摘要：采用L9（34）正交試驗，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）皂苷Ⅵ為測定指標(biāo)，考察鹽使用量、炒制溫度、炒制時間、炒藥機轉(zhuǎn)速4個因素對鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響，并采用多指標(biāo)綜合評分法優(yōu)化鹽續(xù)斷中試炮制工藝。結(jié)果表明，鹽續(xù)斷中試最佳炮制工藝為每100 kg續(xù)斷飲片用2 kg食鹽，210 ℃炒12 min，炒藥機轉(zhuǎn)速40 r/min。綜合評分法優(yōu)選出的鹽續(xù)斷中試炮制工藝穩(wěn)定、可行，能較好地保證產(chǎn)品的質(zhì)量。

關(guān)鍵詞：續(xù)斷；鹽制；中試；工藝優(yōu)化

中圖分類號：S567.2；R943 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）18-4481-03

續(xù)斷為川續(xù)斷科（Dipsacaceae）多年生草本植物川續(xù)斷（Dipsacus asper Wall. ex Henry）的干燥根，主產(chǎn)于湖北、四川等地。味苦、辛，微溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補肝腎、行血脈、續(xù)折傷的功效，臨床上多用于腰膝酸軟、風(fēng)濕痹痛、崩漏、胎漏、跌打損傷等癥[1]。研究表明續(xù)斷有抗骨質(zhì)疏松[2]、促進骨愈合[3]、治療阿爾茨海默病的作用[4]及其他藥理作用，是治療骨科疾病及治療阿爾茨海默病的潛在藥物。酒續(xù)斷自古有之，目前已有較佳的炮制工藝[5]，而鹽續(xù)斷是近些年才發(fā)展起來的，鹽引藥走腎[6]，故鹽續(xù)斷補腎之功增強。目前鮮見關(guān)于鹽續(xù)斷炮制工藝的研究。為此采用正交試驗，以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量為指標(biāo)，對加鹽量、炒制時間、炒制溫度和炒藥機轉(zhuǎn)速4個影響因素進行分析，以期優(yōu)化鹽續(xù)斷的中試炮制工藝。

1 材料與方法

1.1 材料及設(shè)備

乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。續(xù)斷購自浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥飲片廠（批號091214），經(jīng)浙江中醫(yī)藥大學(xué)來平凡教授鑒定為中國藥典規(guī)定的川續(xù)斷的干燥根。續(xù)斷經(jīng)凈制、切制得到薄片。對照品川續(xù)斷皂苷Ⅵ（批號111685-200401）購自中國藥品生物制品檢定所。該工藝研究中每次試驗飲片用量為5 kg，炮制條件與大規(guī)模生產(chǎn)相近，可以指導(dǎo)續(xù)斷大規(guī)模生產(chǎn)的炮制工作。

Agilent 1200高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；CGY（Q）-750Z智能化炒藥機（杭州海善制藥設(shè)備有限公司）；KQ-500DB型數(shù)控超聲波清潔器（昆山市超聲儀器有限公司）；AL204電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 方法

1.2.1 正交試驗設(shè)計 續(xù)斷鹽制工藝正交試驗設(shè)計見表1。

1.2.2 水溶性浸出物含量的測定 取供試品約2 g置于100 mL的錐形瓶中，加水定容至50 mL，稱定重量，靜置1 h后連接回流冷凝管，加熱至沸騰，并保持微沸1 h。放冷后取下錐形瓶，再稱定重量，用去離子水補足減失的重量，搖勻，干燥濾器濾過，量取濾液2 mL置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴上蒸干后于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷卻30 min，迅速精密稱定重量[1]。除另有規(guī)定外，以干燥品計算供試品中水溶性浸出物的含量。

1.2.3 川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量的測定

1）色譜條件。反相色譜柱為Eclipse XDB-C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），以乙腈-水（30∶70，V/V）為流動相，檢測波長212 nm，流速1 mL/min[1]。理論板數(shù)按川續(xù)斷皂苷Ⅵ峰計算應(yīng)不低于3 000。

2）對照品溶液的制備。精密稱取川續(xù)斷皂苷Ⅵ對照品適量，用甲醇配制成1.5 mg/mL的溶液。精確量取1 mL溶液置于10 mL的容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

3）供試品溶液的制備。取鹽續(xù)斷細(xì)粉約0.5 g置于具塞錐形瓶中，加入甲醇25 mL，稱定重量，超聲波處理（功率100 W，頻率40 kHz）30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過。量取續(xù)濾液5 mL置于50 mL容量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。

2 結(jié)果與分析

2.1 續(xù)斷鹽制正交試驗結(jié)果及分析

以續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量為指標(biāo)進行綜合加權(quán)評價，續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的總量權(quán)重各占50%，綜合加權(quán)得分=（第i個處理水溶性浸出物含量÷水溶性浸出物含量最大值）×50+（第i個處理川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量÷川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量最大值）×50。正交試驗結(jié)果見表2。

從表2可以看出，各因素對鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響為A>D>B>C，但影響均不顯著。因各因素都沒有顯著影響，故可以根據(jù)生產(chǎn)實際進行適當(dāng)選擇。溫度的影響最大，但藥典要求炒至表面稍有焦斑即可，溫度太高會炒焦，故根據(jù)炮制要求及從節(jié)能角度綜合考慮，選擇炒制溫度為210 ℃；加鹽量對質(zhì)量影響不大，故選擇中藥飲片鹽制時普遍的鹽用量每100 kg飲片用2 kg食鹽；炒制時間影響最小，但由于是飲片加鹽水潤透后再炒，飲片需炒干，根據(jù)本研究12 min可炒干并稍有焦斑；炒藥機轉(zhuǎn)速影響較大，但與實際有出入，攪拌的目的是使飲片炒得均勻，根據(jù)試驗結(jié)果再考慮到節(jié)能，選擇炒藥機轉(zhuǎn)速為40 r/min。最后炮制條件選擇組合A3B2C1D2，即加鹽量為每100 kg飲片加食鹽2 kg，210 ℃炒制12 min，自動炒藥機轉(zhuǎn)速為40 r/min。

2.2 驗證試驗

稱取同批次續(xù)斷飲片3份各5 kg，按照優(yōu)選的炮制工藝進行重復(fù)性試驗，結(jié)果見表3。從表3可以看出，各重復(fù)的續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量穩(wěn)定，重復(fù)性良好，工藝穩(wěn)定可行。

2.3 續(xù)斷鹽制前后各項指標(biāo)含量比較

按照中國藥典規(guī)定的測定方法比較鹽制前后續(xù)斷水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ兩項指標(biāo)含量的變化，具體見表4。表4結(jié)果表明，續(xù)斷飲片鹽制后水溶性浸出物含量明顯升高，可能是鹽和高溫促使某些物質(zhì)在水中易溶出；川續(xù)斷皂苷Ⅵ含量略有降低，可能是高溫破壞了部分川續(xù)斷皂苷Ⅵ的結(jié)構(gòu)。

3 小結(jié)

通過4因素3水平正交試驗優(yōu)選出續(xù)斷的最佳鹽制中試工藝，即每100 kg續(xù)斷飲片食鹽用量為2 kg，210 ℃炒制12 min，自動炒藥機轉(zhuǎn)速為40 r/min。驗證試驗結(jié)果表明該工藝穩(wěn)定可行，為續(xù)斷炮制的深入研究打下了一定的基礎(chǔ)。續(xù)斷鹽制正交試驗以水溶性浸出物和川續(xù)斷皂苷Ⅵ的含量為指標(biāo)，這兩項指標(biāo)各占權(quán)重50%，綜合評判鹽續(xù)斷的炮制工藝，使炮制溫度、炮制時間、加鹽量、炒藥機轉(zhuǎn)速評判客觀化，克服了傳統(tǒng)的單憑經(jīng)驗判斷各個影響因素因人而異的主觀性。該炮制工藝每個處理均用全自動炒藥機炒制5 kg飲片，炮制的條件與大規(guī)模生產(chǎn)相近，可以直接指導(dǎo)續(xù)斷大規(guī)模生產(chǎn)的炮制工作。該研究對飲片炮制前悶潤條件例如鹽水悶潤時間及調(diào)鹽水時水的用量等未詳加考察，今后可研究各種悶潤條件對鹽續(xù)斷質(zhì)量的影響。

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