【摘 要】通過對9個豬場不同階段豬群的豬瘟抗體監(jiān)測,筆者對豬場的豬瘟免疫效果、豬群的整體免疫保護(hù)水平和抗感染能力進(jìn)行了分析和評估,以為當(dāng)?shù)匾?guī)模豬場的豬瘟防控提供技術(shù)支持。
【關(guān)鍵詞】養(yǎng)豬;豬瘟;抗體水平;免疫效果
豬瘟(Classical swine fever,CSF)是一種高度接觸性傳染病,是養(yǎng)豬業(yè)所面臨的最嚴(yán)重的主要傳染病之一,主要通過直接接觸或接觸被污染的媒介物而發(fā)病,消化道、鼻腔黏膜和破裂的皮膚均是其感染途徑。近年來,隨著養(yǎng)豬規(guī)模化程度的提高,養(yǎng)殖戶對豬瘟防疫重要性的認(rèn)識也逐步提高。然而,由于豬瘟病毒的持續(xù)性感染、仔豬免疫耐受和妊娠母豬帶毒等問題,以及豬場飼養(yǎng)數(shù)量多且各種年齡豬都有的現(xiàn)狀,采取綜合防疫措施預(yù)防豬瘟的發(fā)生仍具有十分重要的現(xiàn)實意義。
1 材料與方法
1.1 試劑與儀器
豬瘟正向間接血凝反應(yīng)(IHA)診斷試劑;微量移液器;V型96孔血凝板。
1.2 被檢血清樣品的收集
從龍海市9個豬場收集的被檢血清樣品共987頭份,其中包括育肥豬350頭、保育仔豬273頭、哺乳仔豬257頭和母豬107頭。各類豬的年齡和免疫情況:①哺乳仔豬,14~21日齡,未免疫;②保育豬,主要選擇一免后二免前的豬只,50~60日齡,斷奶日齡在21d左右,21~25日齡時進(jìn)行首次免疫,注射1頭份豬瘟脾淋苗,50~60日齡時,為加強(qiáng)免疫而注射2頭份脾淋苗;③育肥豬,體重在60kg以上,試驗前未注射其他疫苗;④母豬:每半年普免1次,每次肌注4頭份豬瘟脾淋苗。
1.3 方法與步驟
1.3.1 加稀釋液
用移液槍量取稀釋液50mg,加入血凝板上第一至第八排的1~12孔中。
1.3.2 稀釋待檢血清
將待檢血清樣品按順序編號,取待檢血清(1號)樣品50mg加入第一排的第一孔,混勻,然后再取50mg血清稀釋液加入第二孔混勻,依次類推一直稀釋至第十一孔?;靹蚝笕?0mg丟棄,此時第一排1~11孔待檢血清的稀釋度(倍數(shù))依次為1∶2(1)、1∶4(2)、1∶8(3)、1∶16(4)、1∶32(5)、1∶64(6)、1∶128(7)、1∶256(8)、1∶512(9)、1∶1024(10)、1∶2048(11)。
取待檢血清(2號)加人第二排,依上法進(jìn)行,稀釋所有樣品。最后一孔不加血清,作為稀釋液對照孔。
1.3.3 陰性對照血清的稀釋
用移液槍將陰性血清50mg加入血凝板第一排的第一孔中,倍比稀釋到第六孔,然后丟棄50mg,此時陰性血清的稀釋倍數(shù)依次為1∶2(1)、1∶4(2)、1∶8(3)、1∶16(4)、1∶32(5)、1∶64(6)。最后一孔不加血清,作為稀釋液對照孔。
1.3.4 陽性血清的稀釋
用移液槍將陽性血清50mg加入血凝板第二排的第一孔中,倍比稀釋到第十一孔,然后丟棄50mg,此時陽性血清的稀釋倍數(shù)依次為1∶2(1)、1∶4(2)、1∶8(3)……1∶2048(11)。最后一孔不加血清,作為稀釋液對照孔。
1.3.5 加血凝抗原
用移液槍在96孔血凝板中的各孔加入豬瘟血凝抗原25mg。
1.3.6 振蕩混勻
置血凝板于微量振蕩器上振蕩1 min,室溫靜置1.5~2h。
1.3.7 判定標(biāo)準(zhǔn)
以50%紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集的最大稀釋度為該血清的血凝效價。血凝抗原滴度以1∶256為合格抗體,達(dá)1∶16及以上則判定為免疫合格,否則視為不達(dá)標(biāo)。
2 結(jié)果與分析
經(jīng)過對9個豬場的不同階段豬群的豬瘟抗體進(jìn)行監(jiān)測,結(jié)果表明:母豬血清樣品107頭份,免疫合格的樣品數(shù)為81頭份,平均合格率達(dá)到75.7%;哺乳仔豬的抗體合格率僅次于母豬,檢測了257頭份,免疫合格的樣品數(shù)為185頭份,平均合格率為72.0%;保育豬和育肥豬的免疫抗體值比較低,各檢測273和350頭份,免疫合格樣品分別為173和197頭份,平均合格率分別為63.4%、56.3%。由此可見,該地豬群的整體健康水平和免疫狀況都不太理想。
3 討論
在間接血凝檢測結(jié)果中,當(dāng)豬瘟抗體水平達(dá)到1∶16以上時即可部分抵抗豬瘟病毒的侵襲,保護(hù)率可達(dá)80%左右,其抗體水平即可視為合格。從本次檢測結(jié)果來看,龍海市規(guī)模豬場豬瘟的抗體水平不高,平均保護(hù)率僅為64.44%。從檢測的樣本來看,母豬和哺乳仔豬的保護(hù)率相對較高,都在70%以上;而保育豬和育肥豬的保護(hù)率較低,抗體保護(hù)率還不能達(dá)到完全防控豬瘟的目的,在飼養(yǎng)環(huán)境條件差或季節(jié)變換等情況下可能會導(dǎo)致豬瘟流行。
母豬和哺乳仔豬的免疫合格率之所以比保育豬和肥育豬高,主要有2個方面的原因:(1)母豬的免疫次數(shù)較多且母源抗體水平較高。對于母豬,豬場1年基礎(chǔ)免疫2次,這就使得母豬的抗體水平一直處于比較高的水平,能提供比較強(qiáng)的免疫保護(hù)力。因為母豬的抗體水平相對較高,其提供給哺乳仔豬的母源抗體自然也較高。(2)免疫程序。豬瘟免疫抗體水平與接種豬的體質(zhì)、飼養(yǎng)環(huán)境和免疫程序有一定的關(guān)系,合理科學(xué)的豬瘟免疫程序?qū)μ岣邫C(jī)體產(chǎn)生豬瘟抗體有較好的效果,不同超免時間產(chǎn)生的抗體量并不一致,而且不同免疫程序?qū)ωi瘟抗體產(chǎn)生和發(fā)揮的效果也不一致。
本實驗中的平均抗體合格率為64.44%,這說明該區(qū)域存在豬瘟感染的可能性,尋找一個科學(xué)合理的方案來提高豬群對豬瘟的抵抗力已刻不容緩。因此,我們應(yīng)采取綜合防御措施,制定較為合理的免疫方案,在控制傳染病的傳播途徑上(如嚴(yán)格引種等)以加大力度控制病毒進(jìn)入;加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,提高豬群的營養(yǎng)水平;進(jìn)行合理的免疫接種,投喂一些免疫增強(qiáng)劑以增強(qiáng)豬群的免疫效果,提高其對疾病的抵抗力;定期進(jìn)行抗體檢測,在免疫接種前先測定仔豬斷奶時的母源抗體效價,排除母源抗體的干擾。同時。還要隨時了解傳染病的活動狀態(tài),必要時則對某些傳染性疾病用高效抗血清進(jìn)行預(yù)防和治療。通過綜合治理等防制措施,我們一定能進(jìn)一步將一些傳染性疾病造成的損失控制在最低限度。