.38%和40.87%。其中，乙醇平行提取物對(duì)辣椒茶黃螨的殺螨活性最強(qiáng)。

2.2 煙草根莖順序提取物對(duì)辣椒茶黃螨的室內(nèi)觸殺毒力

從表1、2看出，相同處理時(shí)間下，煙草根莖平行提取物對(duì)辣椒茶黃螨的致死活性高于順序提取物。在煙草根莖不同溶劑平行提取物中，乙醇和丙酮提取物對(duì)茶黃螨的致死活性較好，處理48 h校正死亡率分別為89.56%和76.03%；順序提取物中，乙醇和丙酮提取物對(duì)茶黃螨的致死活性較好，處理48 h校正死亡率分別為81.77%和73.27%，與同組其他溶劑的提取物間存在顯著差異，且乙醇順序提取物對(duì)茶黃螨的致死活性顯著高于丙酮順序提取物。

表1 5 mg/mL煙草根莖平行提取物對(duì)辣椒茶黃螨的室內(nèi)生物活性

表2 5 mg/mL煙草根莖順序提取物對(duì)辣椒茶黃螨的室內(nèi)生物活性

2.3 煙草根莖乙醇平行、順序提取物與噠螨酮對(duì)辣椒茶黃螨的毒力回歸直線(xiàn)

處理48 h后的5 mg/mL乙醇平行提取物、順序提取物對(duì)茶黃螨具有明顯的致死作用。為了進(jìn)一步明確平行提取物與順序提取物間的毒力差異情況，需要做進(jìn)一步的毒力測(cè)定，以致死中濃度來(lái)比較2種溶劑提取物的毒力差異，并以15%噠螨酮乳油3 000倍液為對(duì)照，結(jié)果如表 3所示。

表3 丙酮、乙醇煙草根莖平行提取物與噠螨酮對(duì)茶黃螨的毒力回歸測(cè)定（48 h）

從表3看出，2種提取物中，對(duì)辣椒茶黃螨毒力較強(qiáng)的是乙醇平行提取物，其LC50為0.935 7 mg/mL，其致死中濃度大于對(duì)照噠螨酮的0.133 6 mg/mL，故其對(duì)辣椒茶黃螨的毒殺效果低于噠螨酮。

3 討論與結(jié)論

煙草根莖化學(xué)成分豐富，主要為煙堿、酚類(lèi)、有機(jī)酸類(lèi)、醛酮類(lèi)、萜烯類(lèi)及酯醇類(lèi)等重要物質(zhì)，其中，酚類(lèi)物質(zhì)具有40余種，占有較大比例，主要包括苯酚、間甲苯酚、對(duì)甲苯酚、鄰甲苯酚、苯二酚、間苯二酚、兒茶酚等，而某些酚類(lèi)物質(zhì)特有的化學(xué)結(jié)構(gòu)如消螨酚（Dinex）等多具有較強(qiáng)的殺螨活性。據(jù)相似相容原理，醇類(lèi)對(duì)酚的溶解性相對(duì)較高，同時(shí)，乙醇極性大，對(duì)生物堿類(lèi)也有較好的溶解性，其提取物中含有大量生物堿及酚類(lèi)物質(zhì)，正好闡釋了乙醇提取物殺螨活性較的原因。

煙草、除蟲(chóng)菊、毒魚(yú)藤合稱(chēng)為“三大植物性農(nóng)藥”，將煙草根莖作為植物源殺螨藥物的開(kāi)發(fā)，至今鮮有報(bào)導(dǎo)；而將煙草根莖作為植物源殺螨藥物，除了具有原料易得、浸提工藝簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)外，還具有低毒、高效、無(wú)殘留、不易產(chǎn)生抗性等優(yōu)點(diǎn)，加之煙草種植廣泛，將其根莖作為植物源農(nóng)藥進(jìn)行開(kāi)發(fā)具有很大的潛力市場(chǎng)和資源。

對(duì)煙草根莖不同溶劑提取物的生物活性測(cè)定結(jié)果表明，煙草根莖殺螨活性物質(zhì)主要存在乙醇提取物中，以乙醇平行提取物的效果較為顯著；另從表1、2還可以看出，在乙醇之外的溶劑提取物仍然具有一定的殺螨活性，證實(shí)了煙草根莖中含對(duì)茶黃螨具有殺螨生物活性的物質(zhì)不止一種，且極性大小不同。

煙草根莖中成分較為復(fù)雜，對(duì)辣椒茶黃螨具殺螨活性的物質(zhì)含量相對(duì)過(guò)低，雖然乙醇平行提取物殺螨活性較好，但還是低于藥物噠螨酮活性。只有更深層次地將活性成分結(jié)構(gòu)化合物進(jìn)行分離、鑒定，才能充分證實(shí)殺螨活性物質(zhì)歸屬，更有利于在下一步對(duì)煙草根莖中有效成分作為植物源活性殺螨劑的開(kāi)發(fā)中奠定基礎(chǔ)理論。

[1]袁翼翔.辣椒茶黃螨的發(fā)生與防治[J].現(xiàn)代農(nóng)業(yè)科技，2011（14）：191-192.

[2]韋文添.廣西溫室辣椒茶黃螨的發(fā)生與防治[J].西南園藝，2006，34（4）：56.

[3]劉保才，王俊琪，孫國(guó)語(yǔ).蔬菜病蟲(chóng)害化學(xué)防治中的3R問(wèn)題與科學(xué)使用農(nóng)藥[J].上海蔬菜，2004（6）：68-69.

[4]黃志農(nóng)，劉勇.南方菜地辣椒主要病蟲(chóng)害綜合防治技術(shù)[J].辣椒雜志，2007（4）：27-30.

[5]孫小潔，李慶，易成波.植物源殺蟲(chóng)劑開(kāi)發(fā)利用現(xiàn)狀及其前景展望[J].經(jīng)濟(jì)林研究，2004，22（2）：73-77.

[6]吳文君，王明安，朱靖博，等.殺蟲(chóng)植物苦皮藤毒殺成分研究[J].有機(jī)化學(xué)，2002，22（9）：631-637.

[7]丁偉，張永強(qiáng)，陳仕江，等.14種中藥植物殺蟲(chóng)活性的初步研究[J].西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，25（5）：417-420，424.

[8]吳靜，丁偉，張永強(qiáng)，等.黃花蒿提取物對(duì)兩種病原真菌的生物活性[J].農(nóng)藥，2007，46（10）：713-715，718.

[9]張永強(qiáng)，丁偉，田麗，等.黃花蒿提取物對(duì)柑橘全爪螨的生物活性[J].中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，42（6）：44-47.

[10]曹揮，王有年，劉素琪，等.地膚提取物對(duì)山楂葉螨體內(nèi)幾種酶活性的影響[J].林業(yè)科學(xué)，2007，43（2）：68-72.

[11]Williams L A D,Ajai M.The insecticidal and acaricidal actions of compounds from(A.Juss.) and their use in tropical pest management[J].Intergrated Pest Management Reviews,1996,1(3)：133-145.

[12]Sanguanpong U,Schmutterer H.Laborversuche über die wirkung von Niemoel und niemsamenextrakten beider gemeinen Spinnmilbe Tetranychus urticae Koch (Acari∶Tetranychidae).Z.[J].Pflanzenkr Pflanzenschutz,1992, 99:637-646.

[13]Margaret E J,Julie H W.The domestication of the bushharvested sedge[J].Acta Horticulturac, 1998,454:105-109.

[14]FAO.Plant production and protection 21,recommended methods for measurement of resistance topesticides[M]. Rome:FAO,1980.

[15]Finnery D J.Probit Analysis[M].London:Cambridge University Press,1987:230-269.

Taking petroleum ether(30℃-60℃),ethyl acetate,acetone,ethanol and water as solvent respectively,the paper studied the acaricidal activity of extracts from tobacco root and stem againstLatus.The results showed that,among the five solvents,ethanol parallel extract and sequential extract had highest lethallty rates againstLatus respectively,and their corrected death rates were 89.56%and 81.77%in 48 hours,which were significantly higher than that of other solvents treatments respectively.The median lethal concentrations (LC50)of ethanol parallel extract and sequential extract were 0.935 7 mg/mL and 1.100 8 mg/mL,which were significantly higher than that of control treatment pyridaben (0.133 6 mg/mL),so the ethanol extracts had worse acaricidal effect againstLatus than pyridaben.

Tobacco root and stem;Latus;Acaricidal activity

S435.418.2

A

1001-3547（2014）06-0074-04

10.3865/j.issn.1001-3547.2014.06.027

中央高?；究蒲袠I(yè)務(wù)費(fèi)專(zhuān)項(xiàng)資金項(xiàng)目資助（XDJK2009C138）

張紅琳（1976-），女，農(nóng)藝師，從事經(jīng)濟(jì)作物技術(shù)推廣及相關(guān)研究工作，電話(huà)：15520050025，E-mail：swu005@163.com

2013-12-13