【摘 要】 目的：探討乳腺癌患者中的HER2表達(dá)水平與化療藥敏預(yù)測(cè)基因的表達(dá)水平之間的關(guān)系。方法：收集80例乳腺癌組織，采用分支DNA液相芯片技術(shù)檢測(cè)HER2及化療藥敏預(yù)測(cè)指標(biāo)TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A的mRNA表達(dá)，分析HER2表達(dá)水平與化療藥敏預(yù)測(cè)基因的表達(dá)水平之間的關(guān)系。結(jié)果：80例乳腺癌患者的HER2表達(dá)水平與化療藥物敏感基因的mRNA表達(dá)水平可能具有正相關(guān)關(guān)系，但二者之間無(wú)顯著性差異。結(jié)論：乳腺癌患者在輔助化療中出現(xiàn)耐藥時(shí)，有必要進(jìn)行HER2及各預(yù)測(cè)因子的全面基因檢測(cè)。

【關(guān)鍵詞】 乳腺癌；HER2；化療藥敏預(yù)測(cè)基因；液相芯片技術(shù)

【中圖分類(lèi)號(hào)】 R737.9 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A

Correlation of HER2 Expression with Expression of Chemosensitivity-related Genes in Breast Cancer

Tang Xiaojiang

（Department of Oncological Surgery， First Affiliated Hospital，Xi'an Jiaotong University，Shanxi，Xi'an，710061）

【Abstract】 Objective： To study the relationship between HER2 expression and expression of chemosensitivity-related genes in breast cancer.Methods： The gene expressions of HER2， TYMS， RRM1， TUBB3 and TOP2A were examined by branched DNA-liquid chip in 80 breast cancer patients.Results： High expressions of chemosensitivity-related genes always exist as well as high expression of HER2， but there is no significant difference.Conclusion： There is a need for comprehensively detecting the genes of HER2 and chemosensitivity predictors when drug resistance occurs in breast cancer patients.

【Keywords】 breast cancer； HER2；chemosensitivity-related genes；liquid chip method

據(jù)研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，17%-30%的乳腺癌患者呈現(xiàn)人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）的高表達(dá)或HER2基因擴(kuò)增[1]，而HER2蛋白高表達(dá)或HER2基因擴(kuò)增的乳腺癌患者普遍預(yù)后較差，表現(xiàn)為常在較短的時(shí)間內(nèi)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移[2]。因此，HER2已經(jīng)成為乳腺癌的一種重要分子分型，HER2表達(dá)狀態(tài)不僅可預(yù)測(cè)乳腺癌的預(yù)后好壞，而且可預(yù)測(cè)其靶向藥物曲妥珠單抗的療效，目前在乳腺癌的臨床治療過(guò)程中，HER2表達(dá)的檢測(cè)直接影響整個(gè)治療路徑。此外，近年來(lái)的國(guó)外一些臨床試驗(yàn)表明，HER2過(guò)表達(dá)（高表達(dá)或基因擴(kuò)增）也是潛在的化療藥物敏感預(yù)測(cè)因子[3]，而基于中國(guó)乳腺癌人群的HER2表達(dá)狀態(tài)與化療藥敏的關(guān)系還需驗(yàn)證。

乳腺癌常用的輔助化療藥物有5-Fu類(lèi)藥物（氟尿嘧啶、培美曲塞等）、吉西他濱、抗微管類(lèi)藥物（紫杉醇、多西他賽、長(zhǎng)春瑞濱）、蒽環(huán)類(lèi)藥物（多柔比星、吡柔比星等），以上藥物都是全身化療藥物，主要作用機(jī)理是細(xì)胞毒作用，通過(guò)與DNA或酶發(fā)生相互作用而造成相應(yīng)DNA表達(dá)異?；蜿P(guān)鍵酶的失活，進(jìn)而阻止腫瘤細(xì)胞的無(wú)限制增殖，最終達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。相關(guān)研究表明，以上各類(lèi)細(xì)胞毒藥物歸根結(jié)底是通過(guò)與相應(yīng)的基因（DNA本身或編碼關(guān)建酶的基因）相互作用而發(fā)揮藥效的。臨床試驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，胸苷酸合成酶基因（TYMS）的表達(dá)水平是5-Fu類(lèi)藥物療效的重要預(yù)測(cè)因子[4]，核苷酸還原酶基因（RRM1）的表達(dá)水平是吉西他濱療效的預(yù)測(cè)因子[5]，微管蛋白β3抗體基因（TUBB3）是抗微管類(lèi)藥物療效的預(yù)測(cè)因子[6]，拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ基因（TOP2A）是蒽環(huán)類(lèi)藥物治療效果的預(yù)測(cè)因子[7]。本文旨在系統(tǒng)研究乳腺癌患者HER2狀態(tài)與化療藥敏預(yù)測(cè)基因表達(dá)水平的相關(guān)性，從而判斷HER2表達(dá)水平與化療藥敏的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 材料 收集2010年-2012年西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科行免疫組化檢查的浸潤(rùn)性乳腺癌（HER2蛋白表達(dá)1+以上）80例，所有病例均經(jīng)病理科確診，病理類(lèi)型及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況經(jīng)病理醫(yī)師復(fù)核。

1.2 HER2 mRNA表達(dá)與化療藥敏預(yù)測(cè)基因mRNA表達(dá)檢測(cè) 顯微鏡下對(duì)經(jīng)福爾馬林固定、石蠟包埋的腫瘤組織進(jìn)行腫瘤細(xì)胞含量分析，選擇1塊含至少70%的腫瘤細(xì)胞進(jìn)行切片，刮取腫瘤組織用于DNA的提取，采用分支DNA液相芯片技術(shù)法（廣州益善醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所）檢測(cè)HER2、TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A mRNA表達(dá)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床資料 80例乳腺癌患者，女性80例，男性0例，年齡29-68歲，中位數(shù)47歲。全為組織標(biāo)本，病理類(lèi)型包括浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌73例（其中分化1級(jí)4例，2級(jí)38例，3級(jí)31例），浸潤(rùn)性小葉癌3例，導(dǎo)管和小葉混合型癌4例。80例患者均可獲知轉(zhuǎn)移情況，其中57例無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，23例有轉(zhuǎn)移。

2.2 分支DNA液相芯片技術(shù)檢測(cè)mRNA表達(dá) 用EXCEL條形圖對(duì)80例乳腺癌患者的HER2、TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A mRNA表達(dá)進(jìn)行了頻率分析，將各基因的mRNA表達(dá)連續(xù)性劃分為高、中偏高、中、中偏低和低不同水平，各基因表達(dá)譜如圖1所示。結(jié)果顯示，該80例乳腺癌患者的HER2表達(dá)水平整體低于化療藥敏基因的mRNA表達(dá)水平。

3 討論

隨著手術(shù)及術(shù)后多種輔助治療手段的不斷進(jìn)步，乳腺癌患者的預(yù)后得到明顯提高，但復(fù)發(fā)率和死亡率仍很高，尤其是HER2高表達(dá)的乳腺癌患者由于預(yù)后較差而在較短的時(shí)間內(nèi)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移，總生存期也較短。因此，經(jīng)歷近20年的循證醫(yī)學(xué)研究，靶向聯(lián)合化療的綜合輔助治療手段目前已成為較為有效的乳腺癌輔助治療方法，而靶點(diǎn)正是HER2，目前已被批準(zhǔn)上市的靶向藥有曲妥珠單抗、拉帕替尼，靶向藥物的上市的確讓人歡欣鼓舞，但在臨床實(shí)踐中卻沒(méi)有在很大程度上提高治療有效率，靶向藥或化療藥的臨床耐藥試驗(yàn)逐漸受到重視，而靶向與化療之間的關(guān)聯(lián)也得到關(guān)注。有國(guó)外研究顯示，HER2是潛在的化療藥敏預(yù)測(cè)因子，但HER2在表達(dá)過(guò)程中有多種分子形式，如DNA、mRNA和蛋白分子，因此HER2過(guò)表達(dá)包含基因擴(kuò)增、mRNA高表達(dá)和蛋白高表達(dá)，而哪種分子形式下的HER2狀態(tài)與化療藥敏基因相關(guān)還需進(jìn)一步研究證實(shí)。

通過(guò)本試驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)HER2 mRNA表達(dá)水平與化療藥敏預(yù)測(cè)因子TYMS、RRM1、TUBB3和TOP2A的整體mRNA表達(dá)可能具有正相關(guān)關(guān)系，但SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)分析顯示，各預(yù)測(cè)因子與HER2 mRNA表達(dá)水平無(wú)顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而進(jìn)一步的分析還需入組患者的治療隨訪數(shù)據(jù)的支持。但可以說(shuō)明的是基于循證醫(yī)學(xué)證據(jù)的乳腺癌標(biāo)準(zhǔn)化治療需要補(bǔ)充化療藥物相關(guān)基因的檢測(cè)[8]，從而識(shí)別患者個(gè)體基因差異，更加針對(duì)性地用藥，逐步實(shí)現(xiàn)乳腺癌的個(gè)體化治療，提高整體有效率。

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