劉艷麗，陳永剛，黃大鵬

（1.大慶禾豐八一農(nóng)大科技有限公司，大慶 163319；2.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院）

合生元是指益生素（Probiotics） 與益生元（Prebiotics）混合使用的生物制劑，其特點是可以同時發(fā)揮益生素和益生元的雙重作用[1-2]。Bailey 等[3]發(fā)現(xiàn)，寡聚果糖等可以促進(jìn)腸道內(nèi)乳酸菌等菌種的增殖，并通過有益菌的增殖來抑制有害菌，從而實現(xiàn)提高動物生長性能和免疫力的目的。目前，合生元的研究在我國已有一定的基礎(chǔ)，王龍昌等報道，向仔豬日糧中添加合生元可提高日增重，降低料重比及腹瀉率，并可改善血清生化指標(biāo)，從而改善仔豬的健康狀況[4]。試驗通過在斷奶仔豬日糧中添加以中草藥提取物為益生元與益生素組成合生元，研究合生元對早期斷奶仔豬免疫力的影響，為合生元的開發(fā)利用奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計與材料

選擇來源和飼養(yǎng)管理條件相同的28 日齡斷奶的杜×長×大三元斷奶仔豬72 頭，按體重、性別隨機(jī)分為8 組，每組3 個重復(fù)，每個重復(fù)3 頭豬，分別飼喂含不同組方的中草藥合生元的日糧。試驗所用合生元由2 個中藥組方（組方1：黃芪、黨參、麥芽、梔子、山楂、白術(shù)；組方2：黃芪、枳實、麥芽、陳皮、山楂、山茱萸）的提取物和益生素按一定比例構(gòu)成。試驗設(shè)計方案及添加量見表1。

表1 試驗分組及中草藥添加量Table 1 Experimental groups and additive amount of Chinese herbal medicine

1.2 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平

飼料中的營養(yǎng)物質(zhì)含量及能量的測定參照楊勝主編的《飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)》進(jìn)行。飼料配方按照1998 年NRC 標(biāo)準(zhǔn)及中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（豬飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（NY/T 65-2004））進(jìn)行配制。試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表2。

表2 試驗日糧組成及營養(yǎng)水平Table 2 Experimental daily ration constitute and nutritional level

1.3 試驗仔豬飼養(yǎng)管理

試驗仔豬以重復(fù)為單位置于高床單欄飼養(yǎng)，自動飲水器供水，舍溫控制在22～24 ℃，每日飼喂6次，每日清糞2 次，保持舍內(nèi)清潔，隨時觀察仔豬生長發(fā)育、采食及腹瀉等情況。仔豬進(jìn)舍前3 d 對豬舍進(jìn)行嚴(yán)格清洗、消毒。預(yù)飼期為7 d，仔豬進(jìn)行正常免疫和驅(qū)蟲，對患病仔豬給予適當(dāng)治療。

1.4 測定指標(biāo)與方法

（1）T-淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率（LTR%）的測定

淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗采用形態(tài)學(xué)檢查法，應(yīng)用非特異性有絲分裂原植物血凝素（PHA）作為刺激物。按公式計算：

（2）血清IgG、IgM、IgA 和補體C3、C4的測定

血清IgG、IgM、IgA 和補體C3、C4的測定采用免疫透射比濁法。

1.5 試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計利用SAS9.0 軟件包中的平衡實驗設(shè)計ANOVA 過程進(jìn)行方差分析，采用Duncan 法進(jìn)行均值的多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 合生元對斷奶仔豬血液淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響

由表3 可知，試驗所用合生元可提高LTR%，對照二組、各試驗組比對照一組分別提高1.28%、5.34%、9.80%、10.39%、1.78%、5.55%、6.80%，且試驗三組顯著高于對照一、二組（P＜0.05）；試驗二組顯著高于對照一組（P＜0.05）；其余各組間均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 合生元對斷奶仔豬血液淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響Table 3 Effect of synbiltics on blood lymphocyte transformation rate of weaned piglets

2.2 合生元對斷奶仔豬血清免疫蛋白含量的影響

由表4 可知，試驗所用合生元可在一定范圍內(nèi)提高仔豬血清免疫球蛋白含量。在IgG 方面，試驗三組顯著高于對照一組、試驗四組（P＜0.05）；試驗一、六組顯著高于對照一組（P＜0.05）；其余各組之間相比均無顯著差異（P＞0.05）。在IgM 方面，試驗三組顯著高于對照一組、對照二組、試驗一組、試驗二組、試驗五組、試驗六組（P＜0.05）；其余各組間均無顯著差異（P＞0.05）。在IgA 方面，試驗三組顯著高于對照一、二組、試驗五組（P＜0.05）；其余各組間均無顯著差異（P＞0.05）。

表4 合生元對斷奶仔豬血清免疫蛋白的影響Table 4 Effect of synbiotics on serum immunity protein of weaned piglets

2.3 合生元對斷奶仔豬血清補體含量的影響

由表5 可知，試驗所用合生元可提高血清補體含量。在補體C3方面，試驗三組顯著高于對照一組（P＜0.05）；其余各組間均無顯著差異（P＞0.05）。在補體C4方面，試驗三組含量顯著高于對照一、二組、試驗二、五組（P＜0.05）；試驗二組顯著高于對照二組（P＜0.05）；其余各組間均無顯著差異（P＞0.05）。

表5 合生元對斷奶仔豬血清補體含量的影響Table 5 Effect of synbiotics on serum complement content of weaned piglets

3 討論

試驗所用合生元對提高免疫指數(shù)的機(jī)理在于：微生態(tài)制劑的免疫刺激作用主要與糖類有關(guān)，而黨參、黃芪、山楂等中藥可提供多糖成分。糖類作為生物機(jī)能調(diào)節(jié)分子，對巨嗜細(xì)胞和T 淋巴細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等均有明顯的刺激作用，使這些細(xì)胞的活性增強(qiáng)，刺激機(jī)體增強(qiáng)免疫力[5]。

血液淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率（LTR%）常作為衡量機(jī)體免疫水平的指標(biāo)，T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率越高，表示淋巴細(xì)胞在外來因子的刺激下增殖率上升，機(jī)體的細(xì)胞免疫能力增強(qiáng)。研究發(fā)現(xiàn)，對照二組、各試驗組的LTR%分別比對照一組提高1.28%、5.34%、9.80%、10.39%、1.78%、5.55%、6.80%，表明益生素和合生元加劑均可以提高仔豬機(jī)體細(xì)胞免疫力；并且隨著中草藥的添加比例的增加，T 淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率也呈現(xiàn)增加的趨勢。試驗所用合生元在影響免疫機(jī)能時，主要決定因素在于中藥與益生素混合比例。

IgG、IgM、IgA 是免疫球蛋白中重要的三大類，仔豬階段血清IgA、IgM、IgG 的提高，在一定程度上可以減少仔豬疾病的發(fā)生。試驗結(jié)果顯示：各處理組IgA、IgM、IgG 含量較對照一組均有不同程度的提高，這與王麗輝的研究結(jié)果相一致[6]。這說明試驗所采用的合生元對仔豬血清IgA、IgM、IgG 含量有提高的作用，在生產(chǎn)上即表現(xiàn)為腹瀉率降低，抗病力增強(qiáng)。

補體是特異性免疫的主要組成成分，是類似酶活性的一組蛋白質(zhì)，參與機(jī)體保護(hù)性的免疫應(yīng)答和自身穩(wěn)定功能，協(xié)助抗體和吞噬細(xì)胞殺滅病原微生物和加強(qiáng)細(xì)胞免疫功能，擔(dān)負(fù)機(jī)體非特異性抗感染作用。研究顯示：各組補體C3、C4均高于對照一組，說明試驗所用益生素和合生元均能提高斷奶仔豬血液補體C3、C4含量，并且其含量不隨中草藥添加比例的增減有顯著的變化趨勢。

從試驗整體數(shù)據(jù)可以明顯的看出，添加合生元要比單獨添加益生素的效果更好，表現(xiàn)出中草藥與益生素兩者的協(xié)作性。中藥提取物（寡糖、多糖）能減緩抗原的吸收時間，增加抗原的效價，而提高機(jī)體免疫功能（Newman）[7]；中藥提取物可提高胃腸道IgA 水平，這可能與寡糖競爭性吸附排除病原菌及特異性結(jié)合毒素有關(guān)；益生菌菌體結(jié)構(gòu)、代謝產(chǎn)物和其調(diào)整微生物菌群的作用，可能是益生菌促進(jìn)動物體免疫功能的原因[8]。

4 結(jié)論

合生元對LTR%、血清IgG、IgM、IgA、補體C3、C4水平有顯著提高，即提高了斷奶仔豬的免疫力和抗病力。其中各項免疫指標(biāo)均以0.5%益生素加0.5%中草藥組最優(yōu)。

［1］ 蘇邊.我國研制成功飼用合生素［J］.獸藥與飼料添加劑，2003（8）:46.

［2］ 張軍，劉宇，朱戰(zhàn)波，等. 豬用復(fù)合微生態(tài)制劑制備及保存期內(nèi)活菌數(shù)研究［J］. 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)學(xué)報，2011，23（1）：63-65.

［3］ 李梅，趙桂英，李麗紅，等.寡果糖對雛雞淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率和生產(chǎn)性能的影響［J］.中國獸醫(yī)雜志，2003，39（9）:28-29.

［4］ 王龍昌，周巖民，羅有文，等.合生素對斷奶仔豬生產(chǎn)性能及血液生理生化指標(biāo)的影響［J］. 畜牧與獸醫(yī)，2008，40（4）：26-30.

［5］ 周慶安.劉文剛，鄧留坤，等.動物微生態(tài)制劑及其應(yīng)用［J］.飼料博覽，2003（4）:11-13.

［6］ 王麗輝. 中草藥與益生素對斷奶仔豬生長和免疫作用的影響［J］.福建畜牧獸醫(yī)，2007，29（3）：21-23.

［7］ Savage T F，Cotter P F，Zakrzewska E I. The effect of feeding a mannan-oligosaccharide on immunoglobulins，plasma IgG and bile IgA of Wrolstad mwmale turkeys［J］.Poultry Science，1996，75（1）：54.

［8］ 周圻，張顯花，焦祖武，等.復(fù)方中草藥添加劑對斷奶仔豬血液生化指標(biāo)和激素水平的影響［J］. 湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)，2005（2）：91-93.