李 晴

隨著聯(lián)合化療、放療和骨髓移植治療等的治療方案的進(jìn)一步發(fā)展，在成人白血病患者中，其持續(xù)緩解率已經(jīng)明顯的較前提高，長(zhǎng)期無病生存期明顯延長(zhǎng)。但是在白血病患者中，特別是急性淋巴細(xì)胞白血病患者中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病(central nervous system leukemia，CNSL)發(fā)生會(huì)大大影響了患者的生存質(zhì)量，和生存期。及時(shí)預(yù)防和早期治療中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病已經(jīng)成為臨床工作中的重要問題?？墒怯捎诖蟛糠炙幬锏闹苄圆?，并且難以透過血腦屏障，，這些藥物在普通化療過程中都不能進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，發(fā)揮殺滅白血病細(xì)胞的作用。因此中樞神經(jīng)系統(tǒng)稱為白血病的的逃逸地點(diǎn)，進(jìn)一步成為臨床白血病治療緩解后引起復(fù)發(fā)的重要策源地。但是由于診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的診斷標(biāo)準(zhǔn)沒有敏感性和特異性強(qiáng)的檢測(cè)指標(biāo)，引起許多CNSL 漏診、誤診。研究發(fā)現(xiàn)，腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白在中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病中的表達(dá)有一定的臨床提示意義［1-3］，但是該三者聯(lián)合檢測(cè)是否有一定的臨床診斷意義，文獻(xiàn)并無報(bào)道。本組為了尋找CNSL 新的診斷方法，提高CNSL 的診斷率，選取腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白進(jìn)行檢測(cè)，以探討這幾個(gè)指標(biāo)在CNSL 診斷中的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

病例來源于2013 年1 月～2013 年12 月廣州市第一人民醫(yī)院血液科診治的43 例白血病患者，男25 例，女18 例，中位年齡43 歲。其中AML 30 例(M2 1 例，M3 6 例，M5 36例)，ALL 13 例(L1 5 例，L2 3 例，L3 5 例)，按文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)確診中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病［4］。依據(jù)是否合并CNSL 分為兩組，CNSL 組16 例和無CNSL 組27 例。

1.2 CSF 采集

為白血病患者在進(jìn)行治療性、或者預(yù)防性鞘內(nèi)注射化療時(shí)留取的腦脊液標(biāo)本，在室溫下對(duì)標(biāo)本驚醒3000 rpm/min離心25 min，吸取上清液，放置在-20 ℃冰箱中冷凍保存。標(biāo)本收集完畢后一次性進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白的檢測(cè)

采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)，試劑盒由上海信然實(shí)業(yè)有限公司、北京方程生物科技有限公司、上海研域生物科技有限公司提供。按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行相關(guān)操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 13.0 統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量數(shù)據(jù)用均值±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，所有均數(shù)采用t 檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

兩組患者腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白CNSL 組高于無CNSL 組，2 組間有顯著性差異(p ＜0.05)。見表1。

表1 中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白含量

3 討論

到目前為止，各種研究已經(jīng)正式，可溶性白細(xì)胞介素2的受體存在于NK 細(xì)胞、激活的T 淋巴細(xì)胞、激活的B 淋巴細(xì)胞、大顆粒淋巴細(xì)胞和某些腫瘤細(xì)胞的表面［5］，對(duì)已知的各種血液腫瘤患者進(jìn)行血清的可溶性白細(xì)胞介素2 進(jìn)行滴度測(cè)定后發(fā)現(xiàn)，可溶性白細(xì)胞介素2 的滴度水平與患者的腫瘤負(fù)荷量及腫瘤的活動(dòng)程度呈正相關(guān)，腫瘤符合越大、腫瘤的活動(dòng)程度越高，血清中IL -2 的含量越多［6-7］。已經(jīng)有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，在急性淋巴細(xì)胞白血病和霍奇金淋巴瘤患者中，當(dāng)發(fā)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)受累時(shí)，腦脊液的可溶性白細(xì)胞介素2 的含量明顯升高，而進(jìn)行了鞘內(nèi)化療藥物注治療后，含量立即出現(xiàn)明顯下降。在本實(shí)驗(yàn)中，CNSL 患者組的可溶性白細(xì)胞介素2 受體明顯高于無CNSL 組，也證實(shí)了可溶性白細(xì)胞介素2 受體與中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的發(fā)生有關(guān)系。還有學(xué)者進(jìn)行了進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，但白血病患者出現(xiàn)骨髓白血病復(fù)發(fā)時(shí)，可溶性白細(xì)胞介素2 受體在血漿中的濃度也會(huì)明顯升高。因此，腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體水平應(yīng)該能夠作為診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病和評(píng)價(jià)中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病治療效果的可靠指標(biāo)。

鐵蛋白作為體內(nèi)貯存鐵的主要物質(zhì)，是一種含鐵的蛋白質(zhì)。研究表明，在正常人群中，各種體液和血清中，在網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞上，都含有微量的鐵蛋白。在一般檢查中，血清鐵蛋白含量可以代表體內(nèi)鐵的儲(chǔ)備狀態(tài)。目前發(fā)現(xiàn)，在急性白血病患者中，由于白血病細(xì)胞合成過多的鐵蛋白并且釋放入血液中，或者是因?yàn)榘籽〖?xì)胞浸潤(rùn)周圍組織，引起周圍正常組織損傷，使正常組織中的鐵蛋白釋放如外周血中，外周血的血清鐵蛋白的含量明顯高于正常人群。已經(jīng)有實(shí)驗(yàn)證實(shí)，中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的患者其腦脊液內(nèi)測(cè)定鐵蛋白含量，可以發(fā)現(xiàn)明顯升高的現(xiàn)象，推測(cè)可能是由于白血病細(xì)胞浸潤(rùn)中樞神經(jīng)系統(tǒng)后，繼發(fā)性的破壞周圍組織、并且發(fā)生自發(fā)溶解，大量釋放鐵蛋白。在本實(shí)驗(yàn)中，CNSL 患者組的鐵蛋白含量也明顯高于無CNSL 組。這個(gè)結(jié)果與國(guó)外研究類似。而且學(xué)者繼續(xù)觀察后發(fā)現(xiàn)，隨著化療的開始，患者腦脊液中的鐵蛋白開始下降。Srinirasan 等觀察發(fā)現(xiàn)血清鐵蛋白在未緩解的白血病患者中明顯升高［8］，所以血清鐵蛋白可能也與腫瘤負(fù)荷有關(guān)。本研究認(rèn)為測(cè)定腦脊液內(nèi)鐵蛋白的含量，也可用于中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的診斷和療效的監(jiān)測(cè)。

纖維結(jié)合蛋亡是一種由體外培養(yǎng)的膠質(zhì)細(xì)胞或者是退行性變性的膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的，在蛋白酶的作用下，從細(xì)胞外基質(zhì)分解出來的高分子糖蛋白。在正常成年人的大腦內(nèi)，纖維結(jié)合蛋白主要分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞基膜上。Sakaguchi 等研究都發(fā)現(xiàn)［8-9］，在急性淋巴細(xì)胞白血病患兒中，，無腦膜白血病患者腦脊液纖維結(jié)合蛋白水平明顯低于腦膜白血病復(fù)發(fā)的患者。在本實(shí)驗(yàn)中，無CNSL 患者組的纖維結(jié)合蛋白含量明顯低于CNSL 組，也證明了這種關(guān)聯(lián)的存在。

本研究發(fā)現(xiàn)，通過檢測(cè)患者腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2 受體、鐵蛋白和纖維結(jié)合蛋白的含量，可能提供一種診斷中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病、預(yù)測(cè)中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的發(fā)生的新思路。但是由于單一的指標(biāo)存在敏感性和特異性不一致的關(guān)系，因此應(yīng)該應(yīng)用三種指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)的方法，更好的為中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病的診斷和治療提供依據(jù)。

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