【摘 要】 目的:研究鱗癌患者與非鱗癌癌癥患者血清中結(jié)合珠蛋白(Haptoglobin,Hp)含量的差異,探討結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷過程中的應(yīng)用價(jià)值,為篩選鱗癌血清分子學(xué)標(biāo)志物提供依據(jù)。方法:收集30例鱗癌患者、26例非鱗癌癌癥患者血清為樣本,采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)定量檢測血清中結(jié)合珠蛋白。使用SPSS V17.0軟件分析鱗癌患者和非鱗癌癌癥患者血清結(jié)合珠蛋白含量的差異。結(jié)果:鱗癌患者血清結(jié)合珠蛋白含量(平均值:18.432mg/dl)明顯高于非鱗癌癌癥患者(平均值:11.361 mg/dl)。結(jié)論:血清結(jié)合珠蛋白檢測對鱗癌的診斷及鑒別診斷具有一定的臨床意義。
【關(guān)鍵詞】 鱗癌;結(jié)合珠蛋白;酶聯(lián)免疫吸附
【中圖分類號】 R730.43 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 B
Haptoglobin in the diagnosis and differential diagnosis of
squamous cell carcinoma of the Application
Bian qianying
(High Hong Kong People's Hospital of Taizhou City, taizhou,Jiangsu, 225321)
【Abstract】 Objective: to study the serum haptoglobin cotent difference betwwen squamous cell carcinoma (SqCa) patients and non-SqCa subjects,to approach the application value of haptoglobin in SqCa diagnostic procedure,and to provide experimental evidence for fingding serum biomarkers of SqCa.Methods: ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)was performed to detect the surum haptoglobin of the samples from 30 SqCa patients and 26 non- SqCa subjects . SPSS V17.0 was used to analysis the difference of haptoglobin cotent.Results: The haptoglobin cotent of squamous cell carcinoma (mean:18.432mg/dl)is significantly higher than the cotent of non-SqCa subjects (mean:11.361mg/dl).Conclusion: The detection of haptoglobin has clinical significace on the diagnosis and differential diagnosis of SqCa.
【Keywords】 Squamous Cell Carcinoma;Haptoglobin;ELISA
結(jié)合珠蛋白(Hp)是一種存在于血漿中的糖蛋白,能夠通過結(jié)合游離的血紅素達(dá)到防止脈管系統(tǒng)和腎臟受游離血紅素誘發(fā)的氧化損傷的作用,此外結(jié)合珠蛋白還可以促進(jìn)血紅素鐵的循環(huán)[1]。在腫瘤發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中結(jié)合珠蛋白在免疫抑制、血管生成和上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化等方面發(fā)揮著作用[2]。有研究表明,結(jié)合珠蛋白在卵巢癌[3]、乳腺癌[4]等患者的血清中表達(dá)水平出現(xiàn)上調(diào)。這些研究結(jié)果提示,結(jié)合珠蛋白是一種潛在的腫瘤血清標(biāo)志物。本研究發(fā)現(xiàn),在鱗癌患者血清中結(jié)合珠蛋白表達(dá)水平升高,提示結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷方面具有潛在的臨床應(yīng)用價(jià)值。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 血清樣本 本研究共收集30例鱗癌患者、26例非鱗癌癌癥患者血清為樣本。其中Ⅰ期鱗癌患者11例,Ⅱ期鱗癌患者8例,Ⅲ期鱗癌患者5例,Ⅳ期鱗癌患者6例。
1.1.2 檢測試劑盒 Human Hpt/Hp ELISA Kit(Catalogue Number H144-9)購自于Gbdeia公司。試劑盒包括如下試劑:生物素(Biological)、酶標(biāo)記物(Enzyme Conjugate)、標(biāo)準(zhǔn)品不同濃度6個(gè)(Standard Ⅰ-Ⅵ)、顯色液A、B(Substrate A、B)、終止液(Stop Solution)、濃縮洗液(Wash Solution)。
1.1.3 儀器 酶標(biāo)儀(Microplate Reader)為BIO-RAD公司產(chǎn)品。
1.2 方法
1.2.1 標(biāo)本采集 采集鱗癌患者及非鱗癌癌癥患者靜脈血2mL,室溫下血液凝固析出血清,3000r/min離心5min,吸取血清并分裝,-20℃保存,等待檢測。
1.2.2 Hp測定 取待測血清,稀釋15倍。采用ELISA,試劑盒為Gbdeia公司,嚴(yán)格按照說明書操作。
2 結(jié)果
實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示鱗癌患者組血清結(jié)合珠蛋白的平均含量為276.482ng/mL;而非鱗癌癌癥患者組血清結(jié)合珠蛋白的平均含量為170.419 ng/mL;統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)得兩組數(shù)據(jù)差異有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=8.516,P<0.01)。結(jié)果表明結(jié)合珠蛋白在鱗癌患者中呈現(xiàn)高表達(dá)趨勢(圖1)。
Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期鱗癌患者血清結(jié)合珠蛋白含量分別為234.472ng/mL、267.101ng/mL、284.496ng/mL、359.330 ng/mL,顯示血清結(jié)合珠蛋白含量隨著疾病的發(fā)展而呈現(xiàn)遞增趨勢。(圖2)
3 討論
腫瘤細(xì)胞在增殖生長的過程中不斷的向體液中分泌各種物質(zhì),這些物質(zhì)不僅是腫瘤細(xì)胞自身生長、侵襲和轉(zhuǎn)移所必需,而且可通過檢測體液中這些物質(zhì)的水平來反映腫瘤的增殖生長。其中,以血清作為研究對象來尋找腫瘤標(biāo)志物,越來越受到研究者的關(guān)注和重視。目前,與鱗癌相關(guān)的腫瘤標(biāo)志物有:癌胚抗原(CEA)、神經(jīng)元特異的烯醇酶(NES)、糖類抗原19-9(CA19-9)、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCCAg)等[5]。在鱗癌療效監(jiān)測與病情等方面這些血清腫瘤標(biāo)志物有一定的參考價(jià)值,但由于這些腫瘤標(biāo)志物在特異性和或敏感性方面不夠理想,均不能作為早期診斷的檢測指標(biāo)[6,7]。尋找特異的、敏感的新鱗癌腫瘤標(biāo)志物已成為鱗癌早期診斷的關(guān)鍵。
結(jié)合珠蛋白(Hp)是一種廣泛存在于人的血清及其他液體中的酸性糖蛋白,其主要功能是通過與游離的血紅蛋白(Hb)結(jié)合形成HP-Hb復(fù)合體,將Hb運(yùn)至肝臟代謝,從而避免Hb和鐵從腎臟丟失以及對腎臟造成損傷。結(jié)合珠蛋白還參與損傷組織修復(fù)、維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定和抗感染。在腫瘤、創(chuàng)傷、炎癥、感染和心肌梗死等情況下,其在血清中的含量會顯著升高。此外,結(jié)合珠蛋白還有抑制前列腺素的合成、促進(jìn)血管生成、抗氧化、抑制細(xì)菌和重要的免疫作用[8]。近年來,將結(jié)合珠蛋白作為標(biāo)記位點(diǎn),研究其與疾病的關(guān)系來探討某些疾病病因和發(fā)病機(jī)制已成為一個(gè)新的重要課題。
本實(shí)驗(yàn)通過ELISA定量檢測正常人與鱗癌患者血清內(nèi)結(jié)合珠蛋白的含量,研究其存在的差異及其臨床意義。有實(shí)驗(yàn)可以得出鱗癌患者血清中結(jié)合珠蛋白含量增高顯著,并且隨著疾病的發(fā)生發(fā)展而呈現(xiàn)遞增現(xiàn)象。結(jié)合珠蛋白對于鱗癌來說具有相對的特異性,提示結(jié)合珠蛋白對鱗癌的診斷和鑒別具有一定的臨床意義。在下一步研究中,我們將繼續(xù)收集鱗癌患者血清及鱗癌組織、癌旁組織,進(jìn)一步深入研究結(jié)合珠蛋白在鱗癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值。
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