梁 雪 張佩生 高 瑜 (鄭州大學(xué)第五附屬醫(yī)院心內(nèi)二科，河南 鄭州 450052)

近年來(lái)學(xué)者提出了心-腎機(jī)制、心-周?chē)h(huán)機(jī)制、神經(jīng)體液機(jī)制及細(xì)胞因子學(xué)說(shuō)等來(lái)試圖解釋慢性心力衰竭病變的機(jī)制〔1〕，其理論的共同特征是病變?cè)谶M(jìn)展中多種相關(guān)細(xì)胞因子參與，使心臟和內(nèi)環(huán)境相關(guān)的動(dòng)態(tài)平衡失調(diào)。研究證實(shí)血清中親環(huán)素(CypA)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、同型半胱氨酸(Hcy)和半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(CystatinC)表達(dá)的失調(diào)在心血管疾病中的作用〔2，3〕。但是四者聯(lián)合檢測(cè)在老年人慢性心力衰竭病變進(jìn)展時(shí)的作用及相關(guān)性尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)探討慢性心力衰竭老年患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年1月至2012年6月我院確診為慢性心力衰竭老年患者97例為觀察組。排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有嚴(yán)重感染;②伴有惡性腫瘤;③伴有肺、腎及四肢疾病的患者。其中男52例，女45例，年齡60～83〔平均(66.0±6.5)〕歲。收集同期在我院進(jìn)行健康檢測(cè)，認(rèn)定為各器官功能正常的健康老年人79例作為對(duì)照組，其中男40例，女39例，年齡60～78〔平均(65.5±6.9)〕歲。

1.2 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的檢測(cè) 觀察組于確診后的次日清晨抽取靜脈血10 ml，對(duì)照組常規(guī)抽取清晨靜脈血10 ml，分離血清后進(jìn)行蛋白的檢測(cè)。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC試劑盒均購(gòu)自北京中杉金橋公司，檢測(cè)均應(yīng)用ELISA法，并由主管檢驗(yàn)師完成，減少誤差，嚴(yán)格質(zhì)量控制。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進(jìn)行方差分析或t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)比較與對(duì)照組比較，觀察組CypA、ET-1和Hcy高表達(dá)，而CystatinC低表達(dá)(P ＜0.01，P ＜0.001)，見(jiàn)表1。

2.2 觀察組中不同心功能分級(jí)患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá) 隨著心功能分級(jí)的增加，血清中cypA、ET-1和Hcy的表達(dá)明顯升高，而血清中CystatinC的表達(dá)明顯下降(P＜0.05，P＜0.01)。見(jiàn)表2。

2.3 觀察組患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC表達(dá)的相關(guān)性分析 觀察組患者血清中CypA和ET-1(r=0.45，P=0.012 0)、CypA 和 Hcy(r=0.41，P=0.010 4)、ET-1 和 Hcy(r=0.43，P=0.018 2)的表達(dá)呈正相關(guān)性;Hcy和CystatinC的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性(r= －0.47，P=0.018 2)。

表1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)比較(ng/L，±s)

表1 兩組血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)比較(ng/L，±s)

分組 n CypA t值 P值 ET-1 t值 P值 Hcy t值 P值 CystatinC t值 P值觀察組 97 105.14±30.25 13.43 0.000 4 79.51±12.23 10.47 0.009 7 17.79±4.51 16.87 ＜0.000 1 0.96±0.2915.47 0.000 1對(duì)照組 79 50.68±19.61 46.69±10.50 7.81±2.49 1.87±0.96

表2 觀察組不同心功能分級(jí)患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)比較(ng/L，±s)

表2 觀察組不同心功能分級(jí)患者血清中CypA、ET-1、Hcy和CystatinC的表達(dá)比較(ng/L，±s)

心功能分級(jí) n CypA F值 P值 ET-1 F值 P值 Hcy F值 P值 CystatinC F值 P值Ⅱ 37 89.13±20.37 10.24 0.008 0 68.71±17.61 8.78 0.012 0 14.69±6.54 11.37 0.007 4 1.14±0.35 9.47 0.009 7Ⅲ 31 100.23±27.94 80.75±14.42 16.53±5.84 0.94±0.26Ⅳ 29 125.68±31.43 98.65±20.32 20.86±6.51 0.82±0.26

3 討論

CypA是一種具有趨化功能的細(xì)胞因子，能夠趨化損傷因子向炎癥部位的聚集。CypA還可以促進(jìn)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶的活性，并通過(guò) PI3K的作用，調(diào)節(jié)新生血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的生長(zhǎng)和發(fā)育。當(dāng)體內(nèi)細(xì)胞或組織中出現(xiàn)明顯的氧化反應(yīng)和較強(qiáng)應(yīng)激時(shí)，受損傷的細(xì)胞分泌CypA增加，使內(nèi)環(huán)境中CypA的表達(dá)均升高，而心力衰竭在病變進(jìn)展時(shí)會(huì)出現(xiàn)明顯的氧化反應(yīng)，因此認(rèn)為心力衰竭時(shí)CypA的表達(dá)升高。CypA在作用過(guò)程中可能與生長(zhǎng)因子可能具有共同的信號(hào)通路位點(diǎn)，并能激活ERK1/2，增加DNA的合成，抑制細(xì)胞的凋亡。ET-1是由內(nèi)皮細(xì)胞合成和釋放的21個(gè)氨基酸構(gòu)成的多肽，是已知最強(qiáng)的縮血管物質(zhì)之一，其中心力衰竭中也有明顯的促進(jìn)作用〔4〕。Hcy是甲硫氨基酸轉(zhuǎn)甲基后生成的中間代謝產(chǎn)物，Hcy水平升高對(duì)血管內(nèi)皮有損害，而且通過(guò)多種途徑促進(jìn)血管病變的發(fā)生〔5〕。CystatinC在有核細(xì)胞均有表達(dá)，可以參與細(xì)胞內(nèi)外蛋白水解的調(diào)控，保護(hù)細(xì)胞免受不適當(dāng)?shù)膬?nèi)源性或外源性蛋白酶水解〔1〕。有研究認(rèn)為CystatinC也是重要的組織蛋白酶蛋白酶抑制劑，在動(dòng)脈壁蛋白溶解和抗蛋白溶解活性平衡中發(fā)揮重要作用，并參與血管壁和細(xì)胞外基質(zhì)產(chǎn)生和降解的動(dòng)態(tài)平衡，對(duì)心力衰竭有重要的調(diào)節(jié)作用〔6〕。

本研究提示四種蛋白異常表達(dá)與心力衰竭的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC可能具有協(xié)同正向作用，也提示四種蛋白在疾病進(jìn)展中可能存在明顯的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。CypA激活后誘導(dǎo)3個(gè)重要的生物學(xué)反應(yīng)及過(guò)程:首先，分泌到細(xì)胞外的CypA和ET-1刺激VSMC的ERK1/2、AKt和JAK磷酸化，引起下游NFκB通路激活，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞的大量增生，同時(shí)放大活性氧(ROS)的產(chǎn)生。其次，CypA也是直接的炎癥細(xì)胞趨化物質(zhì)，可誘導(dǎo)炎癥細(xì)胞分泌Hcy、白細(xì)胞介素(IL)-6和IL-12，并可以有效地通過(guò)活化NFκB通路，刺激單核巨噬細(xì)胞的表達(dá)，并通過(guò)激活基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)調(diào)節(jié)蛋白水解活性，為炎癥細(xì)胞遷移創(chuàng)造條件。CypA、ET-1、Hcy和CystatinC是心力衰竭級(jí)聯(lián)反應(yīng)過(guò)程中的一部分，但是其調(diào)節(jié)的具體機(jī)制尚不完全清楚。也有研究認(rèn)為Hcy和CystatinC可能通過(guò)調(diào)節(jié)血管內(nèi)皮細(xì)胞合成和降解一氧化氮，影響心肌的舒張功能〔7〕，或者通過(guò)對(duì)氧化作用的調(diào)節(jié)，使心肌細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化，對(duì)心肌細(xì)胞形成損傷〔8〕。

總之，老年慢性心力衰竭患者血清中 CypA、ET-1、Hcy和CystatinC異常表達(dá)，四者的協(xié)同作用在疾病的發(fā)展中具有重要促進(jìn)作用，聯(lián)合檢測(cè)可能對(duì)判斷病變程度有一定價(jià)值。

1 胡 欣，徐 巖，史學(xué)功，等.CystatinC、Hcy及TNF-α在慢性心力衰竭患者血清中的表達(dá)變化〔J〕.中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2006;16(23):3604-6.

2 楊玉雯，王德國(guó)，王 新，等.老年心力衰竭患者血漿CGRP和ET-1水平的相關(guān)性分析〔J〕.實(shí)用老年醫(yī)學(xué)，2005;19(4):187-8.

3 張 永，張友亮，黃宇理.血漿脂聯(lián)素、同型半胱氨酸與慢性心力衰竭關(guān)系的分析〔J〕.中華全科醫(yī)學(xué)，2011;9(8):1244-5.

4 胡詠梅，趙思勤，李 秋，等.慢性心力衰竭患者血漿腦鈉肽和內(nèi)皮素-1水平與血流動(dòng)力學(xué)的相關(guān)性〔J〕.臨床心血管病雜志，2006;22(11):672-4.

5 孫云鵬，郭 宏.心力衰竭患者同型半胱氨酸和基質(zhì)金屬蛋白-9的相關(guān)性研究〔J〕.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2011;32(4):2248-9.

6 張 良，周勝華，方臻飛，等.慢性心力衰竭患者胱抑素C的變化及意義〔J〕.現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2010;10(7):1291-3.

7 張書(shū)敏，王永梅，杜貽萌，等.胱抑素C對(duì)大鼠心肌成纖維細(xì)胞增殖的影響〔J〕.山東大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)，2010;48(10):9-13.

8 張紹武，寧 潔.心力衰竭患者血清N端腦鈉肽前體和同型半胱氨酸的測(cè)定及臨床意義〔J〕.陜西醫(yī)學(xué)雜志，2011;40(8):979-80.