亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性及其基因的分析

        2013-12-31 00:00:00阮學(xué)雨
        中外醫(yī)療 2013年14期

        [摘要] 目的 探討分析鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性及其基因特征,為臨床合理應(yīng)用抗生素提供科學(xué)依據(jù)。方法 使用法國梅里埃公司的VITEK TWO細(xì)菌鑒定系統(tǒng)進(jìn)行菌株鑒定,以K-B法行耐藥試驗(yàn),使用碳青霉烯酶的4種基因特異型引物對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌行基因型分析及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)擴(kuò)增,通過GenBank比對(duì)確認(rèn)編碼酶基因的具體類型。結(jié)果 全部菌株中對(duì)多黏菌素B耐藥率最低為8.2%,對(duì)菌必治與亞胺培南的耐藥率最高為100%。結(jié)論 耐碳青霉烯類抗生素鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)于多黏菌素的耐藥性最低,其次對(duì)丁胺卡那霉素的耐藥性較低;主要攜帶OXA-23型的碳青霉烯酶基因,應(yīng)提請(qǐng)臨床廣泛關(guān)注。

        [關(guān)鍵詞] 鮑曼不動(dòng)桿菌;碳青霉烯類抗生素;耐藥性;基因

        [中圖分類號(hào)] R96 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742(2013)05(b)-0058-02

        鮑曼不動(dòng)桿菌(Ab)屬于一種非發(fā)酵型葡萄糖、革蘭染色呈陰性且無動(dòng)力型的雙球菌或者球桿菌,廣泛的存在于人體與自然界當(dāng)中[1]。鮑曼不動(dòng)桿菌是一種重要的院內(nèi)感染病原菌,可導(dǎo)致院內(nèi)感染流行性爆發(fā)[2]。為積極預(yù)防流行性感染及臨床合理用藥,本院對(duì)Ab耐藥性及其基因特征進(jìn)行深入分析,現(xiàn)將詳細(xì)情況總結(jié)如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        本次研究所用鮑曼不動(dòng)桿菌為2011年1—12月間從本院臨床血液、痰液、尿液等標(biāo)本中分離獲取的非重復(fù)菌株,挑選其中的30株。標(biāo)準(zhǔn)菌株為銅綠假單胞菌(ATCC27853)與大腸桿菌(ATCC25922)。

        1.2 方法

        1.2.1 設(shè)備與引物 采用法國梅里埃公司的VITEK TWO細(xì)菌鑒定系統(tǒng),專用試劑,MH、血培養(yǎng)基Oxoid公司出品,藥敏紙片使用英國Oxoid公司產(chǎn)品,PCR檢測使用美國PE公司出品的PCR儀,電泳使用Bio-Rad公司出品電泳儀,成像系統(tǒng)采用英國UVI凝膠成像分析系統(tǒng),Premix Taq酶與DNA Marker DL2000均為Takapa公司產(chǎn)品。引物基因序列設(shè)計(jì)由引物搜索軟件Oligo -6.0完成,共設(shè)計(jì)4對(duì)引物分別為OXA-23、OXA-24、OXA-51、OXA-58,產(chǎn)物長度分別為501 bp、246 bp、353 bp、599 bp,均由上海英駿生物技術(shù)有限公司合成。

        1.2.2 菌株鑒定標(biāo)準(zhǔn) Ab標(biāo)本的采集與分離嚴(yán)格依照第3版《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》執(zhí)行[3]。

        1.2.3 耐藥試驗(yàn) 采用K-B紙片擴(kuò)散法檢測耐藥性,試驗(yàn)操作與結(jié)果觀察均依據(jù)美國臨床實(shí)驗(yàn)室2010年標(biāo)準(zhǔn)化研究所(CLSI)制定的相關(guān)判斷標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。取耐亞胺培南鮑曼不動(dòng)桿菌的菌株接種于血平皿上,孵育18~24 h,取數(shù)個(gè)菌落入EP管中,加入150 μL滅菌蒸餾水,煮沸10 min即時(shí)于4℃條件下冷卻,以12000 r/min離心5 min后取上清液制備為PCR試驗(yàn)?zāi)0?,?20℃條件下儲(chǔ)存?zhèn)溆?。以PCR擴(kuò)增法對(duì)碳青霉烯類的OXA基因進(jìn)行檢測,加入25 μL 的Premix Taq酶體系,上下游引物分別1 μL,10 μL模板DNA,以ddH2O定容至50 μL,循環(huán)參數(shù)設(shè)置為94℃、預(yù)變性為5 min、94℃變性為45 s、52℃退火45 s后于72℃下延伸1 min,如此循環(huán)35次后于72℃下延伸10 min,取5 μL 的PCR產(chǎn)物以1.5%的瓊脂糖凝膠行電泳分析。DNA序列分析,將PCR產(chǎn)物由上海英駿生物公司行純化與雙向測序,測序結(jié)果于GenBank中行blast比對(duì),采取同源分析確定具體基因類型。

        2 結(jié)果

        2.1 耐藥性試驗(yàn)結(jié)果

        全部菌株中對(duì)多黏菌素B耐藥率最低為8.2%,對(duì)菌必治與亞胺培南的耐藥率最高為100%。見表1。

        2.2 PCR結(jié)果

        23株(79.2%)OXA-23引物的擴(kuò)增結(jié)果呈陽性(圖1),PCR產(chǎn)物雙向測序后確定的OXA-23具體序列號(hào)為GQ849192,99%鮑曼不動(dòng)桿菌同源;20株(66.7%)OXA-51引物的擴(kuò)增結(jié)果呈陽性(圖2),PCR產(chǎn)物雙向測序后確定的OXA-51具體序列號(hào)為GQ525851,98%鮑曼不動(dòng)桿菌同源;30株菌株擴(kuò)增均未見OXA-24與OXA-58型的基因。

        3 討論

        鮑曼不動(dòng)桿菌是院內(nèi)感染中一項(xiàng)重要致病病原菌,目前其在革蘭陰性桿菌導(dǎo)致的感染中的分離率已經(jīng)超過銅綠假單胞菌[4]。近些年來隨著廣譜抗生素的廣泛使用,鮑曼不動(dòng)桿菌的耐藥性也日益提高,顯現(xiàn)為泛耐藥菌株的爆發(fā)性流行[5]。碳青霉烯類的抗生素有著更為高效、廣譜的抗菌作用。但新型抗菌藥物的出現(xiàn)也導(dǎo)致了細(xì)菌耐藥性的提高。近些年來關(guān)于鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗生素的病例日益增多,且感染后的預(yù)后較差。

        該研究結(jié)果表明鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)于亞胺培南耐藥,并且對(duì)其他臨床中常用的廣譜抗菌藥物均有較高的耐藥率,對(duì)于慶大霉素、妥布霉素、頭孢吡肟、復(fù)方新諾明等的耐藥率均達(dá)到90%以上,這為臨床抗帶來了極大的壓力。不動(dòng)桿菌對(duì)于碳青霉烯類抗生素耐藥的機(jī)制十分復(fù)雜,主要是通過生成碳青霉烯酶發(fā)揮耐藥作用,碳青霉烯酶是一類能夠水解亞胺培南或者美羅培南的β-內(nèi)酰胺酶,主要包括Ambler分子中的A、B、D三種酶,D類酶可分為4組,第1組OXA-23包括23、49、27,同源性達(dá)99%;第2組OXA-24包括25、26、40同源性達(dá)98%;第3組OXA-51包括51、69屬天然產(chǎn)生;第4組OXA-58與上述3組同源性達(dá)50%。該研究結(jié)果表明OXA-23類基因的檢出率高達(dá)79.2%,OXA-51類基因的檢出率達(dá)66.7%,未見OXA-24與OXA-58類基因。

        綜上所述,鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)臨床中多數(shù)常用的碳青霉烯類抗生素均有較高的耐藥性,因此對(duì)鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行定期耐藥監(jiān)測并據(jù)此選用抗生素對(duì)臨床抗菌治療具有重要意義。

        [參考文獻(xiàn)]

        [1] 張玲玲,胡俊鋒,李峰,等.多耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性分析和部分耐藥基因檢測[J].中華臨床醫(yī)師雜志(電子版),2012,6(15):116-119.

        [2] 侯明玖,曾明,侯玲俐,等.多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐消毒劑、滅菌劑基因研究[J].長江大學(xué)學(xué)報(bào)自然科學(xué)版:醫(yī)學(xué)卷,2012,9(4):62-64.

        [3] 嚴(yán)冰,韓艷萍,張代惠,等.耐碳青霉烯類鮑曼不動(dòng)桿菌醫(yī)院感染監(jiān)測分析[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2012,30(4):327-329.

        [4] 佘婷婷,沈繼錄,徐無宏,等.廣泛耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐碳青霉烯類抗生素膜蛋白機(jī)制研究[J].中國感染與化療雜志,2012,12(4):280-284.

        [5] 楊均均,黃文祥,史芳靜,等.耐碳青霉烯鮑曼不動(dòng)桿菌流行特征及耐藥基因分析[J].中國抗生素雜志,2012,37(5):343-347,391.

        (收稿日期:2013-03-07)

        免费av网站大全亚洲一区| 欧美日韩中文亚洲另类春色| 精品久久久亚洲中文字幕| 亚州av高清不卡一区二区| 国产69久久精品成人看| av片在线观看免费| 成人无码a级毛片免费| 国产精品国产三级国产an不卡| 亚洲av色欲色欲www| 色偷偷久久一区二区三区| 国产精品一区2区三区| 色偷偷亚洲精品一区二区| 狠狠色丁香婷婷综合潮喷| 四川丰满少妇被弄到高潮| A阿V天堂免费无码专区| 狼人精品剧情av在线观看| 性刺激的大陆三级视频| 乌克兰少妇xxxx做受6| av在线免费观看你懂的| 麻豆国产精品一区二区三区| av永久天堂一区二区三区| 亚洲色图+国产精品| 亚洲av一二三又爽又爽又色| 亚洲熟妇自偷自拍另类| 天天躁日日躁狠狠很躁| 四虎精品国产一区二区三区| 在线观看二区视频网站二区| 一本加勒比hezyo无码专区| 国产亚洲精品第一综合麻豆| 日韩偷拍视频一区二区三区| 亚洲av少妇高潮喷水在线| 帮老师解开蕾丝奶罩吸乳视频| 国产成人亚洲综合无码精品| 成人性生交大片免费看激情玛丽莎 | 人妻少妇精品视中文字幕国语| 亚洲不卡电影| 日韩女优视频网站一区二区三区| 熟女少妇内射日韩亚洲| 国产精品日韩欧美一区二区区| 在线观看免费的黄片小视频| 国产亚洲精品美女久久久m |