摘要：目的：探討中藥制劑對(duì)大腸桿菌耐藥性逆轉(zhuǎn)作用。方法：將標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)用慶大霉素進(jìn)行耐藥菌株培養(yǎng)，使標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌株對(duì)慶大霉素產(chǎn)生耐藥性，三等分后分別放入三黃湯、五味消毒飲以及黃連解毒湯中進(jìn)行培養(yǎng)，于固體平板培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布使其生長(zhǎng)，之后再次進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，判斷三種中藥制劑對(duì)大腸桿菌耐藥性逆轉(zhuǎn)效果，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得出結(jié)論。結(jié)果：五味消毒飲對(duì)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株最低抑菌質(zhì)量濃度較高，為0.7g/ml，而三黃湯較低，為0.5g/ml，由此可知三黃湯在較低濃度即可起到一定的抑菌效果；三黃湯藥敏紙片直徑最大，且逆轉(zhuǎn)率最高（80.00%），而五味消毒飲藥敏紙片直徑最小，且逆轉(zhuǎn)率最低（40.00%）；五味消毒飲最佳逆轉(zhuǎn)時(shí)間最長(zhǎng)，而黃連解毒湯最佳逆轉(zhuǎn)質(zhì)量濃度最大，三種藥物對(duì)比分析結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論：在今后的研究中，應(yīng)當(dāng)以中醫(yī)辯證論治作理論指導(dǎo)，結(jié)合中藥四性五味，以現(xiàn)代藥物研究方法為手段，抓住治療耐藥細(xì)菌感染研究的契機(jī)，開(kāi)拓中藥制劑治療耐藥菌感染的領(lǐng)域。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌；耐藥性；逆轉(zhuǎn)率；中藥制劑；臨床作用

中圖分類(lèi)號(hào)：R378.2+1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-0515（2013）9-033-02

本文將對(duì)產(chǎn)生抗生素耐藥性的大腸桿菌進(jìn)行臨床研究，從而探討中藥制劑對(duì)大腸桿菌耐藥性逆轉(zhuǎn)作用，為臨床改善抗生素耐藥性大腸桿菌治療效果提供可靠依據(jù)，提高患者臨床療效及生活質(zhì)量，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 材料 ①大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株。由省醫(yī)院檢驗(yàn)中心提供，ATCC25922；②蛋白胨水培養(yǎng)基。即普通瓊脂培養(yǎng)基，由上海伊華醫(yī)學(xué)科技有限公司提供；③水解酪蛋白瓊脂，由杭州微生物試劑廠(chǎng)提供；④藥敏紙片。由蘭州麥迪生物科技有限公司提供，頭孢噻肟30ug、頭孢他啶30ug。

1.2 方法

1. 2. 1 中藥制劑制備 三種中藥制劑方劑組成：①黃連解毒湯，黃連、梔子、黃芩、黃柏；②三黃湯，黃芩、大黃、黃連；③五味消毒飲，野菊花、紫花地丁、金銀花、紫背天葵子、蒲公英。取上述三種中藥方劑粗粉20g加入蒸餾水，蒸餾水量應(yīng)恰好沒(méi)過(guò)藥材約5cm，室溫環(huán)境下浸漬30min后使用文火煎煮30min，之后將藥液濾出，重復(fù)上述過(guò)程一次，將兩次所得藥液混合均勻后調(diào)節(jié)pH值為7.4-7.6，將其蒸發(fā)濃縮至原藥材質(zhì)量與煎液體積比為每毫升1.0g，于4攝氏度保存待用。

1. 2. 2 研究方法 將標(biāo)準(zhǔn)菌株應(yīng)用慶大霉素進(jìn)行耐藥菌株培養(yǎng)，使標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌菌株對(duì)慶大霉素產(chǎn)生耐藥性，經(jīng)美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（CLSI/NCCLS）指定抗微生物藥敏試驗(yàn)檢測(cè)獲得超廣譜β-內(nèi)酰胺酶大腸桿菌 [1]。將所得耐藥菌株三等分，分別放入三黃湯、五味消毒飲以及黃連解毒湯中進(jìn)行培養(yǎng)（濃度分別為0.1g/ml、0.2g/ml、0.3g/ml、0.4g/ml、0.5g/ml、0.6g/ml、0.7g/ml、0.8g/ml、0.9g/ml、1g/ml，培養(yǎng)時(shí)間分別為12h、24h、36h、48h、60h以及72h），于固體平板培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布使其生長(zhǎng)，之后再次進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，判斷三種中藥制劑對(duì)大腸桿菌耐藥性逆轉(zhuǎn)效果，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得出結(jié)論。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均使用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)于計(jì)量資料用 ±s表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用X2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 MIC 三種中藥制劑對(duì)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株MIC對(duì)比分析，具體情況見(jiàn)表1。（在標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)控菌株的最低抑菌濃度符合規(guī)定范圍的前提下，以無(wú)菌生長(zhǎng)的最低抗菌藥物溶液的濃度為最低抑菌濃度，即MIC）

由表1可知，五味消毒飲對(duì)大腸桿菌標(biāo)準(zhǔn)菌株最低抑菌質(zhì)量濃度較高，為0.7g/ml，而三黃湯較低，為0.5g/ml，由此可知三黃湯在較低濃度即可起到一定的抑菌效果。

2. 2 耐藥性逆轉(zhuǎn) 五味消毒飲、三黃湯以及黃連解毒湯對(duì)耐藥性大腸桿菌的逆轉(zhuǎn)率及逆轉(zhuǎn)后藥敏紙片直徑對(duì)比分析，具體情況見(jiàn)表2。

由表2可知，三黃湯藥敏紙片直徑最大，且逆轉(zhuǎn)率最高（80.00%），而五味消毒飲藥敏紙片直徑最小，且逆轉(zhuǎn)率最低（40.00%），三種藥物對(duì)耐藥性大腸桿菌逆轉(zhuǎn)效果對(duì)比分析結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

2. 3 最佳時(shí)間及質(zhì)量濃度 五味消毒飲、三黃湯以及黃連解毒湯對(duì)耐藥性大腸桿菌的逆轉(zhuǎn)最佳時(shí)間及最佳質(zhì)量濃度