陳 強(qiáng)，徐 陽(yáng)，王立成，費(fèi)東亮，蘇禹剛

子宮內(nèi)膜炎（endometritis）是在母牛分娩時(shí)或產(chǎn)后由于微生物感染所引起的，是奶牛不孕的常見(jiàn)原因之一［1］。目前在我國(guó)獸醫(yī)臨床統(tǒng)計(jì)，由子宮內(nèi)膜炎引起的奶牛不孕占成牛母牛不孕癥的17%以上［2］，嚴(yán)重影響了我國(guó)養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。

由于奶牛子宮內(nèi)膜炎在不同地區(qū)感染病原菌的種類有所不同［3］，而且錦州地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎發(fā)病情況及主要致病菌的相關(guān)研究資料報(bào)道甚少，因此，本研究對(duì)錦州地區(qū)部分奶牛場(chǎng)患子宮內(nèi)膜炎的奶牛子宮分泌液中主要病原菌進(jìn)行了分離和鑒定，并通過(guò)對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性分析，為該地區(qū)有效防治奶牛子宮內(nèi)膜炎提供參考資料和數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試牛

錦州地區(qū)奶牛場(chǎng)55頭子宮內(nèi)膜炎患牛。

1.2 病料采集

選擇55頭子宮內(nèi)膜炎患牛。將奶牛陰戶區(qū)進(jìn)行常規(guī)的清洗、消毒，向子宮內(nèi)注入20mL滅菌生理鹽水，再抽取子宮分泌物2～3mL注入到已滅菌的肉湯培養(yǎng)基中，盡快放在37℃溫箱中培養(yǎng)。

1.3 細(xì)菌分離鑒定

1.3.1 細(xì)菌分離 挑取少量用肉湯培養(yǎng)基培養(yǎng)了24h的菌液，在普通瓊脂培養(yǎng)基上劃線分離，置于37℃溫箱中培養(yǎng)24h，再挑取單菌落在普通瓊脂培養(yǎng)基上劃線分離、培養(yǎng)。

1.3.2 細(xì)菌鑒定 挑起普通營(yíng)養(yǎng)肉湯中菌液，涂片，進(jìn)行革蘭染色，鏡檢。根據(jù)菌落形態(tài)特征等將各分離純化的細(xì)菌分類并將其分別接種于鮮血瓊脂斜面，37℃培養(yǎng)24h后供生化試驗(yàn)用。

1.4 藥敏試驗(yàn)

采用Kirby－Barer法。所選的藥物有：紅霉素、阿米卡星、菌必治、先鋒必、青霉素、氨芐青霉素、鏈霉素、卡那霉素和環(huán)丙沙星。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌分離鑒定結(jié)果

55份病料中有47份中分離到細(xì)菌，細(xì)菌檢出率為85.5%，其中單獨(dú)感染占91.3%，混合感染占8.7%。47份病料中有細(xì)菌52株，分別為鏈球菌（56.4%，31／55）、葡萄球菌（27.3%，15／55）和大腸桿菌（16.3%，6／55）。

2.2 藥敏試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，抗菌藥物中對(duì)主要病原菌鏈球菌抑菌作用最強(qiáng)的為菌必治、先鋒必和鏈霉素，其次為紅霉素、青霉素和卡那霉素，耐藥率分別為12.9%、9.7%、29.0%，而對(duì)阿米卡星、氨芐青霉素、環(huán)丙沙星不敏感，耐藥率分別為58.1%、90.3%、54.8%；對(duì)主要病原菌葡萄球菌抑菌作用最強(qiáng)的為菌必治、先鋒必和鏈霉素，耐藥率為0，其次為青霉素，耐藥率為26.7%，對(duì)氨芐青霉素和卡那霉素不敏感，耐藥率為73.3%、86.7%；對(duì)主要病原菌大腸桿菌抑菌作用最強(qiáng)的為阿米卡星、菌必治、先鋒必和環(huán)丙沙星，耐藥率為0，其次為鏈霉素，耐藥率為16.7%，對(duì)紅霉素、氨芐青霉素、卡那霉素不敏感，耐藥率為83.3%、83.3%、50%。

表1 子宮內(nèi)膜炎病原菌對(duì)常用抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)

3 討論

通過(guò)對(duì)55份樣品分析，從47分樣品中共得到52個(gè)菌株。其中鏈球菌感染率最高，占56.4%，葡萄球菌占27.3%，大腸桿菌占16.3%。結(jié)果表明，引起錦州地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎的主要致病菌為鏈球菌和葡萄球菌，這與 Williams E J的研究報(bào)道一致［4］。

藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，多數(shù)病原菌對(duì)菌必治、先鋒必和鏈霉素敏感性較高，而對(duì)其他藥物敏感性較差或不敏感，為什么會(huì)出現(xiàn)這種現(xiàn)象呢？究其原因發(fā)現(xiàn)，主要與這些奶牛場(chǎng)平時(shí)治療過(guò)程中抗菌藥物用藥不合理息息相關(guān)［5］。

4 結(jié)論

1）錦州地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎的主要致病菌是鏈球菌、葡萄球菌、大腸桿菌，并且多數(shù)都是單一感染。

2）鏈球菌和葡萄球菌對(duì)菌必治、先鋒必和鏈霉素敏感；大腸桿菌對(duì)阿米卡星、菌必治、先鋒必和環(huán)丙沙星敏感。

［1］林 羲.家畜病理學(xué)［M］.第三版.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2001：184－185.

［2］麻延峰，王宏艷，黃利權(quán)，等.金華地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)［J］.中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào)，2007，29（8）：641－644.

［3］王 爽，和獅翼，劉 文，等.黑龍江地區(qū)奶牛子宮內(nèi)膜炎病原菌的分離鑒定與藥物敏感性試驗(yàn)［J］.中國(guó)獸藥雜志，2008，42（5）：33－35.

［4］Williams E J，F(xiàn)ischer D P，Noakes D E，etal.The relationship between uterine pathogen growth density and ovarianfunction in the postpartum dairy COWS［J］.TheriogenoIogy，2007，67（4）：51－51.

［5］陳 星，胡松華，張克春.奶牛子宮內(nèi)膜炎病原茵的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)［J］.中國(guó)獸醫(yī)雜，2010，46（1）：43－44.