李淑女

廣東省深圳市松崗人民醫(yī)院藥劑科，廣東深圳 518105

參苓白術(shù)散原方出自《太平惠民和劑局方》，由人參、白術(shù)、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山藥、砂仁、桔梗、蓮子肉等藥味組成，具有益氣健脾、滲濕止瀉之功效，臨床主要適用于脾虛濕盛證的治療[1]。近年來(lái)，有關(guān)參苓白術(shù)散的研究主要集中在對(duì)消化功能促進(jìn)、免疫功能提升等藥理作用方面，對(duì)其提高機(jī)體耐缺氧及抗運(yùn)動(dòng)性疲勞能力方面的研究尚無(wú)報(bào)道。本研究觀察了參苓白術(shù)散對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間、小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間、運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮及血乳酸含量等方面的影響，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

ICR 小鼠，清潔級(jí)，體重（20±2）g，由廣州中醫(yī)藥大學(xué)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（粵）2008-0019。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與材料

參苓白術(shù)散方中所需人參、白術(shù)、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山藥、砂仁、桔梗、蓮子肉等中藥均由深圳市松崗人民醫(yī)院藥劑科提供；血乳酸試劑盒，血尿素氮試劑盒，肝糖原試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供，批號(hào)分別為 20110526、20110612、20110620；UV-5100 型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海元析儀器有限公司產(chǎn)品。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 參苓白術(shù)散水提物的制備分別將人參、白術(shù)、茯苓、甘草、白扁豆、薏苡仁、山藥、砂仁、桔梗、蓮子肉等中藥藥材粉碎成粗粉，按質(zhì)量比 4∶4∶4∶4∶3∶2∶2∶2∶2∶2 配方，以蒸餾水回流提取2次，合并濾液，減壓濃縮呈按生藥質(zhì)量濃度計(jì)3.75、2.5、1.25 g/mL 的參苓白術(shù)散水提物，置4℃冰箱貯存，備用。

1.3.2 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的影響 取小鼠60 只，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，進(jìn)行適應(yīng)性負(fù)重游泳訓(xùn)練（于各鼠尾根部負(fù)荷其體重5%的鉛絲，放入水深30 cm、水溫25℃的水槽中游泳），每隔3 d 訓(xùn)練1次，共2次，篩選出游泳時(shí)間較為接近的小鼠40 只，隨機(jī)分為四組，即參苓白術(shù)散高、中、低劑量組和空白對(duì)照組，每組10 只。參苓白術(shù)散高、中、低劑量組小鼠分別以10 mL/kg 的給藥體積灌胃，給予40.0、20.0、10.0 g/kg 的參苓白術(shù)散水提物，空白對(duì)照組小鼠灌胃給予同體積蒸餾水，1次/d，連續(xù)14 d。末次給藥1 h 后，于各鼠尾部負(fù)荷其體重5%的鉛絲，進(jìn)行負(fù)重游泳實(shí)驗(yàn)，觀察并記錄各鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間，即自小鼠入水至口鼻沒(méi)入水下10 s 無(wú)抬頭的時(shí)間。

1.3.3 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿中尿素氮含量的影響動(dòng)物分組及給藥方法同“1.3.2”。小鼠末次給藥30 min 后，不負(fù)重置于水深 水溫 的水槽中游泳休息60 min 后立即摘眼球取血，肝素抗凝，2 500 r/min 離心15 min分離血漿，用于測(cè)定血漿中尿素氮含量。

1.3.4 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血中乳酸的影響 動(dòng)物分組及給藥方法同“1.3.2”。末次給藥30 min 后，于各鼠尾部負(fù)荷其體重5%的鉛絲，置于水深30 cm、水溫25℃的水槽中游泳10 min，休息20 min 后立即摘眼球取血，用于測(cè)定全血中乳酸含量。

1.3.5 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響 動(dòng)物分組及給藥方法同“1.3.2”。末次給藥30 min 后，立刻脫頸處死，摘取肝臟，用濾紙吸干血跡后，稱取約50 mg 肝臟組織，用于測(cè)定肝糖原含量。

1.3.6 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響 動(dòng)物分組及給藥方法同“1.3.2”。末次給藥30 min 后，將各鼠分別放入盛有15 g 鈉石灰的250 mL 廣口瓶?jī)?nèi)，立即以瓶口涂有凡士林的瓶塞密封瓶口，記錄各鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間（從放入瓶?jī)?nèi)到末次呼吸停止所需時(shí)間）。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，采用方差分析和LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的影響

參苓白術(shù)散低劑量組小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間略長(zhǎng)于空白對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而參苓白術(shù)散高、中劑量組小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間均顯著長(zhǎng)于空白對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的影響（±s，n=10）

表1 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠負(fù)重游泳力竭時(shí)間的影響（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 劑量（g/kg） 負(fù)重游泳力竭時(shí)間（min）空白對(duì)照組參苓白術(shù)散高劑量組參苓白術(shù)散中劑量組參苓白術(shù)散低劑量組-40.0 20.0 10.0 161.58±2.31 258.45±3.01*236.78±3.45*180.32±2.09

2.2 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮、血乳酸含量的影響

參苓白術(shù)散低劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮、血乳酸含量均略低于空白對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而參苓白術(shù)散高、中劑量組小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮、血乳酸含量均顯著低于空白對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜ 0.05）。見(jiàn)表2。

2.3 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響

參苓白術(shù)散低劑量組小鼠體內(nèi)肝糖原儲(chǔ)備量略高于空白對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而參苓白術(shù)散高、中劑量組小鼠體內(nèi)肝糖原儲(chǔ)備量均顯著高于空白對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表3。

2.4 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響

參苓白術(shù)散低劑量組小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間略高于空白對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；而參苓白術(shù)散高、中劑量組小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間均顯著高于空白對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.05）。見(jiàn)表4。

表2 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮、血乳酸含量的影響（±s，n=10）

表2 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)后血漿尿素氮、血乳酸含量的影響（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 劑量（g/kg） 乳酸（mmol/L） 尿素氮（mmol/L）空白對(duì)照組參苓白術(shù)散高劑量組參苓白術(shù)散中劑量組參苓白術(shù)散低劑量組-40.0 20.0 10.0 10.28±1.12 6.03±0.56*6.84±0.71*8.62±0.91 16.31±1.70 9.05±0.98*10.28±1.21*13.46±1.51

表3 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響（±s，n=10）

表3 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠肝糖原儲(chǔ)備量的影響（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 劑量（g/kg） 肝糖原（mg/g）空白對(duì)照組參苓白術(shù)散高劑量組參苓白術(shù)散中劑量組參苓白術(shù)散低劑量組-40.0 20.0 10.0 11.22±1.25 20.83±2.21*18.69±2.05*13.18±1.42

表4 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響（±s，n=10）

表4 參苓白術(shù)散對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響（±s，n=10）

注：與空白對(duì)照組比較，*P＜0.05；“-”表示無(wú)數(shù)據(jù)

組別 劑量（g/kg） 存活時(shí)間（min）空白對(duì)照組參苓白術(shù)散高劑量組參苓白術(shù)散中劑量組參苓白術(shù)散低劑量組-40.0 20.0 10.0 21.27±2.30 38.52±4.06*35.28±4.02*25.44±3.15

3 討論

中醫(yī)認(rèn)為，脾為后天之本，主運(yùn)化，為氣血生化之源，脾氣虛，則受納與健運(yùn)乏力，四肢肌肉無(wú)所稟受，則四肢乏力；脾氣旺盛，則谷氣自旺，化源不乏，肌肉得溫養(yǎng)，四肢則靈活矯健。參苓白術(shù)散方中人參、白術(shù)、茯苓為君，益氣健脾滲濕；山藥、蓮子為臣，助君藥健脾益氣，兼能止瀉；白扁豆、薏苡仁亦為臣藥，助君藥健脾滲濕；砂仁為佐藥，醒脾和胃；桔梗宣肺利氣、通調(diào)水道，又可載藥上行，甘草健脾和中、調(diào)和諸藥，共為佐使。諸藥合用，共奏益氣健脾、滲濕止瀉之功效[1]。

機(jī)體在劇烈運(yùn)動(dòng)或缺氧時(shí)，肌肉組織的供氧不能滿足體內(nèi)葡萄糖有氧氧化的需要，大量葡萄糖則通過(guò)無(wú)氧酵解途徑為機(jī)體提供能量，造成糖酵解產(chǎn)物乳酸在體內(nèi)的大量堆積，引發(fā)一系列生化反應(yīng)，進(jìn)而造成運(yùn)動(dòng)性疲勞[2-4]。同時(shí)，因劇烈運(yùn)動(dòng)造成機(jī)體由糖或脂肪分解而獲得的能量不足時(shí)，就會(huì)通過(guò)分解加蛋白質(zhì)補(bǔ)充能量，進(jìn)而造成蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物尿素含量的增加[5]。本研究結(jié)果顯示，參苓白術(shù)散水提物可顯著降低小鼠運(yùn)動(dòng)后的血中乳酸及尿素氮的含量，提示其可通過(guò)減輕小鼠運(yùn)動(dòng)后血乳酸堆積而產(chǎn)生抗運(yùn)動(dòng)性疲勞的作用，并可阻礙體內(nèi)蛋白質(zhì)分解供能的途徑。

機(jī)體劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)，在體內(nèi)肌糖原消耗的同時(shí)，肝糖原儲(chǔ)備量也降低。因此，體內(nèi)肝糖原儲(chǔ)備量的高低是衡量機(jī)體抗疲勞能力強(qiáng)弱的重要指標(biāo)[4]。本研究結(jié)果顯示，參苓白術(shù)散水提物可顯著提升小鼠體內(nèi)肝糖原的儲(chǔ)備量，提示其具有促進(jìn)小鼠肝糖原儲(chǔ)備的作用。

耐缺氧能力是間接反映抗疲勞能力的一項(xiàng)重要指標(biāo)[6]，本研究以小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間為觀察指標(biāo)，評(píng)價(jià)了參苓白術(shù)散對(duì)小鼠常壓耐缺氧能力的影響，結(jié)果提示，參苓白術(shù)散可延長(zhǎng)小鼠常壓缺氧情況下存活時(shí)間。提示其可以增強(qiáng)小鼠機(jī)體攜氧和利用氧的能力。

綜上所述，參苓白術(shù)散具有延長(zhǎng)小鼠常壓耐缺氧存活時(shí)間、提高小鼠體內(nèi)有氧代謝水平及抗疲勞的藥理作用，而有關(guān)參苓白術(shù)散耐缺氧及抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用的具體藥效成分及作用機(jī)制尚有待于進(jìn)一步研究。

[1]鄧中甲.方劑學(xué)[M].北京：中國(guó)中醫(yī)藥出版社，2003：153.

[2]李鵬，胡露，張勇，等.五麥黨黃湯對(duì)小鼠抗疲勞、耐缺氧和抗寒熱能力的影響[J].西南國(guó)防醫(yī)藥，2012，22（1）：16-18.

[3]胡彥武.東北刺人參莖耐缺氧及抗運(yùn)動(dòng)性疲勞作用研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，39（6）：3230.

[4]夏星，鐘振國(guó)，廖林枝，等.刺梨提取物影響小鼠抗疲勞及耐缺氧能力的研究[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2012，23（7）：1664-1666.

[5]施溯筠，李秀國(guó).榆黃蘑飲料對(duì)小鼠抗疲勞、耐缺氧和抗氧化作用的影響[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21（7）：1806.

[6]彭亮，覃輝艷，趙鵬，等.肉蓯蓉茶對(duì)小鼠抗疲勞和耐缺氧能力的影響[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué)，2011，38（12）：2362-2364.