陳召金，黃敏輝，姚慧梅（廣東省東莞市企石醫(yī)院兒科 523500）

小兒腎臟疾病治愈快，但存在病情反復(fù)、病程加重的特點(diǎn)。因此小兒腎臟疾病的診斷與救治一直是腎臟疾病研究的重點(diǎn)。腎小管損傷標(biāo)志物是腎損傷的常用檢測(cè)指標(biāo)之一，在臨床應(yīng)用廣泛［1－3］。因此，本課題組擬探討多種腎小管標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)對(duì)于小兒腎臟疾病的價(jià)值，并做相應(yīng)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 腎小管損傷組（Ⅰ組） 從本院2011年10月1日至2012年10月1日收治確診為腎小管損傷的患兒中隨機(jī)抽取30例，其中男16例，女14例；年齡2～11歲，平均（6.81±3.25）歲；該組患者無(wú)腎功能異常，并排除其他并發(fā)癥。

1.1.2 腎病綜合征組（Ⅱ組） 從本院同期收治確診為腎病綜合征的患兒中隨機(jī)抽取30例，其中男17例，女13例；年齡1～12歲，平均（6.51±2.86）歲；該組患者排除其他并發(fā)癥。

1.1.3 過(guò)敏性紫癜組（Ⅲ組） 從同期來(lái)本院確診為過(guò)敏性紫癜的患兒中抽取30例，其中男15例，女15例；年齡1～10歲，平均（7.24±3.48）歲；該組患者無(wú)腎功能異常，并排除其他并發(fā)癥。

1.1.4 健康組（Ⅳ組） 標(biāo)本從同期來(lái)本院體檢的健康兒童中隨機(jī)抽取30例，其中男16例，女14例；年齡1～12歲，平均（6.93±3.47）歲。四組標(biāo)本在性別、年齡等方面比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）測(cè)定β2微球蛋白（β2－MG）和視黃醇結(jié)合蛋白（RBP） 取各組兒童新鮮尿液，采用ELISA測(cè)定（酶標(biāo)儀為BM公司ELX－800型，試劑盒為上海德波生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)）。于酶標(biāo)儀490nm處測(cè)吸光度，參比波長(zhǎng)630nm。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：β2－MG＜300μg／L，RBP＜300μg／L；檢測(cè)值高于正常值＋2倍標(biāo)準(zhǔn)差為陽(yáng)性。

1.2.2 直接顯色法測(cè)定 N－乙酰－β－D氨基酸核苷酶（NAG）取各組患兒新鮮尿液，采用酶－底物直接顯色法，722RS型分光光度儀，波長(zhǎng)400nm處讀取吸光值。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：NAG＜16U／L；檢測(cè)值高于正常值＋2倍標(biāo)準(zhǔn)差為陽(yáng)性。

1.2.3 速率散射比濁法測(cè)定尿胱抑素C（Cys C） 取各組兒童新鮮尿液，在HIT A CHI7600－120全白動(dòng)生化分析系統(tǒng)上完成。陽(yáng)性判斷標(biāo)準(zhǔn)：Cys C范圍是0.115～0.141mg／L。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 比較4組兒童尿液中β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平。

1.3.2 比較聯(lián)合應(yīng)用β2－MG、Cys C、RBP、NAG檢測(cè)4組兒童腎小管損傷的陽(yáng)性率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量數(shù)據(jù)以表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 4組尿中β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平比較 Ⅰ組與Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅱ組與Ⅳ組β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅲ組與Ⅳ組β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；Ⅱ組與Ⅲ組β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見(jiàn)表1。

表1 4組尿中β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平比較（n＝30，）

表1 4組尿中β2－MG、Cys C、RBP、NAG水平比較（n＝30，）

組別 β2－MG（μg／L） RBP（μg／L） NAG（U／L） Cys C（mg／L）Ⅰ組 497.23±260.07 515.64±293.55 54.53±30.85 3.452±0.371Ⅱ組 248.16±192.92 198.20±113.74 23.83±11.28 1.564±0.382Ⅲ組 244.91±186.43 203.85±106.54 21.24±13.06 1.825±0.296Ⅳ組 91.58±63.73 35.79±17.28 5.33±2.87 0.823±0.147

2.2 β2－MG 、Cys C、RBP、NAG聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率分別為100%（30例）、90%（27例）、86.67%（26例），均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于Ⅳ組5%（1例）。

3 討 論

腎損傷是多種疾病的常見(jiàn)并發(fā)癥，因其臨床癥狀隱蔽，故難以及時(shí)發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致患者病程貽誤。因此，國(guó)際上采取了多種標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)腎損傷［4－5］。自20世紀(jì)80年代以來(lái)，腎小管損傷日漸受到人們的廣泛重視［6］。針對(duì)這種情況，本課題組提出了聯(lián)合檢測(cè)的設(shè)想，選取了較為常用準(zhǔn)確的腎小管損傷標(biāo)志物［7－8］：β2－MG、RBP、NAG和 Cys C。β2－MG的尿液水平增高體現(xiàn)腎小管重吸收功能障礙；RBP反映腎小管間質(zhì)受損［9］；NAG含量的增高反映腎小管實(shí)質(zhì)損害；Cys C則體現(xiàn)了腎小管壞死的嚴(yán)重程度［10］。選取這4個(gè)指標(biāo)，較為全面的概括了腎小管損傷的各種類型，聯(lián)合應(yīng)用其檢測(cè)，經(jīng)過(guò)試驗(yàn)驗(yàn)證，陽(yáng)性率達(dá)到100%，這表明本文設(shè)想是合理、正確的。

為了探究腎小管標(biāo)志物的特異性，本課題組設(shè)計(jì)了無(wú)腎功能異常的過(guò)敏性紫癜組。比較此組與其他組的數(shù)據(jù)，表明即使通過(guò)其他的檢測(cè)手段反映病患無(wú)腎功能異常，腎小管依然存在一定程度的損傷。而事實(shí)表明，60%～80%的過(guò)敏性紫癜患者后期均患有腎臟疾病，明確反映了腎小管標(biāo)志物在早期診斷疾病的重要作用。腎功能不全組的設(shè)計(jì)，表明腎臟患者不僅具有腎小管損傷，也伴有腎小球損傷，這二者的病變過(guò)程往往是相輔相成的。因此，提示腎小管損傷，對(duì)腎小球病變也有一定指導(dǎo)作用。

兒童的體質(zhì)健康決定了國(guó)家的發(fā)展前途，我國(guó)小兒腎臟疾病的現(xiàn)狀并不樂(lè)觀。如何提高早期腎病的診斷率對(duì)于治愈疾病有著不可忽視的作用。發(fā)現(xiàn)更多的標(biāo)志物，提高檢測(cè)手段的靈敏性，都是未來(lái)研究的方向。

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