[摘要] 目的 了解男性不孕癥患者精液解脲支原體感染情況。 方法 男性不孕癥患者精液解脲支原體培養(yǎng)陽性146例為觀察組, 正常生育者精液解脲支原體培養(yǎng)陰性166 例為對(duì)照組, 進(jìn)行掃描電鏡及免疫電鏡檢查,觀察精子形態(tài)結(jié)構(gòu)、平均曲線運(yùn)動(dòng)速度VCL、平均直線運(yùn)動(dòng)速度VSL、平均路徑速度VAP、精子平均鞭打頻率BCF、運(yùn)動(dòng)的前向性STR、運(yùn)動(dòng)的直線性LIN、運(yùn)動(dòng)的擺動(dòng)性WOB等指標(biāo)。 結(jié)果 對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,結(jié)果顯示,觀察組精子活率和運(yùn)動(dòng)能力均略低于對(duì)照組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), 說明解脲支原體能夠破壞精子形態(tài)。 結(jié)論 在男性不育患者中,解脲支原體對(duì)精子形態(tài)學(xué)的影響是精液質(zhì)量下降的重要危險(xiǎn)因素。
[關(guān)鍵詞] 解脲支原體;精子形態(tài);不育癥
[中圖分類號(hào)] R698.2 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B [文章編號(hào)] 2095-0616(2013)10-179-02
自1972年Gnarpe等首次報(bào)道支原體感染與不育癥有關(guān)后,支原體感染日益引起人們重視。解脲支原體(ureaplasma urealyticum,UU)不僅是尿道、陰道炎的主要病原體,而且成為當(dāng)代不育癥的一種常見病因。
1 資料與方法
1.1 一般資料
觀察組患者來自本院男性科就診的不育癥患者,選取精液解脲支原體感染146例,年齡20~36歲,平均25.5歲。已婚年限1~17年,平均4.6年,尿常規(guī)檢查均為正常。選取正常生育者,精液解脲支原體培養(yǎng)陰性166例為對(duì)照組,年齡20~39歲,平均23.9歲。已婚年限1~19年,平均4.3年。
1.2 精液檢查方法
禁欲3~7 d(按臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行),留取精液標(biāo)本立即送檢。應(yīng)用德國卡爾蔡司公司生產(chǎn)的EVO MA 10型鎢燈絲掃描電子顯微鏡,進(jìn)行掃描電鏡及免疫電鏡檢查,觀察精子平均曲線運(yùn)動(dòng)速度(curvilinear velocity,VCL),平均直線運(yùn)動(dòng)速度(straight lineve locity,VSL),平均路徑速度(average path velocity,VAP),精子平均鞭打頻率(beat cross frequency,BCF),運(yùn)動(dòng)的前向性(straightness,STR),運(yùn)動(dòng)的直線性(linearity,LIN),運(yùn)動(dòng)的擺動(dòng)性(wobble,WOB)及對(duì)精子活力進(jìn)行分析。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
利用SPSS19.0軟件,對(duì)觀察結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料用()的形式表示,采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料用x2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
為了解解脲支原體影響精子引發(fā)男性不育的發(fā)病機(jī)制,我們將確診精液解脲支原體感染的不育男性146例和解脲支原體陰性正常生育男性166例的精子進(jìn)行掃描電鏡及免疫電鏡對(duì)照觀察,掃描電鏡發(fā)現(xiàn)解脲支原體感染造成大量精子行態(tài)畸形及結(jié)構(gòu)破壞。免疫電鏡發(fā)現(xiàn):觀察組部分精子表面有解脲支原體吸附,形態(tài)多樣,金粒標(biāo)記清晰。在解脲支原體吸附處,精子膜出現(xiàn)缺損,部分精子膜結(jié)構(gòu)被嚴(yán)重破壞。部分生精細(xì)胞細(xì)胞膜破裂,胞漿崩解,膠體金顆粒散布于細(xì)胞內(nèi)。精子畸形率明顯增加,表現(xiàn)為卷尾畸形、頭-尾成角畸形、尖頭畸形及多精子凝集現(xiàn)象。卷尾畸形不僅使精子靠尾部擺動(dòng)而向前推進(jìn)的作用力大大削弱[1],而且解脲支原體吸附于精子表面,使精子運(yùn)動(dòng)阻力增大,影響精子的運(yùn)動(dòng)方式和運(yùn)動(dòng)速度。對(duì)照組精子表面未見解脲支原體樣結(jié)構(gòu),也未見金粒標(biāo)記。部分脫落的生精細(xì)胞胞漿內(nèi)發(fā)現(xiàn)解脲支原體樣結(jié)構(gòu),生精細(xì)胞胞質(zhì)崩解。
本研究中,觀察組精子的運(yùn)動(dòng)參數(shù)VCL、VAP、VSL均明顯低于UU陰性組,這些變化表明UU感染導(dǎo)致精子活動(dòng)能力減弱,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表1。
3 討論
解脲支原體是介于細(xì)菌和病毒之間的原核細(xì)胞微生物,細(xì)胞器中只有核糖體,用血清學(xué)診斷特異性差。解脲支原體對(duì)培養(yǎng)基的營養(yǎng)要求高,生長緩慢,不易培養(yǎng)觀察,當(dāng)支原體數(shù)量較少時(shí),培養(yǎng)基顏色不能產(chǎn)生變化,可造成假陰性。利用掃描電鏡及免疫電鏡將解脲支原體放大20 000倍,能夠直接觀察支原體形態(tài),可清晰觀察到解脲支原體在精子細(xì)胞內(nèi)快速泳動(dòng),提高了檢測速度和準(zhǔn)確率,為臨床診斷和治療提供了可靠依據(jù)[2]。
解脲支原體通過多個(gè)環(huán)節(jié)影響精子活動(dòng),解脲支原體粘附在精子膜表面,利用精子的營養(yǎng)物質(zhì),耗竭精子細(xì)胞的主要成份。利用膜內(nèi)的膽固醇,進(jìn)行自我復(fù)制和毒性產(chǎn)物蓄積,代謝過程中產(chǎn)生的氧自由基可使精子細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過氧化而損害精子膜,造成精子膜缺損和膜結(jié)構(gòu)破壞,干擾精子功能。解脲支原體通過產(chǎn)生自身抗體,阻礙精子與卵子透明帶結(jié)合和穿越透明帶,誘發(fā)精子頂體反應(yīng)缺陷[3]。通過影響前列腺液中蛋白水解酶的活性,使其不能水解精液中纖維蛋白,導(dǎo)致精液液化時(shí)間延長或不液化,從而改變精子的運(yùn)動(dòng)能力和活力,使精液質(zhì)量下降,精子活力降低,a級(jí)精子減少[4],說明解脲支原體感染是男性不育的因素之一,而其對(duì)精子形態(tài)學(xué)的影響是精液質(zhì)量下降的重要危險(xiǎn)因素[5]。
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(收稿日期:2013-04-01)