廖秀芳 林宇靜 曹婉維

CyclinD1、Cdk6在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)與臨床意義

廖秀芳 林宇靜 曹婉維

目的探討CyclinD1、Cdk6在子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)與臨床意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)，檢測30例正常子宮內(nèi)膜及30例不典型增生子宮內(nèi)膜和45例子宮內(nèi)膜腺癌中的CyclinD1與Cdk 6蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果CyclinD1與Cdk 6在不典型增生子宮內(nèi)膜和子宮內(nèi)膜腺癌中的表達(dá)率與正常子宮內(nèi)膜組相比有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，與子宮內(nèi)膜腺癌的分化程度，Dukes分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系 (P<0.05)。結(jié)論CyclinD1與Cdk 6蛋白的過度表達(dá)可能在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤中起重要作用，對判斷子宮內(nèi)膜腺癌的預(yù)后有一定的臨床意義。

子宮內(nèi)膜腺癌；CyclinD1；Cdk6；免疫組織化學(xué)

子宮內(nèi)膜腺癌起源于子宮內(nèi)膜腺體的惡性腫瘤，是最常見的女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，其發(fā)病率有逐年升高的趨勢。人體腫瘤是一種細(xì)胞周期性疾病，其中細(xì)胞周期素D1(cyclinD1)和細(xì)胞周期依賴激酶6(cyclindependent kinase 6，Cdk 6)被認(rèn)為是重要的細(xì)胞周期因子。CyclinD1可以和CDK6結(jié)合形成CyclinD1/ Cdk 6復(fù)合物，作為細(xì)胞周期的正向調(diào)節(jié)因子，二者表達(dá)異?？蓪?dǎo)致細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。本研究擬檢測cyclinD1和Cdk 6蛋白在子宮內(nèi)膜腺癌的表達(dá)變化，以探討兩者在子宮內(nèi)膜腺癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤中的作用。

1 材料與方法

1.1組織標(biāo)本

選取2009年6月至2012年6月中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院及遵義五院病理科保存的資料完整的均經(jīng)手術(shù)切除和常規(guī)病理證實的45例子宮內(nèi)膜腺癌為實驗組，30例正常子宮內(nèi)膜及30例不典型增生子宮內(nèi)膜作為對照組。

1.2方法 免疫組織化學(xué)染色采用SP法，CyclinD1單抗、Cdk6單抗、SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購武漢博士德公司，以PBS代替一抗作空白對照,以已知的結(jié)腸癌作陽性對照。

1.3判斷標(biāo)準(zhǔn) Cdk6、CyclinD1陽性著色定位于細(xì)胞核，為細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞，兩名病理醫(yī)生隨機(jī)抽取20個高倍視野，計數(shù)≥500個腫瘤細(xì)胞，按陽性細(xì)胞所占百分比并參考著色強(qiáng)度分級如下：陰性：陽性細(xì)胞數(shù)<1O%；陽性：陽性細(xì)胞數(shù)≥10%。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 實驗數(shù)據(jù)采用χ2檢驗,應(yīng)用SPSS l3.0軟件包,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

CyclinD1在正常子宮內(nèi)膜組、不典型增生子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜腺癌組中陽性表達(dá)率呈逐漸升高的趨勢(依次為10.0%、36.7%、71.1%)，子宮內(nèi)膜腺癌組與不典型增生子宮內(nèi)膜組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)子宮內(nèi)膜腺癌組與正常子宮內(nèi)膜組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。Cdk6在正常子宮內(nèi)膜組、不典型增生子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜腺癌組中陽性表達(dá)率呈逐漸升高的趨勢(依次為6.7%、36.7%、66.7%)，子宮內(nèi)膜腺癌組與不典型增生子宮內(nèi)膜組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)子宮內(nèi)膜腺癌組與正常子宮內(nèi)膜組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)(見表1)。

CyclinD1、Cdk6陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜腺癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)(P<0.05)。見表2。

表1 cyclinD1和Cdk6蛋白在不同的子宮內(nèi)膜中的表達(dá)情況

表2 CyclinD1、Cdk6的表達(dá)與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系

3 討論

腫瘤是一種細(xì)胞周期性疾病，細(xì)胞增殖周期由不同CyclinD和CDK在G1/ S 期和G2/ M 期兩個關(guān)鍵的調(diào)節(jié)位點進(jìn)行自控性調(diào)節(jié)，當(dāng)G1/ S 期和G2/ M 期兩個調(diào)節(jié)位失控，有可能導(dǎo)致細(xì)胞不斷增殖而導(dǎo)致惡性轉(zhuǎn)化。CyclinD是一種原癌基因，分為D1、D2、D3，是G1期的主要調(diào)控蛋白，CyclinD1合成并與相應(yīng)的cdk4/6相結(jié)合所產(chǎn)生的蛋白激酶活性是G1期所必需的。當(dāng)CyclinD1過表達(dá)會導(dǎo)致G1期縮短。有研究表明，CyclinD1在甲狀腺癌、乳腺癌、肝細(xì)胞癌、骨肉瘤等組織中有過表達(dá)[1]，提示CyclinD1基因和蛋白的表達(dá)異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有相關(guān)性。cdk6 是G1期的重要調(diào)控分子一，它能夠特異性地與周期蛋白D 結(jié)合形成復(fù)合物。有學(xué)者認(rèn)為，cdk6 對細(xì)胞分化的抑制作用[2]。在前列腺癌、骨髓瘤、肝癌、卵巢癌、黑色素瘤、Kaposi肉瘤等腫瘤中有過表達(dá)，于江等[3]研究表明，細(xì)胞周期正性調(diào)控因子CDK6蛋白過表達(dá)導(dǎo)致的G1期調(diào)控異常涉及了與子宮內(nèi)膜樣腺癌的發(fā)生、發(fā)展。表明DK6參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。有研究表明，CyclinD1、cdk6的異常高表達(dá)有可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[4]。

本研究Cdk6、CyclinD1在正常子宮內(nèi)膜組、不典型增生子宮內(nèi)膜組、子宮內(nèi)膜腺癌組中陽性表達(dá)率呈逐漸升高的趨勢，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義，這與正常子宮內(nèi)膜-內(nèi)膜不典型增生-子宮內(nèi)膜腺癌疾病的自然進(jìn)展演變過程相一致，表明Cdk6、CyclinD1蛋白可能參與子宮內(nèi)膜由良性演變?yōu)閻盒缘倪^程。Cdk6、CyclinD1陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌分化程度，Dukes分期、與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)關(guān)系，表明Cdk6、CyclinD1的過度表達(dá)導(dǎo)致的細(xì)胞異常增殖不僅涉及子宮內(nèi)膜腺癌的起始階段，在使子宮內(nèi)膜腺癌組織具有侵襲和轉(zhuǎn)移的能力過程中同樣起著重要的作用，在子宮內(nèi)膜腺癌前病變和癌組中檢測Cdk6和CyclinD1蛋白，可作為臨床早期診斷和科學(xué)評價腫瘤預(yù)后、指導(dǎo)臨床治療的指標(biāo)，可能為子宮內(nèi)膜腺癌基因治療的研究提供新途徑。

[1] GoodgerNM,GannonJ,HuntT,Mor ganPR. Cellc yclere gulatory proteins: anoverviewwithrelevancetooralcancer. Oral Oncol,1997,33 (2)：61，273.

[2] 朱紅琴.周期蛋白依賴性激酶6與腫瘤和細(xì)胞分化.生命的化學(xué),2009,28(1):52-54.

[3] 于江，王炎.子宮內(nèi)膜樣腺癌中PTEN、CDK6蛋白的表達(dá)及臨床意義.華南國防醫(yī)學(xué)雜志,2009,23(5):44-46.

[4] 姜可偉,王杉.胃癌組織中細(xì)胞周期素D1和細(xì)胞周期蛋白質(zhì)依賴激酶6的表達(dá)與預(yù)后的關(guān)系.中華普通外科雜志,2005,20(12)：800-802.

CyclinD1andCdk6ProteinsExpressioninEndometrioilCarcinomaanditsclinicalsignificancen

LIAOXiu-fang,LINYu-jing,CAOWan-wei.

ThefifthHospitalAffiliatedtoZhongshanUniversity,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk6 proteins in endometrioil carcinoma and its clinical significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk6 proteins were tested by S-P immunohistochemist ry on tissues of normal endometrium (30 cases),atypical endometrioil hyperplasia (30 cases) and endometrioil carcinoma (45 cases).ResultsBoth the CyclinD1and Cdk6 positive rates in atypical hyperplasia of endometrium and in cancer were significantly higher than that in normal endometrium (P<0.05).And the differentiation of endometrioil carcinoma,Dukes staging and lymph node metastasis are positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1 and Cdk6 protein excessive expression may be in endometrioil cancer occurrence,development,and play an important role in the invasion,to judge the prognosis of endometrioil carcinoma has a certain clinical significance,but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrioil cancer； CyclinD1； Cdk6； Immunohitochemistry

519000 珠海市中山大學(xué)附屬第五醫(yī)院婦產(chǎn)科(廖秀芳),病理科(林宇靜 曹婉維)