【摘 要】為充分發(fā)揮山羊的繁殖能力,筆者通過一系列試驗對波爾山羊非繁殖季節(jié)的胚胎移植方案進行了初步探索,為當?shù)厣窖蝠B(yǎng)殖提供參考。
【關(guān)鍵詞】山羊;非繁殖季節(jié);胚胎移植;超數(shù)排卵
波爾山羊是我國最近幾年引進的良種肉用型山羊,深受廣大養(yǎng)殖場(戶)的歡迎。為了加速本地山羊品種的雜交改良,對波爾山羊進行快速擴群并在選育上采用胚胎移植的方法,這是目前比較成熟、實用的技術(shù)。波爾山羊和本地山羊在春節(jié)以后發(fā)情,表現(xiàn)開始減弱直至停止而進入非繁殖季節(jié),在非繁殖季節(jié)采用傳統(tǒng)方法對波爾山羊進行超數(shù)排卵和對奶山羊、太行山羊進行同步發(fā)情,效果較差。如何簡單有效地解決這一問題而充分發(fā)揮山羊的繁殖能力?對這個問題的研究,無論在育種方面還是在提高經(jīng)濟效益方面都有重要意義。鑒于此,經(jīng)過1年多的時間,我們在山羊非繁殖季節(jié)做了一系列試驗,對波爾山羊非繁殖季節(jié)胚胎移植方案進行了初步探索。
1 試驗材料
1.1 試驗時間與地點
非繁殖季節(jié)4月份至8月份,在山西省晉中種羊場試驗基地進行。
1.2 試驗動物
1 供體:波爾母山羊10頭,年齡 2~4歲,健康,經(jīng)產(chǎn)空懷,體況中等以上,圈內(nèi)散放飼養(yǎng),每天飼喂 3~4次青草,補飼 2 次混合精料,自由飲水;
2 受體:奶山羊和太行山羊,年齡3~4 歲,健康,經(jīng)產(chǎn)空懷,體況中等以上,飼養(yǎng)方式同供體羊。
1.3 試驗藥品
氯前列烯醇PG,上海市計劃生育科學研究所;垂體促卵泡素 FSH,浙江省寧波市激素制品廠;促黃體素釋放激素LRH,上海麗珠東風生物技術(shù)有限公司;黃體酮 ,上海第九制藥廠;苯甲酸雌二醇E2,上海第九制藥廠;情酮栓(Enestrusin),南京農(nóng)業(yè)大學提供;HCG(絨毛膜促性腺激素)。
2 試驗方法與步驟
2.1 誘導發(fā)情
2.1.1 波爾山羊
因其發(fā)情有一定的季節(jié)性,我們設(shè)計了2種方案來對其進行非繁殖季節(jié)誘導發(fā)情。第一組采用PG法。隨機選擇4頭波爾山羊,每頭肌注PG 1.0ml,觀察發(fā)情情況,詳細記錄。第二組采用Enestrusin-FSH-HCG法。隨機選擇6頭波爾山羊,第一天埋Enestrusin,第十天肌注FSH 50IU,第十二天撤栓并肌注HCG 100IU,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。
2.1.2 奶山羊
不僅要考慮其發(fā)情的季節(jié)性,同時還要考慮實施的簡單性,我們設(shè)計了2種方案來對其進行誘導發(fā)情。第一組采用PG法。隨機選擇8頭奶山羊,每頭肌注PG 1.0ml,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。第二組采用PG-E2法。隨機選擇20頭奶山羊,每頭肌注PG 1.0ml,同時肌注E2 0.3mg,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。
2.1.3 太行山羊
采用PG-E2法。隨機選擇 20頭奶山羊,每頭肌注PG 1.0ml,同時肌注E2 0.3mg,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。
2.2 胚胎移植
2.2.1 超數(shù)排卵與配種
依據(jù)誘導發(fā)情試驗的結(jié)果,設(shè)計2種超數(shù)排卵方案。第一組采用FSH-PG- LRH法(傳統(tǒng)方法),直接對5頭波爾山羊采用FSH進行超排,具體步驟如下:第一天肌注FSH 150IU,分上、下午2次注射;第二天肌注FSH 100IU,分上、下午2次注射;第三天肌注FSH 50IU,同時肌注PG 1.5ml,分上、下午2次注射;第四天肌注LRH 50IU,一次性注射;第五天種公羊試情,發(fā)情后每隔4~6h配種1次,連配3次。
第二組采用Enestrusin-FSH-PG-LRH法,對5頭波爾山羊進行超排,具體步驟如下:第一天埋Enestrusin,同時肌注黃體酮20mg;第十天肌注FSH 150IU,分上、下午2次注射;第十一天肌注FSH 100IU,分上、下午2次注射;第十二天肌注FSH 50IU,同時肌注PG 1.5ml,分上、下午2次注射,下午撤栓;第十三天肌注LRH 50IU,一次性注射;第十四天種公羊試情,發(fā)情后每隔4~6h 配種1次,連配3次。
2.2.2 同期發(fā)情
依據(jù)誘導發(fā)情試驗結(jié)果,我們對奶山羊采用了PG+E2+LRH法進行同期發(fā)情,對太行山羊也采用了PG+E2+LRH法進行同步發(fā)情。
第一組:用奶山羊作受體,采用 PG+E2+LRH法進行同期發(fā)情。每頭奶山羊于供體注射FSH的第二天肌注 PG 1ml,同時肌注 E2 0.3mg,48h后肌注 LRH 50IU,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。第二組:用太行山羊作受體,也采用PG+E2+LRH法進行同期發(fā)情。每頭奶山羊于供體注射FSH的第二天肌注PG 1ml,同時肌注 E2 0.3mg,48h后肌注LRH 50IU,觀察發(fā)情情況并詳細記錄。
2.2.3 胚胎移植
配種后第三天,通過外科手術(shù)自供體輸卵管中沖出胚胎,詳細檢查供體兩側(cè)卵巢的發(fā)育情況,記錄排卵點和獲胚數(shù),隨即將沖出的胚胎移入與供體同期發(fā)情的受體體內(nèi),記錄受體排卵及移胚情況。供、受體正常術(shù)后護理與飼養(yǎng)。
3 結(jié)果
3.1 誘導發(fā)情效果
在非繁殖季節(jié)波爾山羊的誘導發(fā)情試驗中,PG法效果較差,發(fā)情率為0 %;Enestrusin+FSH+HCG法效果較好,發(fā)情率達到83%。奶山羊的誘導發(fā)情試驗中,PG法的效果也很差,發(fā)情率僅為12.5%;而PG+E2法的效果非常好,發(fā)情率達到95%。太行山羊誘導發(fā)情的效果也不錯。
3.2 胚胎移植效果
3.2.1 超數(shù)排卵
用FSH+ PG+LRH法對波爾山羊進行超數(shù)排卵,雖然全部發(fā)情,但卵巢發(fā)育差,排卵點少且排卵數(shù)不多,排出的卵基本上沒有受精,未能獲得有效胚胎;用Enestrusin+ FSH+ PG+LRH法對波爾山羊進行超數(shù)排卵,供體發(fā)情率達66.7%,卵巢發(fā)育基本都很好,排卵點多,排卵數(shù)也多,排出的卵子受精率也高,用此法共獲得46枚有效胚胎,平均每頭供體獲得11.5枚。由此可見,2種方案中,以Enestrusin+FSH+PG+LRH法為優(yōu)。
3.2.2 同期發(fā)情效果
針對奶山羊和太行山羊采用PG+E2+LRH法進行同期發(fā)情,效果很好,但奶山羊的 PG+E2+LRH法存在16.1%的假發(fā)情現(xiàn)象,太行山羊也存在11.8%的假發(fā)情現(xiàn)象。在有效發(fā)情率上,太行山羊稍高于奶山羊。
3.2.3 胚胎移植效果
用FSH+PG+LRH法對供體進行超數(shù)排卵,成功率不高;用Enestrusin+FSH+PG+LRH法對供體進行超數(shù)排卵,成功率高;用PG+E2+LRH法對奶山羊進行同期發(fā)情,受體受孕率為54%,而太行山羊受體受孕率為60%。
4 結(jié)論
由此可見,在非繁殖季節(jié)對波爾山羊采用Enestrusin+ FSH+PG+LRH法超數(shù)排卵,以奶山羊和太行山羊為受體,進而用PG+E2+LRH法同期發(fā)情來進行胚胎移植的技術(shù)方案是可行的。