陳 燁， 袁 瑾， 王新宏， 安 叡， 肖 娟， 張宜凡

(上海中醫(yī)藥大學(xué)，上海201203)

細(xì)胞色素P450(CYP450)酶系是參與各種體內(nèi)藥物代謝的重要組成部分。該酶可被藥物等外源物誘導(dǎo)或抑制，導(dǎo)致其水平和活性的改變，從而直接影響藥物在體內(nèi)的血藥濃度、動(dòng)力學(xué)變化以及后續(xù)生物學(xué)效應(yīng)。CYP450酶檢測主要有體內(nèi)和體外兩種方法［1］，Cocktail探針?biāo)幬锓ㄊ亲畛Ｓ玫捏w內(nèi)檢測法。它可以同時(shí)評(píng)價(jià)幾種藥物代謝酶的活性，即給予多種相對(duì)低劑量的探針?biāo)幬?，通過檢測生物樣本中每種探針?biāo)幬锏难獫{動(dòng)力學(xué)從而獲取多個(gè)代謝酶的活性信息［2-4］。利用Cocktail探針?biāo)幬锓y定催化特定底物的CYP450酶活性，可用于分析比較藥物不同配伍關(guān)系中酶活性的差異［5］。

葛根芩連湯出自張仲景的《傷寒論》，由葛根、黃芩、黃連及炙甘草四味中藥組成［6］，方中葛根為君藥，黃芩、黃連 (芩連)為臣藥，炙甘草為佐使藥。組方精簡，配伍嚴(yán)謹(jǐn)?，F(xiàn)代臨床應(yīng)用廣泛，常用于急、慢性腸炎、細(xì)菌性痢疾、II型糖尿病、小兒腹瀉等陽明里熱證［7-8］。本實(shí)驗(yàn)采用Cocktail探針?biāo)幬锓?，選擇咖啡因［9］、甲苯磺丁脲［10］、右美沙芬［11］、氯唑沙宗［12］和咪達(dá)唑侖［9］分別作為 CYP1A2、CYP2C6、CYP2D4、CYP2E1和CYP3A1/2 5種不同亞型酶的探針底物，研究葛根芩連湯全方及其不同配伍對(duì)5種亞型酶活性的作用，探尋其不同配伍對(duì)CYP450酶活性的影響，希冀為深入研究葛根芩連湯組方原理、配伍合理性和科學(xué)性奠定基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 儀器 SHIMADZU高效液相色譜儀，包括自動(dòng)進(jìn)樣器、真空脫氣機(jī) (日本島津公司);三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀，包括 ESI離子源和 Analyst version 1.4.2色譜工作站 (API 3000，AB，U．S．A);氮吹儀 (上海安譜科學(xué)儀器);Eppendorf Cen ANPEL DC-1trifuge 5415R小型高速冷凍離心機(jī) (艾本德中國有限公司);AL104電子天平 (瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司);QT—1漩渦混合器 (上海琪特分析儀器有限公司)。

1.2 藥品與試劑 對(duì)照品:甲苯磺丁脲 (tolbutamide)(批號(hào)100500-201001)、右美沙芬 (dextromethorphan) (批號(hào)100201-201003)、氯唑沙宗(chlorzoxazone)(批號(hào)100364-201001)、卡馬西平(carbamazepine)(批號(hào)100142-201004)、氯霉素(chloramphenicol)(批號(hào)130555-201002)均購自中國食品藥品檢定研究院;咖啡因 (caffeine)(批號(hào)201004)、咪達(dá)唑侖 (midazolam) (批號(hào)201001)均購自上海瑞齊生物科技有限公司。

試劑:乙腈、甲醇和甲酸均為HPLC級(jí) (美國Merck公司)，乙酸乙酯、無水乙醇和乙酸銨 (AR級(jí))購于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;雙蒸水，實(shí)驗(yàn)室自制。

1.3 藥材 葛根飲片Puerariae lobatae Radix，四川 (批號(hào)20100525);黃芩飲片Scutellariae Radix，河北 (批號(hào)20100805);黃連飲片Coptidis Rhizoma，四川 (批號(hào)20100720)，以上飲片均購于上海康橋中藥飲片有限公司。炙甘草飲片Glycyrrhizae Radix et Rhizoma preparatum cum melle，新疆 (批號(hào)20100705)，購于上海金橋養(yǎng)和堂藥店。上述飲片經(jīng)陳燕軍主管藥師鑒定，符合2010版《中國藥典》一部規(guī)定。

1.4 動(dòng)物 清潔級(jí)SD大鼠，體質(zhì)量 (200±20)g，雄性，合格證號(hào):SCXK(2008-0016)，由上海中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 Cocktail探針?biāo)幬锶芤旱闹苽?取探針?biāo)幬锟Х纫颉⒓妆交嵌‰?、右美沙芬、氯唑沙宗及咪達(dá)唑倫適量，精密稱定至同一容量瓶中，以0.9%氯化鈉注射液定容至刻度，配置成質(zhì)量濃度分別為0.209、0.104、0.205、0.103、0.109 mg/mL的混合探針?biāo)幬锶芤?，溶液于給藥前新鮮配制，用于大鼠尾靜脈注射。

2.2 藥液制備 按處方配比取葛根芩連湯(葛根∶黃芩∶黃連∶甘草為5∶3∶3∶2)各味藥材飲片，加8倍量水，葛根先煎20 min［13］，余藥共煎30 min，煎煮兩次，濾過，合并濾液，濃縮，制成每毫升含1 g生藥的藥液。葛根組、芩連組(黃芩和黃連)、甘草組樣品制備方法同上，最終定容到相同體積。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線及質(zhì)控樣品制備 精密配制并稀釋咖啡因質(zhì)量濃度至 11.6、29、58、290、580、1 160、2 320 ng/mL;精密配制甲苯磺丁脲1 020 ng/mL、右美沙芬216ng/mL、氯唑沙宗1 030 ng/mL、咪達(dá)唑侖120 ng/mL，分別同上稀釋至不同質(zhì)量濃度。取內(nèi)標(biāo)對(duì)照品適量，精密稱定后用甲醇溶液定容至1 mg/mL溶液，并稀釋制得1 μg/mL卡馬西平和氯霉素內(nèi)標(biāo)液。向空白血漿中加入一定量各待測物的對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)，即得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。

質(zhì)控樣品 (n=5)配制方法參照標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品制得低、中、高三個(gè)質(zhì)量濃度樣品，質(zhì)量濃度分別為 11.6、290、2 320 ng/mL(咖啡因);5.1、127.5、1 020 ng/mL(甲苯磺丁脲);1.1、27、216 ng/mL (右 美 沙 芬 );5.2、128.8、1 030 ng/mL(氯唑沙宗);0.6、15、120 ng/mL(咪達(dá)唑侖)。

2.4 分組及給藥 30只雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組6只，分別為全方組、葛根組、芩連組、甘草組、空白對(duì)照組。每日早晨空腹灌胃，給予相應(yīng)組別的湯劑15 mL/kg，空白對(duì)照組給予相同體積的生理鹽水。連續(xù)給藥7 d，均于實(shí)驗(yàn)前禁食12 h后，尾靜脈注射Cocktail混合探針?biāo)幬锶芤?，給藥量5 mL/kg，注射劑量為咖啡因1.0 mg/kg，甲苯磺丁脲0.5 mg/kg，右美沙芬1.0 mg/kg，氯唑沙宗0.5 mg/kg，咪達(dá)唑侖 0.5 mg/kg，給藥后0.083 3、0.25、0.5、1、1.5、2、4、8、12、24 h眼眶取血，8 000 r/min離心5 min，分離血漿。

2.5 樣品處理 100μL血漿中加入1μg/mL卡馬西平和氯霉素內(nèi)標(biāo)溶液各10μL，渦旋混合1 min，加入1 mL乙酸乙酯，渦旋3 min，12 000 r/min離心5 min(4℃)，移取上清液，N2吹干，殘留物加入流動(dòng)相100μL振蕩重組，12 000 r/min離心5 min(4℃)，取上清液進(jìn)樣。

2.6 LC-MS/MS測定條件

2.6.1 色譜條件 Inertsil ODS-SP色譜柱 (2.1 mm×100 mm，5μm);流動(dòng)相為水 (含5 mmol/L乙酸銨，A)-乙腈 (含0.1%甲酸，B)梯度洗脫(0～1.5 min，B:55%;1.5 min～2 min，B:55% ～95%;2 min～3 min，B:95%;3 min～3.5 min，B:95% ～55%;3.5 min～5 min，B:55%);體積流量0.3 mL/min;柱溫為室溫;進(jìn)樣量10μL。

2.6.2 質(zhì)譜條件 采用正負(fù)離子模式檢測，多反應(yīng)監(jiān)測模式 (MRM)測定。正離子模式內(nèi)標(biāo)為卡馬西平，負(fù)離子模式內(nèi)標(biāo)為氯霉素。主要質(zhì)譜參數(shù)為:氣簾氣 (CUR)流量8 L/min;霧化氣(NEB)流量8 L/min;碰撞氣 (CAD)流量12 L/min;離子噴霧電壓 (IS)2 000 V;離子源溫度(TEM)350℃;其它特征參數(shù)如下表1。

表1 混合探針?biāo)幬锛皟?nèi)標(biāo)質(zhì)譜參數(shù)Tab.1 Mass spectrum parameters of the probe drugs and two internal standards

3 方法學(xué)考察

3.1 系統(tǒng)專屬性試驗(yàn) 取大鼠空白血漿100μL，按照2.5項(xiàng)操作，得到空白血漿色譜圖;同樣操作得到混合探針?biāo)幬锶芤貉獫{色譜圖和大鼠尾靜脈給藥后1 h血漿色譜圖。結(jié)果表明，在測定條件下，樣品測定無干擾，方法專屬性高。

3.2 線性范圍考察 以待測物質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，待測物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積比值為縱坐標(biāo)，用加權(quán)最小二乘法進(jìn)行線性回歸，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程，結(jié)果表明各組分線性關(guān)系良好。結(jié)果見表2。

表2 線性關(guān)系結(jié)果Tab.2 Calibration curve，linear range and correlation coefficient

3.3 精密度和準(zhǔn)確度試驗(yàn) 取空白血漿100μL，配制低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的質(zhì)控 (QC)樣品，每一質(zhì)量濃度進(jìn)行五個(gè)樣本分析，連續(xù)測定3 d，以隨行標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算QC樣品中各成分的實(shí)測質(zhì)量濃度，根據(jù)QC樣品的各成分實(shí)測質(zhì)量濃度計(jì)算本法的日內(nèi)和日間精密度、準(zhǔn)確度。結(jié)果表明，本方法的高、中質(zhì)量濃度的樣品精密度RSD＜15%，準(zhǔn)確度RE＜15%;低質(zhì)量濃度樣品RSD＜20%，準(zhǔn)確度RE＜20%，符合《化學(xué)藥物臨床藥代動(dòng)力學(xué)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》相關(guān)要求。

3.4 基質(zhì)效應(yīng) 取低、中、高三個(gè)質(zhì)量濃度的QC樣品，每一質(zhì)量濃度進(jìn)行五個(gè)樣本分析。同時(shí)，另取空白血漿100μL，除不加標(biāo)準(zhǔn)溶液外，其它按2.5項(xiàng)下的方法操作，所得的殘留物加入相應(yīng)質(zhì)量濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液10μL，內(nèi)標(biāo)10μL，渦旋混合，進(jìn)樣分析，獲得相應(yīng)的峰面積。結(jié)果表明，本方法低中高3個(gè)質(zhì)量濃度樣品的RSD＜15%，樣品不受基質(zhì)干擾。

3.5 提取回收率試驗(yàn) 空白血漿中加入低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的QC樣品，按2.5項(xiàng)下的方法操作，測得血漿中待測成分和內(nèi)標(biāo)的峰面積;其與甲醇配制的低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的QC樣品的峰面積相比，即各成分的提取回收率。各成分在血漿樣品中的提取回收率分別為咖啡因75.7%～111.1%(RSD為5.7% ～10.1%)、甲苯磺丁脲75.9% ～94.1%(RSD為4.2% ～10.4%)、右美沙芬105.3% ～114.4%(RSD為7.4% ～12.1%)、氯唑沙宗98.8%～109.5% (RSD為8.1%～9.9%)、咪達(dá)唑侖 88.6% ～103.8% (RSD為6.5% ～10.3%)。

3.6 穩(wěn)定性考察試驗(yàn) 取低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度的QC樣品，在室溫下 (24℃)放置4 h，4℃保存24 h，在－70℃冰箱內(nèi)保存一個(gè)月，反復(fù)凍融 (三個(gè)冷凍－解凍循環(huán))，按2.5項(xiàng)下的方法處理，再進(jìn)行測定 (n=5)，結(jié)果表明各成分在上述條件下的穩(wěn)定性符合規(guī)定。

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

4.1 藥時(shí)曲線 大鼠靜脈注射Cocktail探針?biāo)幬锖笏鶞y得的各組分血藥濃度－時(shí)間數(shù)據(jù)用DAS軟件擬合，房室模型分析結(jié)果數(shù)據(jù)符合單房室模型，血藥濃度－時(shí)間曲線見圖1。

圖1 各組分血藥濃度藥時(shí)曲線Fig.1 Plasma concentration-time profiles of different compatibilities

4.2 藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù) 比較組方與空白組探針?biāo)幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)參數(shù)AUC值可推斷其對(duì)代謝酶活性的影響。若組方AUC值較空白組減小，說明組方能誘導(dǎo)代謝酶活性，其生物轉(zhuǎn)化率增加，血藥濃度降低;反之，若組方AUC值較空白組增大，則組方抑制代謝酶活性。從表3所得結(jié)果可以初步推測，葛根芩連湯全方能誘導(dǎo)大鼠 CYP2C6、CYP2D4的活性，抑制 CYP2E1的活性，對(duì)CYP1A2、CYP3A1/2無影響。葛根單方能誘導(dǎo)CYP2C6、CYP3A1/2活性，抑制大鼠 CYP2D4及CYP2E1活性，對(duì)CYP1A2無影響。芩連能誘導(dǎo)CYP2C6 的 活 性， 抑 制 CYP1A2、CYP2D4、CYP2E1的活性、對(duì)CYP3A1/2無影響。甘草能誘導(dǎo)CYP1A2、CYP2C6和 CYP2D4的活性，抑制CYP3A1/2的活性，對(duì)CYP2E1無影響。

表3 5種探針?biāo)幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)參數(shù) (±s，n=6)Tab.3 Pharmacokinetic parameters of five probe drugs(±s，n=6)

表3 5種探針?biāo)幬锼幋鷦?dòng)力學(xué)參數(shù) (±s，n=6)Tab.3 Pharmacokinetic parameters of five probe drugs(±s，n=6)

注:與空白組比較，*P＜0.05

底物/亞型酶 分組 t1/2/h AUC0－t/(μg·h·L－1) CL/(L·h－1·kg－1) MRT0－t /h咖啡因/CYP1A2 空白組 0.799±0.063 1 639.099±189．065 0.582±0.069 1.042±0.063*全方組 0.791±0.031 1 654.326±223．726 0.58±0.079 1.11±0.048葛根組 0.825±0.053 1 514.257±244．348 0.582±0.069 1.152±0.092芩連組 0.654±0.096* 2 071.949±228．581* 0.627±0.108 0.959±0.074甘草組 0.797±0.101 793.357±94．732* 1.159±0.189* 0.934±0.069甲苯磺丁脲/CYP2C6 空白組 8.128±0.460 10 315.411±153．207 0.422±0.003 6.082±0.719全方組 6.925±0.817 7 265.902±774．279* 0.057±0.005 7.843±0.709葛根組 6.561±0.499 7 985.303±1 285．381* 0.053±0.003 8.012±0.414*芩連組 4.425±0.452 6 693.134±359．103* 0.070±0.004 7.052±0.374*甘草組 4.590±0.191 5 635.793±163．038* 0.085±0.003 8.054±0.309*右美沙芬/CYP2D4 空白組 1.531±0.245 289.044±14．789 2.136±0.261 1.722±0.126全方組 0.390±0.026 121.341±23．786* 7.444±1.283 1.657±0.065葛根組 1.180±0.121* 337.647±40．135* 2.824±0.324 1.905±0.194*芩連組 0.923±0.172* 333.314±23．531* 2.841±0.229 1.470±0.136*甘草組 0.904±0.156 244.924±29．419* 3.848±0.425 1.609±0.061氯唑沙宗/CYP2E1 空白組 0.383±0.031 588.457±40．033 0.620±0.060 0.843±0.081全方組 0.325±0.022 700.591±111．469* 0.666±0.107 0.812±0.099葛根組 0.308±0.017* 738.575±102．343* 0.722±0.097 0.789±0.054芩連組 0.404±0.038 730.200±63．779* 0.619±0.099 0.829±0.116甘草組 0.345±0.048 614.598±80．612 0.713±0.125 0.973±0.053*咪達(dá)唑侖/CYP3A1/2 空白組 0.506±0.040 70.227±12．849 6.569±1.133 0.839±0.058全方組 0.374±0.055 70.246±9．063 6.440±0.838 0.849±0.070葛根組 0.443±0.046 47.875±4．387* 8.654±0.598 0.956±0.106*芩連組 0.453±0.013 75.500±14．774 5.506±0.323 0.776±0.071甘草組 0.256±0.029* 83.504±14．203* 8.551±1.208* 0.472±0.037*

5 討論

目前檢測肝藥物代謝酶主要有體內(nèi)和體外兩種方法。體外代謝法包括體外肝微粒體溫孵法、肝灌流法及肝組織切片法等。它是在體外模擬生理環(huán)境下進(jìn)行代謝反應(yīng)并對(duì)原形藥及代謝產(chǎn)物進(jìn)行分析的方法，該方法較為簡單，但有時(shí)不能全面反映體內(nèi)的綜合代謝情況，與生物體內(nèi)的真實(shí)代謝情況存在一定差異［14］。體內(nèi)代謝法是指服藥后經(jīng)過一段時(shí)間收集生物樣品，然后分析樣品中藥物及藥物代謝產(chǎn)物的方法。Cocktail探針?biāo)幬锓ㄊ求w內(nèi)代謝的主要方法，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果更符合真實(shí)代謝情況;可以同時(shí)檢測多種藥物代謝酶的活性;降低個(gè)體間和個(gè)體內(nèi)藥物代謝酶活性變異的影響。課題組前期采用體外肝微粒體溫孵法，初步研究了葛根芩連湯全方及其不同配伍組對(duì)體外肝微粒體亞型酶活性的影響，結(jié)果提示不同配伍組對(duì)CYP450酶具有一定的誘導(dǎo)或抑制效應(yīng)。

本實(shí)驗(yàn)在前期工作基礎(chǔ)上采用體內(nèi)Cocktail探針?biāo)幬锓?，深入研究葛根芩連湯全方及方中葛根組、芩連組及甘草組對(duì)5種CYP450亞型酶活性的影響。采用LC-MS/MS法檢測不同時(shí)間點(diǎn)的全血中各探針?biāo)幬锏臐舛龋肈AS2.0軟件計(jì)算其藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS19.0分析空白組與實(shí)驗(yàn)組各種探針AUC值的差別，評(píng)價(jià)各組藥物對(duì)CYP450亞型酶誘導(dǎo)或抑制的影響，方法較為可靠。

研究結(jié)果表明葛根芩連湯全方、葛根組、芩連組均對(duì)CYP2E1產(chǎn)生顯著的抑制作用，且葛根組的抑制作用較強(qiáng)，推測全方對(duì)CYP2E1的抑制作用主要來自君藥葛根。該方可減緩該亞型酶對(duì)藥物的代謝速率，一定程度上有助于體內(nèi)吸收。大鼠CYP2E1和人CYP2E1有很好的相關(guān)性［15］，此結(jié)果可為臨床用藥提供參考。全方對(duì)CYP1A2無顯著影響，推測可能由于甘草組誘導(dǎo)CYP1A2的活性而芩連組抑制其活性所致;同樣，全方對(duì)CYP3A1/2無顯著影響可能是葛根組的誘導(dǎo)作用和甘草組的抑制作用所致。

復(fù)方配伍中不同中藥構(gòu)成了復(fù)雜的相互作用體系，這些相互作用是復(fù)方整體效應(yīng)的重要基礎(chǔ)，藥物代謝酶是影響藥物體內(nèi)相互作用的主要因素。通過文獻(xiàn)［16-19］可知CYP450代謝酶不僅在藥物的代謝、降解和排泄中起著重要作用，并且對(duì)復(fù)方配伍研究具有重要意義。本研究從“藥物配伍-代謝”關(guān)系探討復(fù)方配伍機(jī)制，為深入認(rèn)識(shí)葛根芩連湯配伍機(jī)制提供事實(shí)依據(jù)，有利于更科學(xué)、更合理地指導(dǎo)臨床用藥。

［1］袁 靖，趙軍寧，李祖?zhèn)悾嗡幋x酶研究方法及中藥影響的研究進(jìn)展［J］．四川中醫(yī)，2007，25(6):33-35．

［2］Zhou H，Tong Z，McLeod J F．“Cocktail”approaches and strategies in drug development:valuable tool or flawed science［J］．J Clin Pharmacol，2004，44(2):120-134．

［3］Goh B C，Reddy N J，Dandamudi U B，et al．An evaluation of the drug interaction potential of pazopanib，an oral vascular endothelial growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor，using a modified Cooperstown 5+1 cocktail in patients with advanced solid tumors［J］．Clin Pharmacol Ther，2010，88(5):652-659．

［4］Mori K，Hashimoto H，Takkatsu H，et al．Cocktail-substrate assay system for mechanism-based inhibition of CYP2C9，CYP2D6，and CYP3A using human liver microsomes at an early stage of drug development［J］．Xenobiotoca，2009，39(6):415-422．

［5］張韶瑜，宋乃寧，樊慧蓉，等．痹祺膠囊配伍組分對(duì)體內(nèi)CYP450同工酶活性的影響［J］．中草藥，2011，42(8):1571-1575．

［6］王 立，趙 瑛．煎煮方式對(duì)葛根芩連湯中黃芩苷和小檗堿家犬體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)影響［J］．中成藥，2011，33(8):1326-1329．

［7］秦增祥．葛根芩連湯藥理與應(yīng)用［J］．中成藥，1992，14(4):38-39．

［8］鮑曉莊，施望達(dá)．小兒瀉必止治療202例嬰幼腹瀉［J］．中成藥，1989，11(11):22-23．

［9］張曉璐，樂 江．細(xì)胞色素P450的工具藥選擇及種屬差異的研究進(jìn)展［J］．中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志，2012，26(5):697-701．

［10］陳馬昆，王 睿．藥物代謝酶細(xì)胞色素P4502C9研究進(jìn)展［J］．中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)雜志，2004，6(9):625-627．

［11］郭 喻，汪暉人．細(xì)胞色素P450同工酶探針底物特異性的研究進(jìn)展［J］．中國藥理學(xué)通報(bào)，2007，23(7):851-854．

［12］Ha H R，Chen J，Krahenbuhl S，et al．Biotransformation of caffeine by eDNA-expressed human eytochromes P-450［J］．Eur J Clin Pharmacol，1996，49(4):309-15．

［13］崔向微，張貴君，李 慧．葛根芩連湯兩種配伍比例的化學(xué)藥效組分比較分析［J］．中成藥，2009，32(2):263-266．

［14］楊本坤，王秦軍，莫李立，等．藥物代謝體外模型的研究進(jìn)展［J］．廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2011，27(6):649-652．

［15］郭海方，鄒曉麗，許 卉，等．丹參酚酸A對(duì)大鼠肝微粒體細(xì)胞色素P450酶系的影響［J］．中國中藥雜志，2010，35(3):348-351．

［16］武琴園，魏玉輝，張進(jìn)文，等．六味地黃丸對(duì)大鼠肝CYP1A2及腸道P-gp活性的影響［J］．中成藥，2011，33(1):37-41．

［17］于春梅．細(xì)胞色素P450與中藥配伍［J］．中國中醫(yī)藥咨訊，2009，1(2):163．

［18］閆廣利，王喜軍，徐艷霞，等．基于藥物代謝酶和轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的中藥方劑配伍規(guī)律研究［J］．世界科學(xué)技術(shù)-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2008，10(5):25-28．

［19］陳衛(wèi)平，畢 蕾．藥物代謝酶在中藥配伍研究中的作用［J］．中國中藥雜志，2007，32(2):96-98．