張 發(fā)，周 婭，和東義，李小艷，楊曉燕

（大理學院農學與生物科學學院，云南大理 671003）

飲用水中細菌總數和大腸菌群數是水質檢測必不可少的檢測項目。細菌總數指的是1 mL水樣，在牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基中經37℃培養(yǎng)24 h后所生長的細菌菌落總數。細菌總數在一定程度上反映了水被細菌污染的程度〔1〕。大腸菌群是以E.coli為代表的，需氧及兼性厭氧、在37℃培養(yǎng)24 h能分解乳糖產酸產氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌（腸桿菌科中的埃希氏菌、檸檬酸菌屬、克雷伯菌屬和腸桿菌屬），是溫血動物腸道中的正常菌群，常隨動物糞便污染水源〔2-3〕，并與水中存在的腸道病原菌呈正相關性，因此，大腸菌群是飲用水質檢測的重要指標之一〔4-5〕。我國生活飲用水衛(wèi)生標準（GB5749-2006）規(guī)定生活飲用水中細菌總數≤100個/mL，大腸菌群不得檢出〔6〕。

大理花甸壩由大、小花甸組成，位于蒼山十九峰中最北的云弄、滄浪兩峰之間。整個花甸地勢平坦，土質肥沃，景色迷人，生物多樣性豐富，已經成為眾多旅游者的目的地，同時也是大理學院最重要的學生野外實習基地。近幾年來隨著到這里旅游和實習人數的增加，飲用水源的安全性也越來越受到人們的關注，但到目前為止還未見有對這里的飲用水源進行水質檢測的報道。本研究擬采用平板菌落計數法和多試管發(fā)酵法對花甸壩3個飲用水源點的細菌總數和大腸菌群進行檢測，檢測結果可為該地飲用水源的選擇與保護提供數據支持。

1 材料

1.1 樣品 2013年6月7日分別于位于花甸壩農場總部東北方向4 km的龍?zhí)端矗ㄋ畼?）、農場總部西面3 km的西坡水源（水樣2）和農場總部水源（水樣3）3個水源點以無菌操作方式采集水樣各500 mL，并標明水樣采集時間、地點，記錄水樣周邊環(huán)境。水樣采集后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 培養(yǎng)基和試劑 牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基、乳糖蛋白胨發(fā)酵管（內有倒置小套管）培養(yǎng)基、3倍濃縮乳糖蛋白胨發(fā)酵瓶（內有倒置小套管）培養(yǎng)基、伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基及革蘭氏染色液均按標準方法配制及滅菌〔7〕。

2 方法

采用平板菌落計數法和多管發(fā)酵法按規(guī)范進行檢測〔8-10〕。

3 結果

3.1 細菌總數的測定 1號水樣經平板菌落計數，無細菌菌落生成；2號水樣菌落數＞300；3號水樣菌落數=189，見表1。

表1 細菌總數檢測結果

3.2 總大腸菌群的測定 水樣1經初發(fā)酵實驗后所有發(fā)酵管及發(fā)酵瓶都未產酸產氣；水樣2經復發(fā)酵實驗后有2個發(fā)酵瓶及10只發(fā)酵管都產酸產氣；水樣3經復發(fā)酵實驗后有2個發(fā)酵瓶及9只發(fā)酵管產酸產氣，1只試管未產酸產氣，詳細結果見表2和表3。根據初發(fā)酵試驗的陽性管（瓶）數查總大腸菌群檢數表〔7〕，得到水樣1總大腸菌群數＜3；水樣2總大腸菌群數＞230；水樣3總大腸菌群數=230。

表2 總大腸菌群數檢測初發(fā)酵結果

表3 總大腸菌群數檢測初發(fā)酵結果

4 討論

根據檢測結果可知，除龍?zhí)端次礄z測到細菌和大腸菌群（大腸菌群數＜3）外，花甸壩西坡水源細菌總數＞300，大腸菌群數＞230，農場總部水源細菌總數=189，大腸菌群數=230，均不符合我國飲用水衛(wèi)生標準（GB5749-2006）〔6〕。根據不同水源周邊環(huán)境分析，出現這種情況的原因可能是：龍?zhí)端吹靥幓ǖ閴伪泵?，群山環(huán)抱、地勢險峻，這里無耕地和牧場，人類活動極少，水源暫未受到污染。而西坡水源和農場總部水源位于花甸壩壩區(qū)，地勢平坦，附近有大片的耕地和牧場，同時附近也是眾多旅游者和居民的住宅區(qū)，水源已經受到人類及動物糞便污染，不再適宜作為飲用水源。雖然本次實驗只對花甸壩3個水源點進行了檢測，但其中兩個水源點細菌學指標都不合格，因此建議相關職能部門盡快采取相應措施對花甸壩各水源點進行綜合治理，建立適當的水源保護區(qū)，以保證花甸壩飲用水安全。

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