李建偉，蘭 天，閆 青，吳 倩，張文杰＊

（吉林大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院1.生物化學(xué)及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中心；2.生理學(xué)系；3.遺傳學(xué)系，吉林 長春130021）

面癱是由各種原因?qū)е碌拿嫔窠?jīng)受損而引起的病癥，表現(xiàn)在面部運(yùn)動(dòng)功能障礙，口角流涎、口眼歪斜等癥狀。面癱的真正原因尚不完全清楚，多數(shù)患者在受到?jīng)鲲L(fēng)吹襲后突然發(fā)病，出現(xiàn)臨床癥狀。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為炎癥、病毒感染或過敏等導(dǎo)致血運(yùn)供給紊亂產(chǎn)生面神經(jīng)水腫而發(fā)生面部癱瘓。常規(guī)治療方法大多使用類固醇激素，改變細(xì)胞生物膜的磷脂成分或膜的穩(wěn)定性起到抗過敏、抗炎、抗水腫作用，使面神經(jīng)水腫消退，恢復(fù)面神經(jīng)功能［1］。本實(shí)驗(yàn)通過建立面神經(jīng)麻痹模型，然后給予不同濃度的士的寧透皮膏劑，觀察其對面神經(jīng)誘發(fā)電位（Antidromic Nerve Evoked Potentials，AEP）和肌電圖（electromyography，EMG）的作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及實(shí)驗(yàn)藥品 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：家兔60只（2.0－2.5kg），由吉林大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。隨機(jī)分為6組，每組10只。對照組、模型組、模型＋0.25%士的寧、模型＋0.5%士的寧、模型＋1%士的寧、陽性對照藥物組（模型＋地塞米松組）。模型建立后，每組每只動(dòng)物每日給予維生素B110 mg、維生素B1250mg。實(shí)驗(yàn)藥品：士的寧膏劑由吉林省天風(fēng)制藥有限責(zé)任公司提供。

1.2 家兔面神經(jīng)麻痹動(dòng)物模型的制作 按文獻(xiàn)［2，3］方法。3%戊巴比妥鈉（1ml／kg）靜脈注射麻醉，分離左側(cè)面神經(jīng)，在距莖乳孔0.5cm處（定位）用小號持針器鉗夾面神經(jīng)總干，滿扣（壓力約5kg，時(shí)間為5s，損傷面寬約1.5mm），結(jié)束后分層縫合肌肉、皮膚，飼養(yǎng)。

面神經(jīng)麻痹動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭苽浜?，給予適量青霉素，縫合切口給予消毒處理，在其靠近中樞端，皮膚外部外敷士的寧濃度為50mg、100mg和200mg（含0.25%、0.5%和1%士的寧成份）膏劑，每天2次，在30℃的室溫下復(fù)蘇，連續(xù)給藥7天后進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)的測定。地塞米松組每日給予1mg／只，肌肉注射。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備 電子刺激器（型號SEN－3201，日本光電公司），信號經(jīng)平均疊加儀（DAT－100 NIHON KOHDEN，日本），示波器（VC－10，日本，濾波10K，時(shí)間常數(shù)0.5）。

1.4 家兔面神經(jīng)逆行動(dòng)作電位（AEP）和神經(jīng)肌電圖（EMG）的測定 刺激電極放置于面神經(jīng)遠(yuǎn)端，經(jīng)刺激隔離器給予15－50V，時(shí)程為100－200ms，頻率1Hz的刺激脈沖。記錄電極置于靠近面神經(jīng)出莖突處，用銀絲電極記錄面神經(jīng)的動(dòng)作電位，信號經(jīng)前置放大器放大（5000倍，濾波lK，時(shí)間常數(shù)0.25）后，用平均疊加儀疊加（疊加64次）信號顯示在示波器，記錄并計(jì)算動(dòng)作電位的幅值及時(shí)程。

同心圓記錄電極放置于口輪匝肌處，接地電極置于耳緣部位，信號經(jīng)平均疊加儀（DAT－100NIHON KOHDEN，日本）、示波器（VC－10，日本，濾波10K，時(shí)間常數(shù)0.5），幅值標(biāo)尺為2mV／cm，時(shí)間標(biāo)尺為2 ms／cm疊加16次信號顯示在示波器，用數(shù)碼照相機(jī)記錄原始數(shù)據(jù)，記錄神經(jīng)肌電圖誘發(fā)電位［2，4］。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 數(shù)值采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，組間比較用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 家兔面神經(jīng)麻痹模型的建立 根據(jù)文獻(xiàn)［5］通過眨眼反射、觸須運(yùn)動(dòng)對面神經(jīng)麻痹評分，誘發(fā)眨眼反射的刺激是用5ml注射器18號針頭距離兔眼3 cm瞬間吹風(fēng)2ml，比較雙側(cè)眨眼反射的頻度、速度和幅度，評分標(biāo)準(zhǔn)：0分為雙側(cè)正常且對稱；1分為比健側(cè)減弱或延緩；2分為消失。觸須運(yùn)動(dòng)的觀察是通過比較雙側(cè)觸須細(xì)微顫搐、節(jié)律性拂動(dòng)的程度進(jìn)行評分：0分為雙側(cè)拂動(dòng)正常且對稱；1分為比健側(cè)減弱；2分為消失。將兩項(xiàng)指標(biāo)的評分相加進(jìn)行面神經(jīng)麻痹的評價(jià)：0、1分為無面神經(jīng)麻痹；2、3分為不完全面神經(jīng)麻痹；4分為完全性面神經(jīng)麻痹。

結(jié)果表明：對照組與假手術(shù)組未出現(xiàn)面神經(jīng)麻痹現(xiàn)象，模型組左側(cè)面神經(jīng)壓榨后，與右側(cè)面相比較，7天后10只家兔均出現(xiàn)2分以上面神經(jīng)麻痹狀態(tài)，表現(xiàn)為左側(cè)眨眼反射、觸須活動(dòng)減弱或消失。同時(shí)，對家兔面神經(jīng)干動(dòng)作電位和口輪匝肌肌電圖記錄的結(jié)果表明，與假手術(shù)組相比較，模型組損傷面神經(jīng)干動(dòng)作電位的幅值從197.00±17.67降低到60.50±16.06明顯減小。肌電圖幅值從373.10±44.19μV降低到150.10±43.21μV，潛伏期從1.79±0.28ms延長到3.60±0.70ms（P＜0.001，n＝10）。上述結(jié)果表明，家兔面神經(jīng)麻痹模型成立［5］。

2.2 士的寧對家兔面神經(jīng)麻痹模型AEP和EMG的作用 實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示，外敷一定濃度士的寧，可使面神經(jīng)誘發(fā)電位（AEP）、肌電圖（EMG）幅值增加，肌電圖（EMG）潛伏期縮短，呈現(xiàn)劑量依賴性，其作用和地塞米松相似。表明士的寧通過修復(fù)受損動(dòng)物面神經(jīng)功能和神經(jīng)肌肉的興奮性，產(chǎn)生治療面神經(jīng)麻痹的作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1和表2。

表2 士的寧對家兔神經(jīng)肌電圖的影響

3 討論

面神經(jīng)是人體中穿過骨管最長的腦神經(jīng)，主要包括運(yùn)動(dòng)神經(jīng)纖維和感覺神經(jīng)纖維，其中大多數(shù)為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)纖維，因此面神經(jīng)主要以運(yùn)動(dòng)功能為主。所以，面神經(jīng)從中樞到末梢之間的任何部位受到損傷，都可以導(dǎo)致部分性或完全性面神經(jīng)麻痹。面神經(jīng)損傷大多在膝狀神經(jīng)節(jié)處，比較靠近面神經(jīng)的中樞側(cè)，一旦受損，面神經(jīng)的變性影響范圍較廣，而且面神經(jīng)骨管緊緊包繞著面神經(jīng)，間隙較窄，受損后對其所支配的運(yùn)動(dòng)功能會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的影響［6］。

面神經(jīng)麻痹早期由于面神經(jīng)水腫、脫髓鞘致神經(jīng)傳導(dǎo)速度減慢，主要表現(xiàn)為面神經(jīng)功能性障礙，使得面神經(jīng)運(yùn)動(dòng)潛伏期延長、波幅降低。伴隨著病情的發(fā)展和電生理的異常改變病情愈加嚴(yán)重。因此，面神經(jīng)AEP和EMG對臨床面癱的定位診斷和預(yù)后可提供可靠的理論依據(jù)，目前是臨床治療面癱常用的生理指標(biāo)。

士的寧（strychnine）又被稱為番木鱉堿，是從馬錢子中提取的一種生物堿，能選擇性的興奮脊髓，增強(qiáng)骨骼肌的緊張度。具有興奮脊髓反射和抑菌作用，能直接擴(kuò)張外周血管，提高動(dòng)物耐氧能力并有抑菌作用，臨床上通常被用于面癱的治療。士的寧進(jìn)入體內(nèi)以后，可以興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)的某些部位，對脊髓產(chǎn)生興奮作用，提高神經(jīng)肌肉的反射功能，增加肌肉緊張度。現(xiàn)有研究報(bào)道，靜脈注射士的寧也可穿透血腦屏障，直接對中樞系統(tǒng)產(chǎn)生作用［7，8］。

本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ陀^察了士的寧對面癱的作用機(jī)制，在一定劑量范圍內(nèi)外敷士的寧，0.5%到1%范圍的士的寧可使面癱實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型組的動(dòng)作電位的幅值顯著增加，肌電圖電位的幅值明顯增加，潛伏期顯著縮短。其作用明顯優(yōu)于激素類藥物地塞米松的作用，提示士的寧可能通過某些途徑，修復(fù)受損面神經(jīng)，改善面神經(jīng)肌肉的傳導(dǎo)功能，恢復(fù)面部神經(jīng)肌肉的興奮性，產(chǎn)生治療面神經(jīng)麻痹的作用。這些結(jié)果為士的寧治療面神經(jīng)麻痹的作用機(jī)理提供了實(shí)驗(yàn)室的依據(jù)。

［1］陸海泉，顧月萍，湯善發(fā).大劑量地塞米松遞減法治療Bell面癱64例［J］.上海鐵道大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，21（3）：83.

［2］宣麗穎，張文杰，曹玉鳳，等.士的寧對豚鼠實(shí)驗(yàn)性面癱的治療作用［J］.內(nèi)蒙古民族大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2010，25（4）：430.

［3］劉 穩(wěn)，高志強(qiáng).周圍性面神經(jīng)麻痹的動(dòng)物模型［J］.國際耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2006，30（3）：138.

［4］彭更生，余青云.特發(fā)性面癱肌電圖及面神經(jīng)運(yùn)動(dòng)傳導(dǎo)速度的觀察［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志，2000，26（3）：186.

［5］劉 穩(wěn)，高志強(qiáng)，神 平，等.單純皰疹病毒性面神經(jīng)炎的動(dòng)物模型［J］.中華耳鼻咽喉頭頸外科雜志，2006，41（1）：17.

［6］葉愛萍.面神經(jīng)麻痹肌電圖及面神經(jīng)傳導(dǎo)速度的觀察［J］.中國臨床康復(fù)，2003，7（1）：106.

［7］蔡寶昌，徐曉月，潘 揚(yáng).馬錢子生物堿在大鼠體內(nèi)的組織分布［J］.中國藥理學(xué)通報(bào)；2004，20（4）：421.

［8］魏 寧，張松偉.馬錢子的研究進(jìn)展［J］.航空軍醫(yī)，2004；32（3）：131.