【關(guān)鍵詞】 葉酸缺乏；出生缺陷；先天畸形；唇裂先天性心臟?。蝗焉?/p>

【中圖分類號】 R714.56 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 B

出生缺陷（birth defects）是指嬰兒出生時就已經(jīng)產(chǎn)生的形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能代謝、精神、行為等方面的異常[1]。每年誕生80萬～120萬名缺陷兒，平均每30秒就有一名缺陷兒誕生。缺陷兒如果獲得早期診斷和治療，可以獲得較好生活質(zhì)量，但是比例僅占20%～30%；30%～40%患兒在出生后死亡，約40%將成為終生殘疾。這意味著每年將有40萬家庭被卷入痛苦的漩渦中。

1 出生缺陷國內(nèi)外研究的總體現(xiàn)狀和發(fā)展趨勢

國際上對出生缺陷的研究和實踐始于20世紀(jì)五十年代末。1958～1959年粗線地震驚全世界“反應(yīng)?！笔鹿?，警醒人們重視出生缺陷的監(jiān)測。美國于1938年成立的馬奇迪梅斯基金會（March of Dimes），起初是為了預(yù)防和控制脊髓灰質(zhì)炎，1958年開始轉(zhuǎn)向研究出生缺陷。該基金會的主要作用是募集資金、展開科學(xué)研究和促進(jìn)信息交流，并積極把研究成果轉(zhuǎn)化為大眾服務(wù)。在其贊助下，1960年在英國倫敦召開了第一次出生缺陷國際學(xué)術(shù)會議，之后又先后在紐約、海牙等地召開多次出生缺陷國際學(xué)術(shù)會議[2]。

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展和人類基因組計劃的實施，人類遺傳學(xué)的研究進(jìn)入了黃金時期。除了出生缺陷的流行病學(xué)調(diào)查以外，人們已經(jīng)能夠在出生缺陷的預(yù)防和干預(yù)方面有所作為。近年來，國內(nèi)外在出生缺陷的基因篩選和克隆、發(fā)病機(jī)制、胚胎植入前診斷、產(chǎn)前診斷、出生缺陷與環(huán)境危險因子之間的相互作用、出生缺陷資源和出生缺陷人群干預(yù)等方面取得了一些突破性進(jìn)展。尤為重要的是，在過去的20多年，人們通過對人類單基因遺傳性疾病的研究，成功發(fā)現(xiàn)了許多與人類出生缺陷疾病相關(guān)的基因。對于復(fù)雜性狀的出生缺陷，如先天性心臟病、先天性唇裂、腭裂等，由于發(fā)生率更高、危害性更大，近年來更是引起了人們的關(guān)注。

目前胎兒脫落細(xì)胞獲得方法主要有：羊膜腔穿刺抽取羊水、絨毛膜取樣或胎兒鏡。但是上述這些方法都是有創(chuàng)性的，可能導(dǎo)致如宮內(nèi)感染、流產(chǎn)等并發(fā)癥；此外，許多孕產(chǎn)婦對這些創(chuàng)傷性的檢查存有疑慮，甚至是拒絕檢查，因此這些方法的依從性比較差。非創(chuàng)傷性獲取胎兒遺傳信息的方法就成為產(chǎn)前診斷的發(fā)展方向，其中最受關(guān)注的是：“從孕婦外周血中分離胎兒DNA或脫落的細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷”。因此，從孕婦外周血中提取胎兒脫落的細(xì)胞或遺傳物質(zhì)就成為無創(chuàng)傷性產(chǎn)前診斷的重要途徑。

利用存在于孕婦外周血循環(huán)中胎兒有核細(xì)胞是進(jìn)行無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷的途徑之一，但由于母體外周血中胎兒有核細(xì)胞很少，分離富集的操作繁瑣復(fù)雜，而且價格昂貴，限制了其臨床應(yīng)用。Lo等首次證實孕婦血漿中存在著胎兒來源的游離DNA，其特異性序列可被PCR穩(wěn)定擴(kuò)增和定量分析，為利用孕婦血漿中的胎源DNA進(jìn)行無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷提供了一條嶄新的途徑[3]。并且，DNA多態(tài)的發(fā)展推動了產(chǎn)前診斷的進(jìn)步，RFLP、微衛(wèi)星多態(tài)性、STR等遺傳標(biāo)記以及聯(lián)合基因突變檢測對地中海貧血、G6PD缺乏癥、甲型血友病、DMD、PKU等單基因病的產(chǎn)前診斷獲得了顯著的成效。

近年來，在母體血漿中也可檢測到胎兒RNA，這些RNA起源于胎盤且非常穩(wěn)定，是分子診斷的一個新的發(fā)展方向[4]。繼甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）mRNA在正常人血漿中成功檢測到之后，一些胎盤源性mRNA，如人胎盤催乳素（hPL）mRNA、胎兒促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素（CRH）mRNA和人絨毛膜促性腺激素β-亞單位（β-hCG）mRNA等，也相繼在母體血漿中檢測到。這些胎盤源性RNA為無創(chuàng)性產(chǎn)前診斷提供了新的標(biāo)記物[5]。

2 擬開展的出生缺陷相關(guān)研究

根據(jù)我國婦幼衛(wèi)生監(jiān)測網(wǎng)的報告結(jié)果，神經(jīng)管缺陷、所有的唇裂（唇裂，伴或不伴腭裂）以及先天性心臟病一直是我國圍產(chǎn)兒中高發(fā)的畸形，三者均為多因素疾病，并且其發(fā)生均與葉酸缺乏有一定的相關(guān)性?，F(xiàn)有醫(yī)學(xué)已經(jīng)證明，導(dǎo)致神經(jīng)管畸形的主要原因是孕婦體內(nèi)缺乏葉酸，但是關(guān)于葉酸與所有的唇裂以及先天性心臟病的研究僅限于部分流行病學(xué)研究報道[6，7]。關(guān)于葉酸在神經(jīng)管畸形發(fā)生中的作用的研究（動物實驗）方面我們已經(jīng)積累一定的經(jīng)驗，因此，我們擬開展葉酸缺乏與唇裂以及先天性心臟病發(fā)生相關(guān)性及其可能致病機(jī)制的研究。

3 葉酸缺乏與出生缺陷相關(guān)性的研究展望

3.1 葉酸缺乏與總唇裂、先天性心臟病發(fā)生率之間相關(guān)性統(tǒng)計分析 根據(jù)臨床檢查或B超檢查結(jié)果，對發(fā)現(xiàn)總唇裂、先天性心臟病患兒或胎兒的母親進(jìn)行追蹤調(diào)查，了解其服用的葉酸的時期、劑量、持續(xù)時間等指標(biāo)，然后進(jìn)行相關(guān)性分析。

3.2 葉酸缺乏與唇裂、先天性心臟病發(fā)病機(jī)制相關(guān)的研究探討 （1）分子生物學(xué)水平：由葉酸預(yù)防神經(jīng)管畸形的相關(guān)機(jī)制，可以得知葉酸是通過影響同型半胱氨酸的代謝而發(fā)揮作用，在此過程還受到亞甲基四氫葉酸還原酶的調(diào)節(jié)[8]。因此，我們可以通過研究總唇裂、先天性心臟病患兒或胎兒體內(nèi)亞甲基四氫葉酸還原酶的活性及其基因多態(tài)性來探討葉酸缺乏與其發(fā)病的相關(guān)性。如上所述，取材可以來源于患兒或孕婦的外周靜脈血。（2）蛋白水平：由神經(jīng)管畸形相關(guān)的動物實驗結(jié)果得知：在神經(jīng)管畸形發(fā)生過程中神經(jīng)管上皮表面的多種凝集素受體出現(xiàn)了相應(yīng)數(shù)量及時空變化，我們推測在所有唇裂、先天性心臟病的發(fā)生過程中，相應(yīng)部分上皮細(xì)胞表面的凝集素受體也可能會出現(xiàn)一定的變化。這是因為凝集素受體是指分布于細(xì)胞表面的糖蛋白、糖脂或糖復(fù)合物，它與細(xì)胞的形態(tài)變化和運(yùn)動、細(xì)胞的分化、細(xì)胞的識別和粘附、細(xì)胞的增殖和凋亡等過程密切相關(guān)，從而在組織和器官的形態(tài)發(fā)生過程中發(fā)揮著重要作用。通過研究葉酸影響同型半胱氨酸的代謝對細(xì)胞凝集素受體的影響，來探討其對細(xì)胞增殖黏附和凋亡的影響，幫助我們了解所有唇裂、先天性心臟病的發(fā)病機(jī)制。

參考文獻(xiàn)

[1] 王鳳蘭.中國出生缺陷監(jiān)測畸形圖譜[M].北京：北京醫(yī)科大學(xué)，中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)聯(lián)合出版社，1998.

[2] ICBDMS.Interenational Clearinghouse for Birth Deffects Monitoring Systems-Annual Report 2003[J].Roma：ICBDMS，2003.

[3] LoYM.Recent advances in fetal nucleic acids in maternal plasma[J].J Histochem Cytochem，2005，53：293-296.

[4] LoYM.Recent advances in fetalnucleic acids inmaternal plasma[J].J Histochem Cytochem，2005，53：293-296.

[5] TsuiNB，Ng EK，LoYM.Molecular analysis of circulating RNA in plasma[J].MethodsMolBio，2006，336：123-134.

[6] Loffredo LC，Souza JM，F(xiàn)reitas JA，et al.Oral clefts and vitamin supplemention[J].Cleft Palate Craniofac J，2001，38（1）：76-78.

[7] Wilson RD，Davies G，Desilets V，et al.The use of folic acid for the prevention of neural tube defects and other congenital anomalies[J].J Obstet Gynaecol Can. 2003，25（11）：959-973.

[8] 萬宗明，宋光明，吳練秋.葉酸預(yù)防神經(jīng)管畸形的研究進(jìn)展[J].2002，13（10）：614-616.