邱春媚 殷光玲

(湯臣倍健股份有限公司，廣州 510663)

角鯊烯又名鯊烯，鯊萜，是一種高度不飽和烴類化合物，常溫下為無(wú)色油狀液體，不溶于水，難溶于甲醇、乙醇和冰醋酸，易溶于乙醚、石油醚、丙酮、四氯化碳等有機(jī)溶劑［1］，最初在黑鯊魚肝油中分離得到，也是人類動(dòng)物組織中最早發(fā)現(xiàn)的烴類化合物［2］。多年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)，角鯊烯作為一種脂質(zhì)不皂化物，廣泛分布于生物體中，植物中存在的角鯊烯以橄欖油、棕櫚油、米糠油和莧屬植物種子油含量最高［3］;動(dòng)物中的角鯊烯主要存在于深海魚類，尤其是深海鯊魚的肝臟［4］。各方面的研究表明，角鯊烯具有很高的生物活性，能增加高密度脂蛋白和富含攜氧細(xì)胞體，人體攝入后，有助于降壓、降脂、降黏，可迅速促使血管疏通，預(yù)防及治療因血液循環(huán)不良而引起的心臟病、高血壓、低血壓及中風(fēng)等［5］。角鯊烯還具有類似紅細(xì)胞的攝氧功能，對(duì)體內(nèi)組織細(xì)胞提供充足的氧，從而改善心腦血管功能與增強(qiáng)身體耐力，同時(shí)還能促進(jìn)體內(nèi)的能量代謝，使體力快速恢復(fù)，疲勞及時(shí)消除;消除自由基，提高免疫機(jī)能，增強(qiáng)機(jī)體預(yù)防疾病的能力等［6］，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、美容、化妝品、保健食品等各個(gè)領(lǐng)域［2］。為給合理開發(fā)利用角鯊烯提供依據(jù)，試驗(yàn)主要針對(duì)深海鯊魚肝臟來(lái)源的角鯊烯的耐缺氧作用進(jìn)行研究。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

角鯊烯軟膠囊:廣州市佰健生物工程有限公司，內(nèi)容物為黃色油狀液體，以大豆色拉油配制成相應(yīng)的濃度供研究用。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及其分組

試驗(yàn)動(dòng)物選用湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的BALB/C 小鼠，雌性，清潔級(jí)，18～22 g，150 只。

試驗(yàn)研究中將50只BALB/C小鼠按體重隨機(jī)分為5組，分別為陰性對(duì)照組(蒸餾水)、溶劑對(duì)照組(色拉油)和低、中、高3個(gè)劑量組。低、中、高劑量組分別按人體推薦攝入量的10倍、20倍、30倍(即0.33、0.67、1.00 g/kg·bw)經(jīng)口灌胃給予受試物，灌胃體積均為0.2 mL/kg·bw。試驗(yàn)期間各組動(dòng)物自由進(jìn)食和飲水，每周稱1次體重，以調(diào)整灌胃量。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 常壓耐缺氧試驗(yàn)

各組小鼠連續(xù)經(jīng)口給予受試物或?qū)φ瘴?0 d，并于末次灌胃1 h后，將每只小鼠分別放入盛有5 g鈉石灰的250 mL廣口瓶中(凡士林密封)。記錄其因缺氧而死亡的時(shí)間。

1.3.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)

各組小鼠連續(xù)經(jīng)口給予受試物或?qū)φ瘴?0 d，并于末次灌胃1 h后經(jīng)腹腔注射亞硝酸鈉224 mg/kg(注射容積為0.10 mL/10 g·bw)，記錄各只動(dòng)物的存活時(shí)間。

1.3.3 急性腦缺血試驗(yàn)

各組小鼠連續(xù)經(jīng)口給予受試物或?qū)φ瘴?0 d，并于末次灌胃1 h后各組動(dòng)物自頸部逐只斷頭，立即記錄各只動(dòng)物斷頭至張口喘氣停止的時(shí)間。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 常壓耐缺氧試驗(yàn)

飼喂30 d后，對(duì)照組和各劑量組小鼠試驗(yàn)期間體重有輕微的增長(zhǎng)，但同期體重各組間沒(méi)有明顯差異，而20、30倍劑量組常壓耐缺氧時(shí)間與兩對(duì)照組相比，差異有顯著性(表1)。

表1 深海角鯊烯軟膠囊對(duì)BALB/C小鼠體重及常壓耐缺氧時(shí)間的影響

2.2 亞硝酸鈉中毒存活試驗(yàn)

飼喂30 d后，對(duì)照組和各劑量組小鼠試驗(yàn)期間體重有輕微的增長(zhǎng)，但同期體重各組間沒(méi)有明顯差異。小鼠給予受試物后，亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間均有不同程度的延長(zhǎng)，其中20倍、30倍劑量組的中毒存活時(shí)間與陰性對(duì)照組相比，差異有顯著性;與溶劑對(duì)照組相比，差異分別有顯著性與極顯著性。

表2 深海角鯊烯軟膠囊對(duì)BALB/C小鼠體重及亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間的影響

2.3 急性腦缺血試驗(yàn)

飼喂30 d后，對(duì)照組和各劑量小鼠試驗(yàn)期間體重有輕微的增長(zhǎng)，但同期體重各組間沒(méi)有明顯差異。急性腦缺血試驗(yàn)表明，20倍劑量組的喘氣時(shí)間與兩對(duì)照組相比，有顯著性差異;10倍、30倍兩劑量組的喘氣時(shí)間與兩對(duì)照組相比，有極顯著性差異。

表3 深海角鯊烯軟膠囊對(duì)BALB/C小鼠體重及急性腦缺血時(shí)間的影響

3 討論

缺氧是指因組織的氧氣供應(yīng)不足或用氧障礙，而導(dǎo)致組織的代謝、功能和形態(tài)結(jié)構(gòu)發(fā)生異常變化的病理過(guò)程，是臨床各種疾病中極常見(jiàn)的一類病理過(guò)程，心、腦等生命重要器官缺氧也是導(dǎo)致機(jī)體死亡的重要原因［8］。

角鯊烯在人體內(nèi)參與膽固醇的生物合成及多種生化反應(yīng)，還能與載體蛋白和7α－羥基－4－膽甾烯結(jié)合，顯著增加12α－羥化酶的活性，促進(jìn)膽固醇的轉(zhuǎn)化，并提高血清銅藍(lán)蛋白與轉(zhuǎn)鐵蛋白以及超氧化物歧化酶與乳酸脫氫酶的活性。新近研究還表明，角鯊烯具有類似紅細(xì)胞那樣攝取氧的功能，生成活化的氧化角鯊烯，在血液循環(huán)中輸送到機(jī)體末端細(xì)胞后釋放氧，從而增加機(jī)體組織對(duì)氧的利用能力，促進(jìn)膽汁分泌，強(qiáng)化肝功能，達(dá)到增進(jìn)食欲，加速消除因缺氧所致的各種疾病的目的［9］。

本試驗(yàn)中，小鼠在密閉容器中受缺氧因素?fù)p害，主要反映在心和腦缺氧;亞硝酸鈉中毒可使血液中的低鐵血紅蛋白氧化成高鐵血紅蛋白，失去運(yùn)輸氧的能力而引起組織缺氧性損害;在急性腦缺血性缺氧條件下，腦血供應(yīng)中斷，但腦中原有的血和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)能使腦功能維持一段時(shí)間，表現(xiàn)在小鼠規(guī)律的喘氣。研究結(jié)果表明，在連續(xù)給予角鯊烯一段時(shí)間后，可延長(zhǎng)小鼠亞硝酸鈉中毒的存活時(shí)間;在急性腦缺血性缺氧條件下，能延長(zhǎng)小鼠的喘氣時(shí)間，且對(duì)小鼠體重增長(zhǎng)無(wú)影響。表明角鯊烯對(duì)小鼠亞硝酸鈉中毒性缺氧和急性腦缺血性缺氧具有保護(hù)作用。

4 結(jié)論

小鼠連續(xù)30 d給予受試物330、670、1 000 mg/kg，各組小鼠均生長(zhǎng)正常，無(wú)死亡，各劑量組小鼠體質(zhì)量與溶劑對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異。與兩對(duì)照組相比，深海角鯊烯軟膠囊20倍、30倍劑量組常壓耐缺氧時(shí)間和亞硝酸鈉中毒存活時(shí)間延長(zhǎng)，3個(gè)劑量組小鼠急性腦缺血后的喘氣時(shí)間均升高，根據(jù)《保健食品功能學(xué)評(píng)價(jià)程序與檢驗(yàn)方法規(guī)范》，按推薦劑量攝入角鯊烯，具有提高缺氧耐受力的功能。

［1］官波，鄭文誠(chéng).角鯊烯提取、純化極其應(yīng)用［J］.糧食與油脂，2010(2):44－46

［2］吳時(shí)敏.角鯊烯開發(fā)利用［J］.糧食與油脂，2001(1):36

［3］Lyon.C.K，Becker.R.Extraction and refining of oil from am-aranth seed［J］.Journal of The American Oil Chemists Society，1987，64(2):233 －236

［4］宋修儉，顧茂書，陳少龍，等.國(guó)產(chǎn)闊口真鯊魚肝油中脂肪酸和角鯊烯成分分析及含量測(cè)定［J］.中國(guó)海洋藥物，1994，13(4):26

［5］趙振東，孫震.生物活性物質(zhì)角鯊烯的資源及其應(yīng)用研究進(jìn)展［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2004，24(3):107 －112

［6］繆輝南，方旭東，沈先榮，等.深海鯊魚肝臟中的角鯊烯研究現(xiàn)狀與展望［A］.中國(guó)海洋生化學(xué)術(shù)會(huì)議論文薈萃集［C］.2005:75－89

［7］鄭悅，嵇揚(yáng).抗缺氧研究常用動(dòng)物模型及抗缺氧藥物［J］.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，26(2):170－173

［8］許瑞波，劉瑋煒，王明艷，等.角鯊烯的制備及應(yīng)用進(jìn)展［J］.山東醫(yī)藥，2005，45(35):69 －70.