宋李玲，李瑞珺，劉倩倩，林新春*

(1.浙江農(nóng)林大學 亞熱帶森林培育國家重點實驗室培育基地，浙江 臨安 311300;2.浙江省臨安市林業(yè)局，浙江臨安311300)

棉花竹(Fargesia fungosa)屬禾本科Poaceae竹亞科Bambusoideae箭竹屬Fargesia，分布于四川西南部、貴州西部和云南東北部海拔1 800～2 700 m的地區(qū)［1］。竹筍營養(yǎng)豐富，可供食用;竿材篾質富韌性，最適宜編織農(nóng)具、家具，是優(yōu)良的筍材兩用竹種。傳統(tǒng)的繁殖方法主要是移竹、埋鞭、竹枝扦插等，不僅勞動強度大、消耗竹種多，且繁殖系數(shù)低，而用組織培養(yǎng)進行快繁具有繁殖速度快、系數(shù)高、體積小、便于攜帶等優(yōu)點［2－3］。利用組織培養(yǎng)技術，已經(jīng)成功地進行了菲白竹(Sasa fortunei)、勃氏甜龍竹(Dendrocalamus brandisii)、花葉花稈綠竹(Bambusa oldhamii f.variegata)［4－18］等多個屬的竹種的快繁研究。但目前國內(nèi)外尚無有關箭竹屬組織培養(yǎng)方面的報道。箭竹屬竹種是大熊貓的主食竹種［19］，研究該類竹種的快速繁殖技術可為大熊貓?zhí)峁┦澄锉Ｕ希瑢ζ浞N群的發(fā)展具有重要意義。本研究試圖通過對棉花竹試管快繁技術的研究，為該竹種的擴繁和產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)提供技術支撐，也為箭竹屬其他竹種的組織培養(yǎng)提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為采自云南的棉花竹成熟種子。

1.2 試驗方法

1.2.1 初代培養(yǎng) 將棉花竹的種子剝?nèi)ネ鈿ず?圖1a)，于自來水下沖洗10～12 h，再用2.5%的NaClO溶液真空抽濾30 min，無菌水沖洗5次，在體視顯微鏡下剝離種胚，接種于不添加任何激素的MS培養(yǎng)基上。置于暗柜中培養(yǎng)3 d后，再進行光照培養(yǎng)。將誘導出的長勢一致的芽(圖1b)作為增殖試驗的材料。

1.2.2 增殖培養(yǎng) 用于棉花竹增殖培養(yǎng)的基本培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基，分別添加不同質量濃度的NAA(0，1，3 mg/L)和BA(0，1，3，10 mg/L)，共12個處理。選取高度約4 cm的長勢一致的叢生芽為試驗材料，每3個芽為1叢，1叢/管，13管/處理。培養(yǎng)4周后，觀察芽的增殖和生長情況。

1.2.3 生根培養(yǎng) 選取高度約4 cm的長勢一致的叢生芽接種于添加了不同質量濃度IBA(0，1，3，10 mg/L)的1/2 MS培養(yǎng)基中，共4個處理，每3個芽為1叢，1叢/管，15管/處理。培養(yǎng)4周后，觀察生根數(shù)和生長情況。

1.2.4 試管苗移栽 經(jīng)煉苗后的棉花竹試管苗用溫水(30℃)洗凈根部殘余的培養(yǎng)基后，移栽于泥炭、蛭石、珍珠巖配制比例為1∶1∶1的混合基質中。移栽時需進行套袋，1周后開始剪袋，2～3周后完全脫袋。1個月后統(tǒng)計移栽成活率。

1.2.5 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)溫度為(25 ±2)℃，光周期為16 h/8 h，光照強度為2 400 lx。

2 結果與分析

2.1 不同質量濃度的BA與NAA組合對棉花竹芽增殖的影響

不同植物激素組合對棉花竹芽的增殖產(chǎn)生不同的影響。從表1可看出，當BA質量濃度不變時，隨著NAA質量濃度的增加，芽的增殖系數(shù)大體呈下降的趨勢;當NAA質量濃度不變時，隨著BA質量濃度的增加，芽的增殖系數(shù)大致呈上升的趨勢。在分別添加3 mg/L和10 mg/L BA的培養(yǎng)基中，棉花竹芽的增殖系數(shù)較大，與其他處理差異顯著。但在BA濃度為10 mg/L時，棉花竹葉片發(fā)黃，少數(shù)褐化甚至死亡，對芽的生長不利;在添加3 mg/L BA時，葉片鮮綠，新生芽生長旺盛，不易褐化，且增殖系數(shù)達到最大值3.77(圖1c)。綜合考慮上述各因素，棉花竹的最佳增殖培養(yǎng)基為MS+3 mg/L BA。

表1 不同植物激素組合對棉花竹芽增殖的影響Tab.1 Effect of different hormone combinations on buds multiplication of Fargesia fungosa

2.2 不同質量濃度的IBA對棉花竹生根誘導的影響

用4個不同質量濃度的IBA對棉花竹進行生根誘導，結果(表2)表明:棉花竹生根較容易，在不添加IBA的1/2 MS培養(yǎng)基中生根率已達93%，但根較纖細。隨著IBA質量濃度的增加，根的數(shù)量逐漸增多。但是，在添加10 mg/L IBA的培養(yǎng)基中誘導出的根粗短、較膨大，為畸形根，且植株發(fā)黃，長勢較差。在添加3 mg/L IBA的培養(yǎng)基中，生根率達100%，生根系數(shù)較大，根較粗壯，植株生長較好(圖1d)。綜上所述，棉花竹最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+3 mg/L IBA。

表2 不同質量濃度的IBA對棉花竹生根誘導的影響Tab.2 Effect of different concentrations of IBA on roots induction of Fargesia fungosa

2.3 試管苗移栽

將生根的棉花竹試管苗在強光下煉苗1周，移栽入泥炭、蛭石、珍珠巖配制比例為1∶1∶1的混合基質中，1個月后統(tǒng)計其成活率達98%(圖1e)。

圖1 棉花竹的離體快速繁殖Fig.1 In vitro rapid propagation of Fargesia fungosa

3 結論與討論

竹類植物由于其開花周期長且難以預測，使得對其育種及遺傳改良工作較難。通過對獲得的棉花竹種子進行組織培養(yǎng)，運用試管微繁殖技術，可以對性狀優(yōu)良的無性系進行快速繁殖，這對具有優(yōu)良性狀的種苗在工廠化育苗方面起到重要作用。

通過對棉花竹試管快繁技術的研究，初步得到以下結論:棉花竹叢生芽增殖階段的最佳培養(yǎng)基為MS+3 mg/L BA;最佳生根培養(yǎng)基為1/2 MS+3 mg/L IBA。研究認為，一定質量濃度的BA可促進芽的增殖，但過高濃度可能會抑制植株生長，甚至褐化致死，這與張鐵等［7，14，20］的研究結果一致。

棉花竹生根較容易，在芽誘導階段即可自發(fā)生根，在進行生根處理的第3天均可生根。而其在不添加任何激素的1/2 MS中誘導的根較纖細，不利于移栽成活。在培養(yǎng)基中添加不同質量濃度的IBA時，試管苗生根系數(shù)隨著其質量濃度的增加而增大。但濃度過高時，產(chǎn)生的根較短且膨大，為畸形根，植株長勢較差，這與張有珍等［5］的研究結果相同。

本實驗的外植體為棉花竹種子，但多數(shù)竹類植物種子的獲取相對較難。因而，對以其幼嫩莖尖、幼枝節(jié)段為外植體進行快繁的實驗有待于進一步研究。

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