王一峰 秦衛(wèi)兵 楊寧 崔蓉 王小蘭 王永霞

抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2糖蛋白1抗體與不孕和流產(chǎn)的關(guān)系

王一峰 秦衛(wèi)兵 楊寧 崔蓉 王小蘭 王永霞

目的 探討抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體(ACA)和抗β2糖蛋白1(β2GP1)抗體與不孕和流產(chǎn)的關(guān)系。方法 選取2011～2012年在本院就診的不孕癥患者550例、復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者1650例和正常分娩者150例。對(duì)各組分別進(jìn)行抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體檢測(cè), 并將陽(yáng)性率進(jìn)行比較。 結(jié)果 不孕組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽(yáng)性率分別為76.0%、19.3%和17.5%；RSA組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽(yáng)性率分別為85.0%、23.5%和22.7%；均顯著高于對(duì)照組,P＜0.05。結(jié)論 抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體是引起不孕和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的重要因素。

抗HLA-I/II抗體；抗心磷脂抗體；抗β2GP1抗體；不孕癥；復(fù)發(fā)性流產(chǎn)

復(fù)發(fā)性流產(chǎn)(recurrent spontaneous abortion, RSA)是指妊娠20周前連續(xù)自然流產(chǎn)3次及3次以上者, 為常見(jiàn)的妊娠并發(fā)癥, 發(fā)生率約為1～5%。RSA的病因十分復(fù)雜, 除了胚胎染色體或流產(chǎn)夫婦染色體異常、解剖異常、內(nèi)分泌異常、和感染等病因外, 免疫學(xué)異常逐漸被認(rèn)為是導(dǎo)致RSA發(fā)生的主要病因［1］。根據(jù)流產(chǎn)的發(fā)病機(jī)制, 目前, 國(guó)際上將與免疫有關(guān)的RSA分為自身免疫型和同種免疫型兩大類(lèi)。其中,自身免疫型RSA主要與抗磷脂抗體(antiphosphlipid antibody,APA)、抗β2GP1抗體陽(yáng)性有關(guān), 而URSA則與母體封閉抗體缺乏有關(guān)。不孕癥是婦科常見(jiàn)病之一, 原(繼)發(fā)性不孕也存在免疫學(xué)因素［2］。近年來(lái), 抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體與不孕和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)之間的關(guān)系成為研究熱點(diǎn)。本文通550例不孕癥、1650例RSA患者和150例正常分娩者抗HLA-I/II抗體、抗心磷脂抗體和抗β2GP1抗體檢測(cè), 探討這三種抗體與不孕、RSA的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011-01至2013-03于本院門(mén)診就診的不孕患者550例、RSA患者1650例, 病例入選標(biāo)準(zhǔn)：①不孕癥組：具有正常性生活, 不避孕, 一年以上不孕者作為不孕癥組；②RSA組：妊娠早期自然流產(chǎn)3次或3次以上,同時(shí)無(wú)死胎、死產(chǎn)及活產(chǎn)史, 婦檢及其他檢查均排除染色體、解剖、內(nèi)分泌、感染等因素者作為RSA組?；颊吣挲g在20～45歲, 平均為(25.6±3.6)歲, 流產(chǎn)時(shí)孕周6～16周, 平均孕周(8.7±2.3)周；另選擇同期正常分娩者150例作為正常對(duì)照組。兩組之間平均年齡及平均孕周無(wú)差異。抽取外周血3 ml, 離心, -20℃保存。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 ACA和抗β2GP1試劑盒采用德國(guó)Orgentec公司的原裝試劑盒, 用ELISA 分析儀在波長(zhǎng)450 nm處讀取吸光度值( OD), 定性檢測(cè)ACA及抗β2-GP1抗體, 陰性對(duì)照的OD值應(yīng)<0.20, Correction值標(biāo)于陰性對(duì)照上, Cutoff = Correction +陰性對(duì)照OD值, Index值 = 樣本OD值/ Cutoff 值, Index≥1為陽(yáng)性,≤0.9為陰性。ELISA 分析儀自動(dòng)使用擬合的參數(shù)曲線計(jì)算抗體的吸光度值和滴度?？笻LA-I/II抗體試劑盒采用美國(guó)ONE LAMBDA公司原裝試劑盒, 檢測(cè)方法按說(shuō)明說(shuō)進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理, 計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 以P＜0.05具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

不孕組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽(yáng)性率分別為76.0%、19.3%和17.5%；RSA組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽(yáng)性率分別為85.0%、23.5%和22.7%；對(duì)照組抗HLA-I/II陰性率、ACA和抗β2GP1陽(yáng)性率分別為20%、3.3%和2.7%；不孕組、RSA組與對(duì)照組比較, P＜0.01, 差異具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (如表1所示)。

表1 不孕、RSA組與對(duì)照組抗HLA-I/II陰性率、ACA、抗β2GP1陽(yáng)性率比較［n(%)］

3 討論

如果將妊娠這一復(fù)雜的生理過(guò)程看作是器官移植, 將帶有父系異體抗原成分的胚胎看成是母體的移植物, 那么母體與作為移植物的胚胎細(xì)胞在母胎界面上相互識(shí)別, 母體在識(shí)別胚胎抗原的同時(shí), 產(chǎn)生封閉抗體。母體中的細(xì)胞毒淋巴細(xì)胞與產(chǎn)生的封閉抗體結(jié)合后, 細(xì)胞的毒作用被封閉, 防止對(duì)胎兒的殺傷；同時(shí)胚胎細(xì)胞上的抗原與封閉抗體相結(jié)合, 對(duì)母體的淋巴細(xì)胞與胚胎細(xì)胞之間的通路進(jìn)行阻斷。目前的研究結(jié)果在孕婦首次妊娠時(shí)會(huì)出現(xiàn)封閉抗體,在分娩后3～6周上升, 以后將持續(xù)存在［3］。 封閉抗體在妊娠中起到對(duì)母體淋巴細(xì)胞識(shí)別父系抗原的抑制作用以及保護(hù)胎兒等作用, 是保證孕婦順利分娩的重要抗體。如果在妊娠過(guò)程中母體由于某種因素, 封閉抗體缺乏, 將會(huì)導(dǎo)致母體對(duì)作為移植物的胚胎排斥, 進(jìn)而造成復(fù)發(fā)性流產(chǎn)［4］。由于封閉抗體是一組復(fù)雜的抗體組合, 現(xiàn)在人們還不清楚其具體組成, 人們通常將抗HLA-I/II抗體作為封閉抗體的代表。本研究中, 我們發(fā)現(xiàn)不孕癥和RSA兩組的抗HLA-I/II抗體陰性率顯著高于對(duì)照組, 說(shuō)明封閉抗體缺乏是導(dǎo)致不孕和復(fù)發(fā)性流產(chǎn)的一個(gè)重要因素。

ACA 是一組自身免疫性抗體, 本研究主要探討ACA與不孕、RSA的相關(guān)性。正常情況下, 帶有負(fù)電荷的心磷脂(心肌、子宮居多) 位于細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層的內(nèi)層, 不被免疫系統(tǒng)識(shí)別, 一旦暴露, 心磷脂抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生一種自身免疫性抗體即ACA, 它是強(qiáng)烈的凝血活性物質(zhì), 可直接造成血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷。ACA 可能通過(guò)以下途徑導(dǎo)致流產(chǎn)發(fā)生[5,6]：作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的磷脂, 抑制花生四烯酸的釋放, 進(jìn)一步影響前列腺素的產(chǎn)生；促進(jìn)血管收縮以及血小板聚集；與血小板磷脂結(jié)合, 誘導(dǎo)血小板激活、聚集, 導(dǎo)致血管內(nèi)血栓形成；通過(guò)干擾血栓調(diào)節(jié)素, 抑制纖溶酶原的活化。因此, ACA 能使母體血液高凝, 在胎盤(pán)微小血管處形成血栓或梗死, 引起母-胎間血液循環(huán)障礙, 胎盤(pán)與母體間的物質(zhì)交換減少和屏障功能下降, 造成胎兒營(yíng)養(yǎng)供給不足而流產(chǎn)和死亡。然而并非所有 RSA 者都有胎盤(pán)或絨毛血管內(nèi)的血栓形成,進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn), ACA 破壞或阻礙滋養(yǎng)層細(xì)胞正常功能,導(dǎo)致滋養(yǎng)層蛻膜淺植入, 因此認(rèn)為胎盤(pán)形成不良可能是引起RSA的發(fā)病機(jī)制之一［7］。本研究中, 我們發(fā)現(xiàn)不孕癥和RSA兩組的ACA陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組, 表明ACA是導(dǎo)致不孕和RSA的重要因素之一。

β2GP1(又稱(chēng)載脂蛋白H)是由肝細(xì)胞合成, 是血漿中含量較豐富的一種單鏈糖蛋白。在血漿中與脂蛋白結(jié)合, 其第1、2、5功能區(qū)有大量帶正電荷的氨基酸序列, 與帶陰離子磷脂的物質(zhì)結(jié)合后, β2GP1將其隱藏的抗原表位顯露, 導(dǎo)致了抗β2GP1抗體產(chǎn)生［8］。體外實(shí)驗(yàn)證明, 它能抑制內(nèi)源性的凝集通路及抑制血小板上的凝血酶原酶的活性。近年來(lái)研究表明, 抗β2GP1抗體與妊娠疾病有一定聯(lián)系, 是導(dǎo)致抗磷脂綜合征的主要抗體?？功?GP1抗體陽(yáng)性人群發(fā)生相關(guān)臨床癥狀的比率高于ACA 陽(yáng)性人群, 因此, 直接測(cè)抗β2GP1抗體可能更具特異性。本研究中, 我們發(fā)現(xiàn)不孕癥和RSA兩組的抗β2GP1抗體陽(yáng)性率明顯高于對(duì)照組, 表明抗β2GP1抗體是導(dǎo)致不孕和RSA的重要因素之一。ACA陽(yáng)性的檢出率較抗β2GP1抗體的檢出率高, 這一方面是因?yàn)槟芘c磷脂結(jié)合產(chǎn)生ACA的磷脂結(jié)合蛋白不限于β2GP1。聯(lián)合ACA和抗β2GP1抗體檢測(cè)可增加抗磷脂綜合征在不孕和RSA檢測(cè)的準(zhǔn)確性,比單獨(dú)檢測(cè)ACA準(zhǔn)確性提高許多, 大大減少抗磷脂綜合征的漏診率和誤診率。本研究表明抗HLA-I/II抗體、ACA和抗β2GP1抗體與不孕和RSA有直接關(guān)系, 因此, 在臨床工作中遇到不孕癥和RSA患者時(shí)有必要進(jìn)行抗HLA-I/II抗體、ACA和抗β2GP1抗體檢測(cè), 以便及時(shí)診斷并對(duì)癥治療。

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Relationship between anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies and infertility, recurrent spontaneous abortion

WANG Yi-feng, QIN Wei-bing, YANG Ning, et al.
Family Planning Research Institute of Guangdong Province,Guangzhou 510600,China

Objective To investigate the relationship between anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies and infertility, recurrent spontaneous abortion.Methods Selected 550 patients with infertility, 1650 patients with recurrent spontaneous abortion and 150 normal deliveries between 2011 and 2012 in our hospital in accordance with the a certain principles of income group.All patients were given anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin and anti-β2GP1 antibodies detection, negative rate of anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibody and anti-β2GP1 antibody positive rates were compared.Results Negative rate of anti-HLA-I/II antibodies in infertility and RSA group, anticardiolipin and anti-β2GP1 antibody positive rate was higher than those in control group, differences were significant, (P<0.01).Conclusion Anti-HLA-I/II antibodies, anticardiolipin antibodies, anti-β2GP1 antibodies are important factors of infertility and RSA.

Anti-HLA-I/II antibodies; Anticardiolipin antibody; Anti-β2GP1 antibodies; Infertility;Recurrent spontaneous abortion

510600 廣州, 廣東省計(jì)劃生育科學(xué)技術(shù)研究所

秦衛(wèi)兵