摘要：目的 通過(guò)不同炮制時(shí)段來(lái)研究何首烏中蒽醌的含量變化情況。方法 何首烏分別采用黑豆汁拌蒸不同時(shí)段， 醋酸鎂比色法分別測(cè)定炮制飲片中游離蒽醌和總蒽醌的含量。結(jié)果 用黑豆汁拌蒸的何首烏飲片10h內(nèi)游離蒽醌含量逐漸升高， 總蒽醌含量沒(méi)有顯著性變化。結(jié)論 何首烏飲片的炮制時(shí)間對(duì)其藥性成分有影響，應(yīng)統(tǒng)一規(guī)范其炮制時(shí)間。

關(guān)鍵詞： 何首烏； 高效液相色譜法； 醋酸鎂比色法

中圖分類(lèi)號(hào)：R943.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號(hào)：1005-0515（2013）11-084-02

何首烏為蓼科植物何首烏（P olygonum multif lorum Thunb）。 的干燥塊根， 為常用中藥。生品具有解毒、消癰、潤(rùn)腸通便之功效。制首烏具有補(bǔ)肝腎、益精血、烏須發(fā)、增強(qiáng)免疫力、改善記憶障礙及抗衰老等功效[1]。何首烏中主要有效成分為蒽醌類(lèi)和二苯乙烯化合物。結(jié)合蒽醌具有瀉下作用， 何首烏經(jīng)炮制后結(jié)合蒽醌逐漸轉(zhuǎn)為無(wú)瀉下作用的游離蒽醌[2] 。現(xiàn)有的炮制方法有多種， 但各種方法均未規(guī)范其炮制時(shí)間。炮制時(shí)間的長(zhǎng)短對(duì)其各個(gè)成分的含量影響較大，探明其在炮制前后主要成分變化是很有必要的。本實(shí)驗(yàn)選擇5中國(guó)藥典6中規(guī)定的黑豆汁拌蒸法， 考察不同時(shí)間的黑豆汁拌蒸工藝對(duì)何首烏中蒽醌主要化學(xué)成分的影響。

1 器材

日本島津高效液相色譜儀， SPD-10VAP 型紫外檢測(cè)器；FA2004電子天平；UV-2201型紫外- 可見(jiàn)分光光度計(jì)（日本Sh-im adzu）， AS3120型超聲波清洗器（奧特賽思儀器有限公司）。何首烏藥材由吉林敖東藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司提供， 經(jīng)鑒定均為蓼科植物何首烏的干燥塊根。實(shí)驗(yàn)樣品為實(shí)驗(yàn)室自制的何首烏生飲片， 經(jīng)黑豆汁拌蒸0， 2， 4， 6， 8， 10 h的飲片。黑豆汁拌蒸法： 取黑豆適量（ 1 /10何首烏的量）， 加適量的水煎煮2次，用200目篩絹濾出， 合并濾液， 濃縮至約黑豆的2.5 倍。將黑豆汁加入何首烏飲片中，拌勻，浸潤(rùn)24 h，取出浸潤(rùn)后的何首烏適量作為0 h飲片單放， 其余的按2，4，6，8，10 h進(jìn)行蒸制。乙腈為色譜純（美國(guó)F isher公司）； 水為重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)

2.1 對(duì)照品溶液的制備

精密稱(chēng)取經(jīng)105e干燥至恒重的1，8- 二羥基蒽醌對(duì)照品5.1mg， 置25ml容量瓶中， 甲醇溶解并定容， 作為對(duì)照品溶液。

2.2 供試品溶液的制備

取各何首烏飲片粉末（ 過(guò)80目篩）0. 5 g， 精密稱(chēng)定， 置50 m l容量瓶中， 加入氯仿40ml 超聲處理40min， 放冷， 用氯仿稀釋至刻度， 搖勻， 過(guò)濾， 取續(xù)濾液作為供試品溶液[1]。另取各何首烏飲片粉末（過(guò)80目篩）0.5g， 精密稱(chēng)定，置150ml錐形瓶中， 加30ml氯仿和30ml硫酸（ 2.5 mol# L- 1 ），水浴回流水解2 h， 放冷， 水解液置分液漏斗中， 分取氯仿層于50ml容量瓶中， 水層用氯仿洗滌（5m l@3）， 洗液并入容量瓶中， 并用氯仿稀釋至刻度， 搖勻， 過(guò)濾， 取續(xù)濾液作為供試品溶液[2] 。

2.3 線(xiàn)性關(guān)系考察

精密吸取/2.1.10 項(xiàng)下的對(duì)照品溶液0.2， 0.4， 0.6， 0.8，1.0 ml置l0ml容量瓶中，置水浴上蒸干， 放冷，將殘?jiān)?.035 mol#L-1醋酸鎂-甲醇溶液溶解并定容， 以0.035 mol#L- 1醋酸鎂-甲醇溶液為空白，在510nm測(cè)定吸光度，以吸光度（ Y）為縱坐標(biāo)，濃度（ X，Lg# ml-1）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得回歸方程為；Y= 0.049 9X+0.0036（ r= 0.9999 ），表明1， 8- 二羥基蒽醌在4.08～ 20. 40 Lg 范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好。

2.4 精密度實(shí)驗(yàn)

精密吸取/ 2. 1. 10項(xiàng)下的對(duì)照品溶液0.5ml 按醋酸鎂比色法測(cè)定5次， 測(cè)得吸光度的RSD為0.34%。

2.5 回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱(chēng)取已知含量的樣品5份， 每份0.5g， 置50ml容量瓶中， 加入1ml對(duì)照品溶液， 再加入氯仿40ml超聲處理40m in。放冷， 氯仿定容，搖勻，過(guò)濾。精密吸取續(xù)濾液8 ml置l0ml容量瓶中，水浴蒸干，放冷，得殘?jiān)?。按醋酸鎂比色法測(cè)定， 計(jì)算1， 8一二羥基蒽醌的回收率。結(jié)果其平均回收率為98.06% + 1.98%（n=5）。

2.6 測(cè)定方法與結(jié)果

精密吸取/ 2. 1. 20項(xiàng)下的供試品溶液[ 1] 8ml置10ml容量