孫偉娜 陳院朝 王升 蔡文杰 齊慧麗 吳莎莎

多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種起源于B細(xì)胞系的惡性腫瘤,其特征為產(chǎn)生單克隆免疫球蛋白的異常漿細(xì)胞增多, 并在骨髓內(nèi)惡性增殖, 導(dǎo)致相關(guān)器官或組織損傷, 產(chǎn)生臨床癥狀［1］。MM在造血系統(tǒng)腫瘤中占10%, 目前仍然是一種無法治愈的疾病, 為了探討該腫瘤的發(fā)病機(jī)制, 作者對30例多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8等多項(xiàng)指標(biāo)的表達(dá)水平進(jìn)行了分析。

1 資料與方法

1.1. 一般資料 2009年1月～2013年5月本院收治的多發(fā)性骨髓瘤患者30例, 其診斷均符合《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》［2］。男23例, 女7例, 中位年齡為58(42～78)歲, 正常對照為20例正常健康者, 男15例, 女5例, 中位年齡為55(40～65)歲。

1.2 試劑和儀器 鼠抗人CD45-PerCP、CD38-PE、CD138-FITC抗體及溶血素均購自美國Beckman-Coulter公司, 流式細(xì)胞儀為Cytomics FC 500 MPL(美國Beckman-Coulter公司產(chǎn)品)；特殊蛋白分析儀及試劑均購自國賽公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法 實(shí)驗(yàn)管加入CD45-PerCP、CD38-PE、CD138-FITC抗體10 μl, 對照管加入CD45-PerCP、CD38-PE、CD138-FITC抗體10 μl同型對照。每管加入肝素抗凝的骨髓液50 ul,充分混勻, 常溫避光孵育30 min, 加溶血素500 μl混勻37℃至透亮為止, PBS洗滌兩次, 上機(jī)檢測。在CD45/SSC 散點(diǎn)圖上選定可疑細(xì)胞群, 進(jìn)行檢測, 以所占比率>20為陽性表達(dá)。免疫球蛋白(IgG、游離的單克隆性κ、λ輕鏈、β2微球蛋白嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析, 對正態(tài)分布的數(shù)值變量以(x-±s)表示, 兩組間比較采用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)率明顯高于正常對照組骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)率 , 免疫球蛋白(IgG、游離的單克隆性κ、λ輕鏈、β2微球蛋白明顯高于正常對照組。見表1、表2及圖1、圖2。

表1 多發(fā)性骨髓瘤(MM)及正常對照組骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)率 (n，±s)

表1 多發(fā)性骨髓瘤(MM)及正常對照組骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)率 (n，±s)

注：a, 與正常對照組比較, P<0.01

組別 例數(shù) 陽性率(%)多發(fā)性骨髓瘤組 30 85.36±13.24a正常對照組 20 5.12±3.32

表2 多發(fā)性骨髓瘤(MM)及正常對照組外周血免疫球蛋白、單克隆性κ、λ輕鏈、β2微球蛋白含量水平( ±s, g/L)

表2 多發(fā)性骨髓瘤(MM)及正常對照組外周血免疫球蛋白、單克隆性κ、λ輕鏈、β2微球蛋白含量水平( ±s, g/L)

注：a與正常對照組比較, P<0.01

組別 IgG IgA IgM κ λ β2MG MM 組 54.36±15.32a 30.43±14.11a 41.25±25.31a 15.69±8.27a 13.68±9.36a 10.23±7.59a對照組 10.99±5.89 1.61±1.45 1.50±1.10 3.22±1.22 1.75±0.65 1.25±1.25

圖1 CD38表達(dá)陽性

圖2 CD138表達(dá)陽性

3 討論

作者采用流式細(xì)胞儀對30例多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者進(jìn)行了骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8的檢測, 結(jié)果發(fā)現(xiàn)多發(fā)性骨髓瘤(MM)患者漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)水平明顯高于正常對照組骨髓漿細(xì)胞CD3+8CD13+8表達(dá)水平, 與秦燕等［3］研究結(jié)論相同。CD138是跨膜硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族成員, Garcia-Sanz等［4］研究發(fā)現(xiàn)CD138在骨髓瘤細(xì)胞的陽性率為100%, 可以作為分離骨髓瘤細(xì)胞相對特異的指標(biāo)。免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM) 或游離的單克隆性κ、λ輕鏈、β2微球蛋白外周血含量明顯高于正常對照組, 亦可以作為輔助診斷和療效的觀察指標(biāo)。

［1］ Kyle RA, Rajkumar SV . Multiple Myeloma. N Engl T Med, 2008,111(6): 2962-2972.

［2］ 張之南, 沈悌.血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn).第3 版.北京：科學(xué)出版社, 2007:19.

［3］ 秦燕,丁潤生,陸偉,等.多參數(shù)流式細(xì)胞術(shù)在多發(fā)性骨髓瘤診斷中的價值. 交通醫(yī)學(xué), 2009,23(2):137-139.

［4］ Garcia-Sanz R, Orfao A, Gonzalez M, et al.Primary plasma cell leukemia：clinical immunophenotyopic DNA ploidy and cytogenetic characteristics. Blood, 1999,93(3):1032-1037.