肖憬 詹翔 桑圣剛 陳慧

白介素-8（IL-8）是標志亞臨床性炎癥反應程度的重要炎癥介質(zhì)。IL-10是最主要的抑制性細胞因子之一。近年來研究發(fā)現(xiàn)，它們與2型糖尿病（T2DM）的發(fā)生發(fā)展有關(guān)聯(lián)[1]。糖尿病腎?。―N）是糖尿病患者致死的重要原因，其發(fā)病率約20%～30%左右，故早期診治尤為重要。本文通過了解T2DM各期腎病的尿微量白蛋白水平與血清IL-8和IL-10變化之間的關(guān)系，探討IL-8和IL-10在糖尿病腎病發(fā)生發(fā)展中的意義[2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年12月-2010年3月在筆者所在醫(yī)院內(nèi)分泌門診及病房收治的符合1999年WHO糖尿病診斷標準的2型糖尿病患者70例（男42例，女38例），根據(jù)24 h尿白蛋白排泄率（UAER）將其分為三組：（1）無蛋白尿（DM）組20例，男11例，女9例，24 h尿白蛋白排出率為正常，UAER<20μ g/min；（2）微量白蛋白尿（DN1）組 30例，男19 例，女 11 例，UAER：20～200 μ g/min；（3）臨床蛋白尿（DN2）組20例，男12例，女8例， UAER>200μ g/min。另以同期健康體檢者30例作為正常對照組。以上各組均除外以下情況：其他內(nèi)分泌疾??；心、肝、肺、腦疾病；惡性腫瘤、自身免疫性疾病或結(jié)締組織疾??；感染及其他腎臟疾??；近期創(chuàng)傷、手術(shù)史（6個月內(nèi)）；在1個月內(nèi)未發(fā)生糖尿病酮癥酸中毒及其他急性并發(fā)癥。4組患者性別、年齡、病程、體重指數(shù)、血壓等參數(shù)經(jīng)檢驗比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 所有對象均在清晨空腹抽取不抗凝靜脈血3 ml，采血前避免劇烈活動及應激等，血標本靜置1 h左右（室溫），3000 r/min離心10 min后分離血清，分裝保存于-20 ℃待測。

1.2.2 IL-8、IL-10檢測 采用放射免疫分析。選用美國RnD公司生產(chǎn)的試劑盒，操作按說明書，并進行質(zhì)量控制，專人操作，自動打印結(jié)果。

1.2.3 24 h尿蛋白測定 收集24 h尿，采用磺柳酸比濁法測定24 h尿白蛋白含量，儀器為721分光光度計。

1.3 統(tǒng)計學處理 應用SPSS 13.0軟件進行分析，計量資料以（±s）表示，各組間均數(shù)比較采用t檢驗，IL-8、IL-10與DN關(guān)系的分析采用多因素逐步Logistic回歸分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

各組糖尿病患者IL-8和IL-10水平及相關(guān)性分析、IL-8水平與BUN、Cr、UAER的相關(guān)性分析以及各組糖尿病患者IL-10水平與BUN、Cr、UAER的相關(guān)性分析見表1、2、3。

表1 各組糖尿病患者IL-8和IL-10水平及相關(guān)性分析（±s）

表1 各組糖尿病患者IL-8和IL-10水平及相關(guān)性分析（±s）

組別 IL-8（pg/ml） IL-10（pg/ml） IL-8與IL-10的相關(guān)系數(shù)DM 組 3.79±1.26** 5.00±2.16** 0.25 DN1組 5.91±3.16**△△ 7.58±2.67**△△ 0.39 DN2組 7.54±4.70**△△# 10.38±3.93**△△# 0.73對照組 2.51±1.04 5.07±1.32 0.11

表2 各組糖尿病患者IL-8水平與BUN、Cr、UAER的相關(guān)性分析

表3 各組糖尿病患者IL-10水平與BUN、Cr、UAER的相關(guān)性分析

糖尿病3組比較對照組IL-8及IL-10水平均明顯升高，比較差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；糖尿病3組組間比較：DN2>DN1>DM，多元線性逐步回歸表明，IL-8、IL-10與BUN均無相關(guān)性，但是與Cr和UAER均呈顯著的正相關(guān)性。

3 討論

DN是T2DM的一種嚴重的慢性并發(fā)癥，有關(guān)DN的發(fā)生機理有不同的學說，但炎性細胞因子在DN的發(fā)病中起重要作用[3]，炎癥因子可導致DN的發(fā)生，并在病情進展的整個過程中起重要作用[4]。IL-8主要由單核-巨噬細胞產(chǎn)生的一種炎性因子。其作用于嗜中性粒細胞趨化、脫粒、釋放溶酶、加強炎癥防護、促進T細胞趨化游走、加強免疫反應等[5]。本研究結(jié)果顯示：在糖尿病組中血清IL-8水平明顯高于對照組，并隨糖尿病腎病的嚴重程度增加而增加，且與尿白蛋白排泄率及血肌酐呈正相關(guān)。這表明IL-8可能參與了糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展，提示2型糖尿病是一種慢性炎癥反應。其升高的原因可能是：高糖可刺激刺激單核巨噬細胞分泌IL-8，IL-8作為炎性因子可誘導中性粒細胞激活，使細胞脫顆粒，釋放炎性介質(zhì)，從而發(fā)生炎性反應[6]；IL-8還可刺激平滑肌細胞移動和增殖，在局部形成損害，導致增加白細胞或血小板對內(nèi)皮細胞的黏附性和通透性，促進血凝，并誘導產(chǎn)生血管活性因子等使血管阻力增加，從而使腎血管內(nèi)皮功能受損，并且IL-8可刺激血管內(nèi)皮因子的釋放，使腎系膜細胞增生，腎小球血管通透性增強，導致蛋白尿的發(fā)生和發(fā)展，促進腎小球硬化，從而加速了糖尿病腎病的發(fā)展[4]。IL-10主要由Th2細胞、活化的肥大細胞、單核巨噬細胞、上皮細胞等多種細胞產(chǎn)生[7]。它是一種細胞因子合成抑制因子，處于機體免疫調(diào)節(jié)的中心環(huán)節(jié)。本研究結(jié)果顯示在糖尿病非腎病組中，IL-10的含量與正常對照組略有增高，但是差異不明顯，這表明高糖可能不是刺激IL-10產(chǎn)生的原因。同時研究結(jié)果顯示：IL-10水平是隨著糖尿病腎病的發(fā)展而逐漸升高的，與血肌酐和尿蛋白排泄率呈正相關(guān)，說明IL-10可能參與了DN的形成及病情的進展[8]。本實驗結(jié)果可以說明，IL-10的水平在一定程度上可以反映腎小球疾病的增生程度。根據(jù)結(jié)果，初步分析原因為：隨著糖尿病病程的發(fā)展、血管內(nèi)皮細胞受損加重，細胞因子釋放增加，從而血管痙攣，內(nèi)皮細胞缺血缺氧，從而導致血小板活化程度增高，釋放入血的相關(guān)因子活度增加。IL-10在腎小球?qū)觾?nèi)皮細胞表達，是系膜細胞生長因子，可促進系膜細胞的增生，通過自分泌的方式降低血管內(nèi)皮生成因子的合成[9]，同時調(diào)節(jié)TH1細胞的反應，抑制血管通透因子的活性，從而導致了腎小球濾過率降低，尿蛋白量增加?？傊錓L-10的增高在一定程度上說明了糖尿病腎病和炎癥有關(guān)。

相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)IL-8和IL-10呈正相關(guān)，并且隨著病情的發(fā)展相關(guān)性越顯著，這進一步說明了在糖尿病腎病的發(fā)生和發(fā)展中IL-8和IL-10可能起到了一定的協(xié)同作用。總之，本實驗表明了2型糖尿病患者存在不同程度的細胞因子水平的紊亂，同時細胞因子可能參與糖尿病腎病的發(fā)生與發(fā)展[10]。因此，檢測糖尿病腎病患者血清中IL-8、IL-10為臨床上研究針對IL-8、IL-10方面拮抗藥物及為早期診斷治療DN提供了一條新的途徑和理論依據(jù)。

[1]Pradhan A D，Manson J E，Rifai N，et al.C-reactive protein，interleukin 6，and risk of developing type 2 diabetes mellitus[J].JAMA，2001，286（3）：327-334.

[2]趙星，方潔.不同糖耐量人群血漿IL-18水平與胰島素抵抗的相關(guān)性[J].貴陽醫(yī)學院學報，2009，34（4）：399-401.

[3]姚君，王立生，王建堯，等.重組人白介素10對低氧條件下人單核細胞凋亡變化規(guī)律的影響[J].廣東醫(yī)學，2011，32（1）：40-42.

[4]賀正華，肖目張，郭曲練.過表達白介素-10減少脂多糖所致大鼠星形膠質(zhì)細胞炎癥介質(zhì)的釋放[J].中南大學學報（醫(yī)學版），2011，36（5）：392-397.

[5]任亮，顧濤.鼻咽癌患者血清TGF-β1、IL-8水平和淋巴細胞亞群水平測定的臨床意義[J].放射免疫學雜志，2006，19（5）：372.

[6]Larsen C G，Anderson A O，Appella E，et al.The neutrophilactivatingprotein （NAP-1） is also chemotactic for T lymphocytes [J].Science，1989，243（4897）：1464-1466.

[7]薛超，朱妙珍.白細胞介素8對培養(yǎng)的人類腎小球系膜細胞增殖的影響[J].中華腎臟病雜志，200l，17（3）：188.

[8]Vanhille P.The diabetic patient with renal insufficiency[J].DiabetesMetab，2000，26（Suppl 4）：67-72.

[9]李秀鈞，鄔云紅.糖尿病是一種炎癥性疾病[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志，2003，19（4）：251-253.

[10]秦文敬.糖尿病腎病患者與相關(guān)細胞因子水平的變化[J].放射免疫學雜志，2005，18（3）：190-191.