趙 焱 劉 然 張桂林 孫 響 劉曉明 李海龍 鄭 重

(新疆軍區(qū)疾病預防控制中心，烏魯木齊 830011)

人嗜吞噬細胞無形體病(Human granulocytic anaplasmosis，HGA)是一種由嗜吞噬細胞無形體Anaplasmaphagocytophilum感染導致的蜱傳疾病，人、家畜等哺乳動物普遍易感。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、寒戰(zhàn)、疲乏、肌痛等流感樣癥狀，偶見重癥與死亡病例的報告(Zhangetal., 2013)。HGA廣泛流行于北美、歐洲大陸，隨著我國近些年對HGA危害的逐漸重視，通過分子流行學、血清流行病學研究以及對病原的分離培養(yǎng)，現(xiàn)已明確HGA在我國多個省份亦存在廣泛流行(Zhanetal., 2010；張秀春等，2012)。我國東北、中東部、人群中無形體病血清陽性率為2.77%～26.7%(丁大偉等, 2010；Zouetal., 2011)。目前HGA在西北地區(qū)的流行病學數(shù)據(jù)還較為缺少(Yangetal., 2013)。

新疆生態(tài)環(huán)境多樣，蜱種群數(shù)量豐富；尤其是春夏季農(nóng)林牧業(yè)生產(chǎn)活動中人群、家畜頻繁進出蜱類棲息地，為蜱傳疾病在自然界中的蓄存和人群中傳播創(chuàng)造了適宜的條件。新疆北部伊犁地區(qū)人群與牲畜血清中檢出嗜吞噬細胞無形體特異性抗體(范德生等，2011)。本課題組從新疆南部和碩地區(qū)的亞洲璃眼蜱與短小扇頭蜱體中均檢出嗜吞噬細胞無形體(孫響等，2013)。上述證據(jù)提示HGA在新疆地區(qū)可能存在更為廣泛流行。為進一步明確新疆農(nóng)林牧從業(yè)人群中HGA感染與流行現(xiàn)況，本課題組于2010年4月至2011年7月，對和碩、石河子農(nóng)牧區(qū)和博樂林區(qū)3個不同生態(tài)環(huán)境中工作生活的人群進行了HGA的血清流行病學調(diào)查。

1 材料與方法

1.1 標本采集

采用無菌方法從肘靜脈采集5 mL全血，離心分離血清，分裝后-70℃保存。

1.2 間接免疫熒光檢測

采用WHO推薦的間接免疫熒光檢測(IFA)法檢測血清抗體。抗原片和陽性對照由中國疾病預防控制中心傳染病控制所無形體研究室制備。抗原片采用菌株為是嗜吞噬細胞無形體Webster 株。嗜吞噬細胞無形體接種的兔血清作為檢測陽性對照。二抗為FITC標記的羊抗人IgG(中杉金橋)。血清樣本用磷酸鹽緩沖液(PBS，pH7.2)倍比稀釋至1∶64，取10 μL樣本加于抗原片小孔上，37℃孵育30 min。用PBS漂洗3次。晾干后加二抗(1∶100稀釋于0.02%伊文思藍溶液)10 μL，37℃孵育30 min，PBS漂洗晾干后滴加甘油封片，置于熒光顯微鏡(Nikon)下觀察。IgG≥1∶64判為陽性。陽性樣本再倍比稀釋至1∶128、1∶256、1∶512再進行檢測。

1.3 流行病學調(diào)查

采集血液樣本時，告知研究目的并按要求填寫登記表，詳細記錄被采集者的居住地、年齡、性別、民族、職業(yè)、蜱叮咬史等。

1.4 統(tǒng)計學分析

采用SPSS15.0軟件，結(jié)果通過χ2檢驗確定組間陽性率差異，P<0.05有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 不同地區(qū)陽性率

三地區(qū)共檢測血清442份，陽性血清192份，平均陽性率43.4%，其中抗體滴度1∶128的4份、1∶256的7份、1∶512的 63份，詳見表1。經(jīng)分析三地區(qū)人群陽性率有統(tǒng)計學意義(χ2=13.524，P=0.001)。

表1 不同地區(qū)人群血清無形體抗體檢測結(jié)果Tab.1 Antibody titer of human granulocytic anaplasmosis in different area

2.2 人口學分布

2.2.1年齡分布：每10歲為一年齡組，共分7個年齡組，其中最小年齡為15歲，最大為76歲。各年齡組均有感染，感染率最高的是20至30歲組(51.7%)，較低的是<19歲組(35.4%)和60～70歲年齡組(34.8%)，見表2。經(jīng)統(tǒng)計學分析，各年齡組間陽性率無統(tǒng)計學意義(χ2=8.023，P=0.236)。

表2 三個地區(qū)無形體抗體人口學分布結(jié)果Tab.2 Demographic distribution of HGA antibody in three area

2.2.2性別分布：受檢男性313人，陽性140人，陽性率45.0%，受檢女性131人，陽性53人，陽性率40.4%，見表2。經(jīng)分析性別組間陽性率無統(tǒng)計學意義(χ2=0.778，P=0.378)。

2.2.3民族分布：檢測442人，其中漢族153人，陽性者77人，陽性率50.3%；哈薩克族163人，陽性者63人，陽性率38.7%；蒙古族23人，陽性者13人，陽性率56.5%；維族103人，陽性者40人，陽性率38.8%，見表2。經(jīng)分析不同民族間感染率無統(tǒng)計學意義(χ2=6.869，P=0.076)。

2.2.4職業(yè)分布：根據(jù)人群蜱暴露幾率大小，林業(yè)工人、農(nóng)牧民感染率為70.3%～55.2%；機關工作人員、牧區(qū)學生感染率分別為22.2%與35.9%，見表2。經(jīng)分析不同職業(yè)人群感染率有統(tǒng)計學意義(χ2=49.129，P=0.000)。

2.3 生境分布

根據(jù)海拔、生境類型和植被情況可將調(diào)查地區(qū)分為3種生態(tài)景觀：荒漠、荒漠草地及農(nóng)田綠洲，主要分布在和碩地區(qū)，海拔多在1000 m以下，土地干旱，植被覆蓋度10%～20%，人嗜吞噬細胞無形體病陽性率為42.1%；山地草原、荒漠草原草地，主要分布在石河子南山地區(qū)以及博樂夏爾希里自然保護區(qū)低海拔區(qū)域，海拔多在1 200 m以下，植被覆蓋度30%～50%，人嗜吞噬細胞無形體病陽性率為36.2%；山地森林主要分布在博樂夏爾希里自然保護區(qū)，海拔在1400～1800 m之間，人嗜吞噬細胞無形體病陽性率為59.4%，詳見表3。經(jīng)分析三種生境陽性率有統(tǒng)計學意義(χ2=14.397，P=0.001)。

表3 不同生境人群無形體抗體分布結(jié)果Tab.3 HGA antibody distribution in different environments

3 討論

本研究通過對嗜吞噬細胞無形體特異性IgG抗體的檢測，獲得和碩、石河子、博樂3個地區(qū)人群IgG血清陽性率分別為42.6%、35.2%與56.0%。上述感染率顯著高于安徽(2.77%)、天津(8.8%)農(nóng)村普通人群的感染率(Zhangetal., 2008)，福建北部林區(qū)(17.1%)(林光宇等，2008)，山東沂源縣(26.7%)(張麗娟等，2009)以及山西(25%)(Zhangetal., 2009)等地人群感染率。較高的血清陽性率主要與新疆地區(qū)蜱的分布、密度、蜱種群中無形體的感染率存在一定關系。另外，本次研究中受調(diào)查人群的住宿或野營環(huán)境中的衛(wèi)生條件普遍較差，蜱孳生較多；對蜱傳疾病缺少防護意識，較少采取有效的防護措施，受蜱叮咬后由于移除不夠及時，延長了感染的窗口期，也是造成血清陽性率高的原因之一。

致謝：在本研究工作中承蒙中國疾病預防控制中心傳染病控制所無形體研究室張麗娟老師的大力支持，謹此感謝！