崔蕊蕊，丁 中，崔留欣，楊如璞，席 豫，程學(xué)敏，任麗君，段麗菊，后加祥，巴 月#

1)鄭州大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院環(huán)境衛(wèi)生學(xué)教研室 鄭州 450001 2)開封市疾病預(yù)防控制中心地方病科 開封 475000 3)通許縣疾病預(yù)防控制中心地方病科 通許 475400

高氟可影響精子數(shù)量和質(zhì)量，破壞睪丸、附睪、前列腺的結(jié)構(gòu)，進(jìn)而影響雄性生殖能力[1-4]。研究[5-6]發(fā)現(xiàn)，氟能通過影響動(dòng)物血清下丘腦-垂體-性腺軸多種激素水平，表現(xiàn)一定的生殖損傷和內(nèi)分泌干擾作用。雄激素結(jié)合蛋白(androgen binding protein，ABP)作為睪丸支持細(xì)胞分泌的一種重要蛋白質(zhì)，具有精細(xì)調(diào)節(jié)生精過程的功能[7]，可促進(jìn)精子的生成和成熟。由于其功能上的重要性，ABP常作為睪丸支持細(xì)胞功能狀況的標(biāo)志物之一[8]。已有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)[9]證實(shí)氟可損害大鼠睪丸支持細(xì)胞。但由支持細(xì)胞分泌的ABP是否受到影響，目前少有報(bào)道。該研究通過測(cè)定不同氟暴露水平人群血清ABP和睪酮(testosterone,T)水平，探討氟暴露對(duì)成年男性 ABP的影響，為研究機(jī)體ABP在性激素調(diào)控中的作用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1調(diào)查點(diǎn)的選擇在河南省開封市某縣選擇7個(gè)村莊為調(diào)查區(qū)，其中地方性氟病村2個(gè)﹑實(shí)施降氟改水工程村2個(gè)﹑對(duì)照村3個(gè)；所有調(diào)查地區(qū)經(jīng)濟(jì)水平、自然條件、農(nóng)作物種類、生活習(xí)慣、人口構(gòu)成基本相同，且均無工業(yè)氟污染。

1.2調(diào)查對(duì)象的選擇整群抽取所選調(diào)查點(diǎn)18～50歲本地出生男性，排除有職業(yè)氟接觸、長期在外打工、患有消耗性疾病、長期或近期服用鈣制劑者，納入對(duì)象對(duì)照組175人、改水組75人、高氟組65人。

1.3標(biāo)本采集在各個(gè)村莊采取水樣：對(duì)照區(qū)采自來水(對(duì)照組)16份，高氟區(qū)采深井水(高氟組)13份，改水區(qū)采自來水(改水組)8份；征得調(diào)查對(duì)象同意并簽署知情同意書后，采集晨尿及空腹靜脈血用于標(biāo)志物測(cè)定。尿液-20 ℃保存待測(cè)，血液當(dāng)天分離血清后-80 ℃低溫保存。

1.4標(biāo)志物測(cè)定水氟測(cè)定步驟嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法(離子選擇電極法，WS/T106-1999)，采用標(biāo)準(zhǔn)加入法測(cè)定。每個(gè)樣品平行測(cè)定2次，相對(duì)誤差均小于2%，變異系數(shù)為0.4%～2.9%。尿氟測(cè)定步驟嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)方法(離子選擇電極法，WS/T89-1996)，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定。血清ABP測(cè)定采用ELISA法，試劑盒由美國R&D公司提供，全自動(dòng)酶標(biāo)儀由美國伯樂公司提供。血清T測(cè)定采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法，化學(xué)發(fā)光儀及測(cè)定試劑盒均由鄭州安圖公司提供。測(cè)定設(shè)置平行樣，取均值，并按10%～15%的比例抽樣復(fù)檢。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS 12.0分析數(shù)據(jù)。3組間水氟、尿氟及血清ABP、T水平比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關(guān)系采用多重線性回歸方法進(jìn)行分析。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 3組生活飲用水中氟水平比較結(jié)果見表1。由表1可知，3個(gè)調(diào)查點(diǎn)水氟水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且高氟組飲用水氟水平分別高于改水組和對(duì)照組。

表1 3組生活飲用水中氟水平比較 mg/L

F=12.289，P<0.001；*：與高氟組比較，P均<0.05。

2.2 3組尿氟、血清ABP及T水平比較結(jié)果見表2。由表2可知，3組尿氟水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3組血清ABP水平比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，且高氟組低于對(duì)照組和改水組。3組血清T水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2 3組尿氟、血清ABP及T水平比較

*:3組間兩兩比較，P均<0.05；#：與高氟組比較，P均<0.05。

2.3血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關(guān)系結(jié)果見表3。由表3可知，在對(duì)照組和改水組中T與年齡呈負(fù)相關(guān)。

表3 血清T、ABP與年齡及尿氟水平的關(guān)系

3 討論

3.1氟暴露對(duì)男性血清ABP水平的影響ABP可以緩沖管內(nèi)雄激素波動(dòng)，使雄激素恒定釋放，減少波動(dòng)，利于精子生成；其次，ABP與T結(jié)合后可隨睪丸液到達(dá)附睪，促進(jìn)精子的成熟，ABP的缺乏不但影響精子的數(shù)量和質(zhì)量，而且ABP正常合成與維持體內(nèi)內(nèi)分泌的平衡和生殖功能密切相關(guān)[10-12]。由于其功能上的重要性，ABP常作為睪丸支持細(xì)胞功能狀況的標(biāo)志物之一。研究結(jié)果顯示：高氟組ABP水平低于對(duì)照組和改水組，提示長期飲水氟暴露可能導(dǎo)致ABP水平降低。ABP作為一種分泌性蛋白質(zhì)，其合成之后要進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)進(jìn)行多肽鏈的折疊及修飾，然后轉(zhuǎn)運(yùn)到細(xì)胞外發(fā)揮作用。氟含量增高可損傷內(nèi)質(zhì)網(wǎng)而引起氧化應(yīng)激[13-14]，影響ABP的折疊和修飾過程，可能是ABP水平降低的重要原因。多個(gè)研究[15-16]發(fā)現(xiàn)，重金屬等可對(duì)ABP表達(dá)產(chǎn)生影響。該研究結(jié)果提示高氟可影響ABP水平。盡管改水組血清ABP水平也低于對(duì)照組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，提示這種影響是可逆的，當(dāng)脫離了氟暴露環(huán)境，其損傷可能修復(fù)，且這種修復(fù)需要一定時(shí)間。

3.2氟暴露對(duì)男性血清T水平的影響間質(zhì)細(xì)胞分泌的T具有廣泛的生理作用，例如：促進(jìn)和維持精子發(fā)生成熟,刺激附屬性器官發(fā)育，促進(jìn)雄性副性征的出現(xiàn)并維持其正常狀態(tài)。還有研究[17]發(fā)現(xiàn)，血清T可以作為判斷嚴(yán)重創(chuàng)傷、顱腦損傷情況和預(yù)后的指標(biāo)之一,T升高可使重構(gòu)性心臟病理反應(yīng)惡化。T水平主要受下丘腦和垂體分泌的促黃體生成素(LH)和促卵泡成熟激素調(diào)控。研究[18]發(fā)現(xiàn), 高氟可使血清T水平降低、LH水平上升, 且與氟含量呈劑量-反應(yīng)關(guān)系。陳培忠等[19]發(fā)現(xiàn), 當(dāng)給予大鼠氟化鈉28 d后血漿T水平降低。該研究結(jié)果顯示3組血清T水平比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，究其原因，可能是上述研究大多是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)或所調(diào)查地區(qū)水氟水平遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于該次調(diào)查區(qū)域水氟水平，在水氟水平較高情況下，可能造成睪丸器質(zhì)性病變，從而產(chǎn)生T隨著尿氟水平的增加而降低的現(xiàn)象[7]。該次調(diào)查區(qū)域水氟水平可能還未使所調(diào)查人群血清T含量產(chǎn)生顯著的變化；其次人體血清T含量受下丘腦-垂體-性腺軸系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，多個(gè)正、負(fù)反饋通路可能對(duì)T的合成和分泌產(chǎn)生綜合影響。在對(duì)照組和改水組中血清T與年齡呈負(fù)相關(guān)，符合人體正常生理情況[20-21]；但高氟組沒有發(fā)現(xiàn)這種相關(guān)關(guān)系，提示氟暴露對(duì)男性血清T產(chǎn)生一定影響。

綜上所述，環(huán)境氟暴露可能影響男性ABP水平。高氟組人群血清ABP水平明顯低于對(duì)照組和改水組，提示氟可能通過影響ABP水平表現(xiàn)其生殖內(nèi)分泌干擾作用。

致謝 感謝參與現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查工作的鄭州大學(xué)李仕群、李萍、唐春宇以及開封市疾病預(yù)防控制中心和通許縣疾病預(yù)防控制中心地方病科的工作人員；感謝所有參與該項(xiàng)研究的調(diào)查對(duì)象。

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