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        上消化道疾病患者幽門螺旋桿菌抗體譜檢測結(jié)果分析

        2013-10-15 08:39:08許文龍李齊云佘亞輝韓媛媛
        檢驗醫(yī)學(xué)與臨床 2013年4期
        關(guān)鍵詞:幽門感染率毒素

        許文龍,李齊云,佘亞輝,韓媛媛

        (安徽省亳州市人民醫(yī)院檢驗科 236800)

        臨床上幽門螺桿菌(Hp)的檢測方法很多,常用的有快速尿素酶實驗,14C、13C呼氣試驗。14C呼氣試驗因有放射性而漸被淘汰,13C較安全卻過于昂貴;而單一的尿素酶實驗又無法識別是否為產(chǎn)細胞毒素的Hp感染以及易出現(xiàn)假陰性,影響結(jié)果的準確性。本文采用蛋白芯片技術(shù)對上消化道疾病患者進行Hp血清學(xué)檢查,探討Hp抗體譜檢測在上消化道疾病診斷中的意義。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取本院門診與住院患者557例,因上消化道癥狀而行胃鏡檢查,其中胃潰瘍73例,男49例,女24例,年齡20~88歲,平均年齡49.3歲;十二指腸潰瘍32例,男26列,女6例,年齡19~71歲,平均年齡39.5歲;慢性胃炎258例;男114例,女144例,年齡11~76歲,平均年齡23.5歲。上消化道腫瘤組(均經(jīng)病理證實)56例,男35例,女21例,年齡44~76歲,平均年齡61.3歲。另外138例健康體檢體檢者作為對照組。

        1.2 血清Hp抗體檢查方法

        1.2.1 標本采集和保存 空腹抽取靜脈血2mL置于普通生化管中,分離血清,如未能及時檢查則置于-20℃凍存。

        1.2.2 采用試劑 由深圳欣康基因數(shù)碼科技有限公司提供的Hp蛋白檢測芯片試劑盒。

        1.2.3 原理 Hp芯片抗體檢測試劑盒將Hp特異性重組蛋白包括細胞毒素相關(guān)蛋白(CagA)、空泡毒素A蛋白(VacA)、尿素酶(Ure)、熱休克蛋白60(Hsp60)和氮素還原酶(RdxA)以方陣形式固定于支持膜上,待檢標本中的特異性抗體(IgG)與抗原發(fā)生反應(yīng),便在膜上形成抗原-抗體免疫復(fù)合物,再用膠體金標記物(顯色劑)與該免疫復(fù)合物結(jié)合,最終形成肉眼可見的紅色斑點,借助芯片閱讀儀對待檢標本中的抗體做定性分析。1.2.4 操作步驟 嚴格按深圳欣康基因數(shù)碼科技有限公司提供的HP蛋白檢測芯片試劑盒說明書操作。

        1.3 結(jié)果判斷 檢測5種 Hp抗體中以CagA、VacA、Ure、Hsp60抗體中任意一項陽性即判斷為Hp抗體陽性;以分泌CagA/VacA為Ⅰ型Hp,無分泌CagA/VacA為Ⅱ型Hp。

        1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS15.0統(tǒng)計軟件,采χ2檢驗,多組總體率比較檢驗水準α=0.05。

        2 結(jié) 果

        2.1 對照組、慢性胃炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、上消化道腫瘤各組的Hp抗體譜感染率比較見表1。Hp抗體譜感染率在各組間總體比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2值為15.413,P 為0.004);慢性胃炎組、上消化道腫瘤組Hp感染率與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2值分別為0.035、0.020,P分別為0.853、0.888);胃潰瘍與十二指腸潰瘍組間及慢性胃炎組與上消化道腫瘤組Hp抗體譜感染率比較差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2值分別為0.012、0.081,P分別為0.912、0.776);潰瘍組 Hp抗體譜感染率明顯高于對照組與慢性胃炎組(χ2值分別為8.849、9.453,P 分別為0.003、0.002)。

        表1 各組間Hp抗體譜感染率及Hsp60陽性率[n(%)]

        2.2 Hsp60抗體在對照組、慢性胃炎組、胃潰瘍組、十二指腸潰瘍組、上消化道腫瘤組的陽性率分別為9.4%、1.75%、20.5%、3.1%、46.4%(見表1)。上消化道腫瘤組 Hsp60陽性率與其他4組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2值分別為33.968、65.589、9.79、17.955;P 值 分 別 為 0.000、0.000、0.002、0.000)。

        2.3 對照組、慢性胃炎、胃性潰瘍、十二指腸潰瘍、上消化道腫瘤各組的Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染率比較見表2。胃潰瘍、十二指腸潰瘍、上消化道腫瘤組Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染率明顯高于對照組與慢性胃炎組。

        表2 各組間Ⅰ型、Ⅱ型Hp感染率比較[n(%)]

        3 討 論

        Hp是從慢性活動性胃炎患者的胃黏膜分離的一種革蘭陰性桿菌,一般情況下定植于胃黏膜,可引起慢性胃炎、消化性胃潰瘍等消化道疾病,并且是胃腺癌與胃淋巴瘤的誘發(fā)因素之一[1]。Hp在胃黏膜繁殖后,能產(chǎn)生豐富的尿素酶,有極強的分解尿素的作用,尿素分解后產(chǎn)生的氨對黏膜產(chǎn)生毒性作用,致使黏膜損傷,破壞胃黏膜,發(fā)生上消化道各種疾病。

        Hp在人群中有較高的感染率。Hp感染人體后可呈現(xiàn)不同的臨床結(jié)果,這除了可能與宿主的個體差異有關(guān)以外,Hp菌株的不同可能是導(dǎo)致不同臨床結(jié)果的關(guān)鍵因素。由于菌株不同,其所含細胞毒素相關(guān)蛋白也不盡相同。一些Hp表達空泡毒素和細胞毒素它們在導(dǎo)致黏膜損傷中起重要作用[2]?,F(xiàn)已表明Hp不同的抗體成分決定了其致病特點或與Hp感染的預(yù)后及耐藥密切相關(guān)[3]。據(jù)此特性臨床上把Hp分為2種類型,即分泌CagA/VacA為Ⅰ型,無分泌Cag A/VacA為Ⅱ型[4]。它們在胃和十二指腸疾病中造成的后果不一樣,Ⅱ型HP不產(chǎn)生細胞毒素,它雖然能覆蓋在部分胃黏膜上,并使人體產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答(產(chǎn)生Hp抗體),但不能侵入胃上皮細胞,可長期無臨床癥狀。相反感染Ⅰ型Hp后,由于細胞毒素的作用造成胃上皮細胞空泡、損傷、壞死及潰瘍,因此感染此類Hp與胃、十二指腸潰瘍及胃部腫瘤可能有較密切的關(guān)系[5]。本文中上消化道疾病的Hp總陽性率為57.27%(319/557),與文獻[6]報告相似,表明Hp感染與上消化道疾病密切相關(guān)。Ⅰ型Hp感染率在消化性潰瘍組與上消化道腫瘤組均明顯高于對照組,顯示具有高毒力因子(CagA及VacA)的Hp是上消化道疾病的主要致病菌株。

        Hsp是一種分子伴侶,能以分子模擬宿主自身抗原,逃避宿主免疫和(或)誘發(fā)自身免疫,同時其具有抗原特異性可引起抗感染免疫。目前至少已認識到4族Hsp,即Hsp90、Hsp70、Hs p60和小Hsp。研究表明Hp中存在Hsp60,它可能與Hp對胃黏膜上皮的黏附有關(guān),而且參與蛋白質(zhì)的細胞外裝配和(或)在宿主胃環(huán)境中保護尿素酶的活性[7-8]。本研究中上消化道腫瘤組Hsp60陽性表達率顯著高于慢性胃炎組、消化性潰瘍組及對照組,表明Hsp60的高表達可能與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和生物學(xué)行為有密切的關(guān)系。胃癌的形成、發(fā)展有如下模式:即淺表性胃炎-萎縮性胃炎-腸上皮化生-不典型增生-胃癌,其中腸上皮化生和不典型增生是胃黏膜良性病變向胃癌演變的前奏,屬于慢性增生性疾病,而在此過程中Hsp60陽性表達率呈逐漸上升趨勢[7]。

        在人群中采用Hp檢測的血清學(xué)篩查,能夠及早發(fā)現(xiàn)各種消化性疾病患者,并得到早期治療。本組結(jié)果表明,Hp蛋白芯片血清學(xué)檢測可以為臨床判斷是否為產(chǎn)毒的Hp感染提供科學(xué)依據(jù),對判斷預(yù)后有重要的臨床意義,很適合廣大基層醫(yī)院推廣應(yīng)用。

        [1] 姚永莉,張萬岱.幽門螺桿菌致病因子研究進展[J].世界華人消化雜志,2002,10(4):455-458.

        [2] 岑朝,黃贊松,周喜漢,等.百色地區(qū)居民幽門螺桿菌的毒力及其耐藥狀況研究[J].廣西醫(yī)學(xué),2009,31(1):7-9.

        [3] Go MF,Graham DY.How does Helicobacter pyl ori cause duodenal ulcer disease:the bug,the host,or both?[J].J Gastroenternal Hepatol,1994,9(Supp l1):8-10.

        [4] 朱人敏,秦蘇堤,金鑫鑫,等.幽門螺桿菌分型與上消化道疾病的關(guān)系[J].醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報,2005,18(10):911-917.

        [5] 林裕龍,龍國進,蘭萌.幽門螺旋桿菌抗體譜檢測在不同消化系統(tǒng)疾病的臨床意義[J].廣東醫(yī)學(xué),2006,27(12):1887-1888.

        [6] 成積儒,蔡永林,黃德旺,等.336例上消化道疾病患者的幽門螺桿菌抗體譜檢測結(jié)果分析[J].廣西醫(yī)學(xué),2009,31(6):806-807.

        [7] 馬銳,孫麗萍,袁媛,等.胃黏膜病中 Hsp60的表達及意義[J].中國腫瘤臨床,2005,32(1):43-44.

        [8] 尹曉燕.上消化道出血207例分析[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2010,7(10):987.

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