金孟英 殷詠梅

1.浙江省青田縣人民醫(yī)院，浙江青田 323900；2.南京醫(yī)科大學(xué)，江蘇南京 210029

乳腺癌在婦科中屬于常見疾病，在臨床中具有較高的發(fā)病率，嚴(yán)重的影響女性的身體健康，盡早的診斷和治療，對提高乳腺腫瘤患者的生活質(zhì)量具有較大的意義[1]。本研究對乳腺腫瘤的超聲彈性成像和肌成纖維細(xì)胞的分布情況進(jìn)行深入的探究，判斷其是否能夠準(zhǔn)確的乳腺腫瘤，從而為臨床盡早診斷乳腺腫瘤和治療提供參考，具體分析如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取浙江省青田縣人民醫(yī)院（以下簡稱“我院”）2010年1月～2011年6月治療的乳腺腫塊患者200例。乳腺良性病變 98 例為良性組，年齡 30～68 歲，平均（54.3±2.4）歲，其中纖維腺瘤患者60例，硬化性腺病患者20例，導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤患者18例；乳腺癌病變102例為惡性組，年齡為34～79歲，平均（53.8±2.6）歲。兩組患者一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 超聲檢查方法 本次研究選取EUB-8500型彩色多普勒超聲診斷儀，且配備彩色超聲彈性成像技術(shù)，探頭的頻率7.5～13.0 MHz。本研究所有患者均在術(shù)前給予常規(guī)超聲診斷和超聲彈性成像檢查，其中主要包括腫瘤的置和大小以及縱橫比與形態(tài)、邊界等，對超聲彈性成像檢查情況進(jìn)行評分，并將檢查的圖片進(jìn)行保存，由2名至少工作10年以上且經(jīng)驗(yàn)豐富的醫(yī)師進(jìn)行觀察與判斷[2]。

1.2.2 免疫組織化學(xué)法 本次研究對于乳腺間質(zhì)CD34和平滑肌肌動(dòng)蛋白（SMA）表達(dá)采取免疫組織化學(xué)進(jìn)行檢測[3]。首先，將選取的新鮮活檢組織給予10.0%甲醛進(jìn)行固定，并采取梯度酒精進(jìn)行脫水處理，采取二甲苯透明和石蠟的包埋處理。然后，將石蠟切片進(jìn)行HE染色，并且在每張切片滴加相應(yīng)對應(yīng)的一抗CD34和SMA。最后，進(jìn)行DAB顯色和蘇木精復(fù)染處理，并在顯微鏡下進(jìn)行觀察與判斷。

1.3 評定標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 彈性成像評分 本次研究對于彈性成像評分主要采取7分法進(jìn)行評估[4]：①1分：腫塊的整體顯示為綠色；②2分：腫塊顯示為綠色與藍(lán)色相間，且呈現(xiàn)馬賽克的形狀，主要以綠色為主；③3分：腫塊的中心顯示藍(lán)色，而周邊顯示為綠色；④4分：腫塊顯示為綠色與藍(lán)色相間，且呈現(xiàn)馬賽克的形狀，主要以藍(lán)色為主；⑤5分：腫塊完全呈現(xiàn)藍(lán)色；⑥6分：腫塊的周邊和腫塊的內(nèi)部均呈現(xiàn)藍(lán)色，只有腫塊內(nèi)部出現(xiàn)小區(qū)域的綠色；⑦7分：腫塊的周邊均呈現(xiàn)為藍(lán)色。惡性：彈性成像評分＞5分；良性：彈性成像評分≤5分。

1.3.2 CD34和α-SMA光鏡觀察方法 在高倍的光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行隨機(jī)的選取10個(gè)視野（400×）進(jìn)行觀察，并且每個(gè)視野選取計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞，并采取雙盲法進(jìn)行觀察[5]。①0分：染色細(xì)胞計(jì)數(shù)＜5.0%；②1分：染色細(xì)胞計(jì)數(shù)5.0%～＜25.0%；③2分：染色細(xì)胞計(jì)數(shù) 25.0%～＜75.0%；④3分：染色細(xì)胞計(jì)數(shù)≥75.0%。而陽性細(xì)胞染色的強(qiáng)度：①0分：細(xì)胞不顯色或者顯色不清；②1分：細(xì)胞顯示為淺黃色；②2分：細(xì)胞顯示為棕黃色；③3分：細(xì)胞顯示為深棕色。總積分=（染色細(xì)胞計(jì)數(shù)的評分+染色強(qiáng)度的評分）/2。（-）：積分＜0.5分；（+）：積分在 0.5～1.5 分之間；（++）：積分＞1.5 分。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 19.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩獨(dú)立樣本的計(jì)量資料采用u檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率表示，采用χ2檢驗(yàn)。相關(guān)性采取Spearman分析。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 彈性成像評分

惡性組的彈性成像中觀察腫塊均顯示為藍(lán)色，評分為（7.0±0.3）分，而良性組的彈性成像中觀察腫塊大部分顯示為綠色，腫塊內(nèi)部顯示極少的藍(lán)色，評分為（2.2±0.4）分，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（u=11.2013，P＜0.05）。

2.2 CD34和α-SMA定位

良性組中CD34蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)中，α-SMA蛋白主要定位于導(dǎo)管肌的上皮細(xì)胞中；在惡性組中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。

2.3 CD34和α-SMA表達(dá)

惡性組CD34表達(dá)水平低于良性組，而α-SMA表達(dá)水平明顯高于良性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者CD34和α-SMA表達(dá)水平對比分析（例）

2.4 CD34和α-SMA表達(dá)與彈性成像相關(guān)性分析

CD34表達(dá)和彈性成像呈負(fù)相關(guān)性（r=-0.124，P＜0.05）；α-SMA表達(dá)和彈性成像呈正相關(guān)性（r=0.132，P＜0.05）。

3 討論

超聲彈性成像是一種新型的超聲診斷技術(shù)，這種診斷技術(shù)比傳統(tǒng)的超聲診斷更加全面，能夠?qū)δ[瘤和擴(kuò)散疾病進(jìn)行成像觀察[6]。在臨床中已經(jīng)應(yīng)用到乳腺和甲狀腺以及前列腺等疾病的診斷中，而且具有較好的診斷效果[7]。臨床中采取這種診斷方法中形成的彈性成像主要是因腫瘤的硬度不同而產(chǎn)生的一種差異，繼而顯示不同的圖像[8]。這種診斷方法主要是依據(jù)不同組織間的彈性系數(shù)和組織發(fā)生變形的程度進(jìn)行超聲探測，并將其轉(zhuǎn)變?yōu)閷?shí)時(shí)的彩色圖像[9]。一般彈性系數(shù)越小，受壓程度大則顯示為紅色；而彈性系數(shù)越大，受壓程度小則顯示為藍(lán)色；彈性系數(shù)處于中等水平，一般顯示為綠色。因此，臨床中常常采取圖像的色彩進(jìn)行判斷組織的硬度情況。這種診斷方法有效的拓寬了傳統(tǒng)超聲診斷的不足，并更形象和生動(dòng)的顯示病變。

隨著人們對乳腺腫瘤的不斷研究，發(fā)現(xiàn)癌間質(zhì)中的肌成纖維細(xì)胞是決定整個(gè)腫瘤硬度的重要因素[10]。而且其生物的學(xué)特性也不同于正常乳腺組織中的間質(zhì)成纖維細(xì)胞。因此，臨床中可以依據(jù)α-SMA的表達(dá)情況進(jìn)行判斷肌成纖維細(xì)胞是否在腫瘤中，從而判斷其在腫瘤中的分布特征[11]。因此，臨床中分析α-SMA的表達(dá)與超聲彈性成像的相關(guān)性，即可了解肌成纖維細(xì)胞和超聲彈性成像之間的關(guān)系。由于在α-SMA也有可能在其他的組織中得到表達(dá)，因此需要進(jìn)一步的采取輔助指標(biāo)進(jìn)行觀察，從而更好的定位。而CD34屬于一種穿膜的糖蛋白，一般主要出現(xiàn)造血前驅(qū)細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞等[12]。臨床中有資料顯示，在乳腺癌間質(zhì)細(xì)胞中CD34將失去表達(dá)，而α-SMA將得到大量的表達(dá)，并且向肌纖維細(xì)胞進(jìn)行分化。同時(shí)也有資料顯示，在硬化性乳腺疾病中，CD34蛋白將得到大量的表達(dá)，且分布在纖維細(xì)胞中。因此，本次的臨床研究選取CD34和α-SMA進(jìn)行綜合評估，從而避免干擾[13]。

通過本次的臨床研究分析，在良性組中CD34蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)中，α-SMA蛋白主要定位于導(dǎo)管肌的上皮細(xì)胞中；在惡性組中CD34蛋白主要定位于血管中，α-SMA蛋白主要定位于細(xì)胞質(zhì)中。由此分析，在乳腺惡性腫瘤中α-SMA蛋白得到大量的表達(dá)，進(jìn)一步的分析出肌成纖維細(xì)胞在乳腺惡性腫瘤中得到大量的表達(dá)。并且本組的資料還顯示，CD34的表達(dá)和彈性成像呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性（r=-0.124，P<0.05）；α-SMA的表達(dá)和彈性成像呈現(xiàn)正相關(guān)性（r=0.132，P<0.05）。由此分析，在乳腺腫瘤中超聲彈性成像的評分越高，則表示α-SMA蛋白在乳腺腫瘤中得到大量的表達(dá)[14]。進(jìn)一步的分析，超聲彈性成像的評分越高，則表示肌成纖維細(xì)胞在乳腺腫瘤中得到大量的表達(dá)。因此，臨床中可以采取超聲彈性成像進(jìn)行判斷肌成纖維細(xì)胞的分布情況。由于肌成纖維細(xì)胞屬于非轉(zhuǎn)化的細(xì)胞，常常和腫瘤細(xì)胞相比，該細(xì)胞的基因組相對比較穩(wěn)定，且不容易出現(xiàn)抗原丟失的情況發(fā)生。因此，這也為臨床中治療乳腺腫瘤提供新的思路。

綜上所述，臨床中可以采取超聲彈性成像進(jìn)行判斷肌成纖維細(xì)胞在乳腺腫瘤中的表達(dá)情況。而且超聲彈性成像能夠?yàn)榕R床中乳腺癌的肌成纖維細(xì)胞靶向治療提供科學(xué)的依據(jù)，并且對乳腺腫瘤的預(yù)后也具有一定的意義[15]。因此，超聲彈性成像技術(shù)對于乳腺腫瘤的診斷和臨床治療均具有一定的意義。

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