亢玉靜，郎明遠(yuǎn)，趙 文

(大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院遼寧省水生生物學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧大連 116023)

生物體在正常的新陳代謝過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)會(huì)產(chǎn)生少量的自由基，參與了機(jī)體內(nèi)多種生理過(guò)程(如機(jī)體防衛(wèi)、某些物質(zhì)的合成等)，具有重要的生理功能。但是在病理或逆境下，體內(nèi)產(chǎn)生的活性氧大量積累，打破了細(xì)胞內(nèi)原有的動(dòng)態(tài)平衡狀態(tài)，將會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生損傷，必須及時(shí)將其清除。在長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，生物體內(nèi)產(chǎn)生了一些物質(zhì)能夠清除體內(nèi)的活性氧，其中起重要作用的是抗氧化酶類(lèi)。

1 活性氧自由基的來(lái)源及其作用

所有的需氧生物在新陳代謝過(guò)程中，體內(nèi)細(xì)胞都會(huì)產(chǎn)生一定的自由基(free radical)，即具有不成對(duì)電子的分子、原子、離子和基團(tuán)。其化學(xué)性質(zhì)極為活潑，易于失去電子(氧化)或獲得電子(還原)，特別是氧化作用強(qiáng)，故具有強(qiáng)烈的引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化的作用。在體外，產(chǎn)生自由基的方式有很多種，比如加熱、紫外光照射、電磁輻射、氧化還原反應(yīng)等，一旦生物體內(nèi)生成過(guò)多的自由基，而機(jī)體本身對(duì)自由基的防御能力不足時(shí)，就可引起生理變化。自由基包括超氧陰離子自由基、羥自由基、脂氧自由基、一氧化氮自由基等，活性氧自由基對(duì)生物機(jī)體可產(chǎn)生一系列的損傷，例如攻擊多聚不飽和脂肪酸，引起細(xì)胞膜發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化，從而改變生物膜結(jié)構(gòu)和功能;通過(guò)破壞蛋白質(zhì)的巰基和氨基的結(jié)構(gòu)，可引起蛋白質(zhì)變性、交聯(lián)，喪失酶的活性，而損傷DNA還可導(dǎo)致基因突變。因此，生物體內(nèi)活性氧的生成與清除的平衡對(duì)生物體新陳代謝是相當(dāng)重要的。

2 生物體對(duì)自由基的防御—抗氧化酶系

為了防止自由基對(duì)生物體的損害作用，在需氧生物體內(nèi)進(jìn)化了一種有效的防御機(jī)制［1］，一是酶促反應(yīng)，即具有特異性的抗氧化酶系統(tǒng)，如超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶等;另一種是非酶促反應(yīng)，主要是一些具有抗氧化作用的抗氧化劑，包括維生素E、維生素C、谷胱甘肽、類(lèi)胡蘿卜素、膽紅素等。

抗氧化酶系［2］主要包括超氧化物歧化酶(SOD)、過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GPX)和谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶(GST)等。超氧化物歧化酶(SOD)［3］是廣泛存在于動(dòng)物、植物和微生物中的具有核基因編碼的一類(lèi)含有金屬元素的氧化還原酶類(lèi)。SOD是目前發(fā)現(xiàn)的唯一以超氧陰離子自由基(O2－)為底物的酶，可催化O2－轉(zhuǎn)化為H2O2和O2，從而清除O2－，在維持生物機(jī)體內(nèi)的自由基產(chǎn)生與消除的動(dòng)態(tài)平衡中起著極其重要的作用。SOD按其分子所含金屬輔基的不同可以分為3類(lèi):Cu，Zn-SOD分布于哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞和胞液中;Mn-SOD存在于線(xiàn)粒體中;Fe-SOD主要見(jiàn)于細(xì)菌中。作為免除自由基損傷的重要抗氧化酶，SOD在生物的新陳代謝中起著不可忽視的作用，如神經(jīng)存活［4］以及信號(hào)傳遞［5］等，除此之外，超氧化物歧化酶的活性還與生物的免疫水平密切相關(guān)，對(duì)于增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的防御能力和整個(gè)機(jī)體的免疫功能有重要作用［6］。生物體內(nèi)生成的SOD不是恒定不變的，受環(huán)境影響，當(dāng)細(xì)胞內(nèi)ROS增加時(shí)，誘導(dǎo)SOD合成，避免由于氧代謝產(chǎn)生的過(guò)多自由基引起的氧化損傷。

過(guò)氧化氫酶(CAT)［7］是一類(lèi)廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi)的末端氧化酶，其功能是催化細(xì)胞內(nèi)過(guò)氧化氫分解成水和氧分子，使得H2O2不至于與O2－鐵螯合物作用下反應(yīng)生成非常有害的－OH，防止膜脂過(guò)氧化。CAT活性的變化在一定程度上能反應(yīng)出機(jī)體在脅迫環(huán)境下的免疫力［8］，因此可以測(cè)定CAT的活性變化來(lái)檢測(cè)環(huán)境脅迫對(duì)生物的影響。

谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)是生物體內(nèi)廣泛存在的一種重要的過(guò)氧化物分解酶。硒是GSH-Px酶系的重要組成成分，它可以催化GSH反應(yīng)生成GSSG的同時(shí)，促進(jìn)了H2O2的分解，將有毒的過(guò)氧化物還原成無(wú)毒的羥基化合物，進(jìn)而保護(hù)細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能損傷，是反應(yīng)機(jī)體抗氧化能力的重要指標(biāo)之一。GPX在過(guò)氧化氫酶含量很少或是機(jī)體產(chǎn)生H2O2很低的組織中還可以替代CAT清除H2O2［9］，不僅能夠清除脂類(lèi)氫過(guò)氧化物，還可廣泛的清除有機(jī)氫過(guò)氧化物［10］，具有防止畸變、預(yù)防衰老等重要生理作用。GPX活性的變化可以間接反應(yīng)生物體在環(huán)境的改變下體內(nèi)的抗氧化狀態(tài)，能夠作為機(jī)體受到脅迫的生物標(biāo)志物。

3 脂質(zhì)過(guò)氧化物—丙二醛(MDA)

機(jī)體通過(guò)酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生的氧自由基，能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸(PUFA)，引發(fā)脂質(zhì)過(guò)氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過(guò)氧化物。如:醛基(丙二醛MDA)、酮基、羥基、氫過(guò)氧基以及新的氧自由基等。脂質(zhì)過(guò)氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑，即非自由基性的脂類(lèi)分解物，而且還通過(guò)鏈?zhǔn)椒磻?yīng)將活性氧的作用放大。因此，初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致很多脂質(zhì)過(guò)氧化物的生成，其中一些是無(wú)害的，另一些則能夠引起細(xì)胞代謝功能減弱，甚至導(dǎo)致生物體死亡。MDA作為不飽和脂肪酸過(guò)氧化終產(chǎn)物之一，能與蛋白質(zhì)的－SH和－NH2作用，既可以產(chǎn)生蛋白質(zhì)分子內(nèi)交聯(lián)也可產(chǎn)生分子間交聯(lián)，是依賴(lài)－SH或－NH2維持活性的酶失活，使激素受體損傷，因此被當(dāng)作是一種細(xì)胞膜氧化損傷的指示物［11］。測(cè)試MDA的量常?？梢苑从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度，間接的反映出細(xì)胞損傷的程度。

MDA的測(cè)定常常與SOD的測(cè)定相互配合，SOD活力的高低間接反映了機(jī)體清除氧自由基的能力，正常生理狀態(tài)下，機(jī)體內(nèi)MDA的含量是極低的［12］，其含量的高低又間接反映了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度，通過(guò)SOD與MDA的結(jié)果分析有助于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、藥理及工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展。

4 抗氧化酶之間的作用

SOD、CAT 和 GSH-Px之間具有協(xié)同作用［13］(圖1)，生理?xiàng)l件下組織和細(xì)胞中存在一定ROS，SOD中的Cu2+可被H2O2還原從而失去活性，CAT 和GSH-Px可消除H2O2，對(duì)SOD有一定的保護(hù)作用;O2－也可以使 CAT和 GSH-Px失活，而SOD又能夠保護(hù)這2種酶，因此這3種酶組成了生物體內(nèi)相互保護(hù)的防御系統(tǒng)。SOD、CAT和GSH-Px一起可以減輕并阻止脂質(zhì)過(guò)氧化的一級(jí)觸發(fā)作用，還可通過(guò)還原氫過(guò)氧化物來(lái)減輕阻止二級(jí)觸發(fā)反應(yīng)，三者組成機(jī)體防御自由基的體系是互為補(bǔ)充，相輔相成［14］，3種酶的聯(lián)合效應(yīng)，能夠更有效的清除生物體內(nèi)的活性氧自由基，保護(hù)機(jī)體不受損害。

圖1 SOD、CAT和GSH-Px在細(xì)胞中的分布及相互作用示意圖［13］Fig.1 The distribution and interaction of SOD、CAT and GSH-Px［13］

5 環(huán)境因素對(duì)水生生物體內(nèi)抗氧化酶活性的影響

5.1 溫度

溫度是影響水生生物存活最重要的環(huán)境因子之一，不僅對(duì)其生長(zhǎng)和繁殖起決定性的作用，而且對(duì)生物機(jī)體的代謝有較為明顯的影響。溫度是生物體內(nèi)酶活變化的函數(shù)，即在一定溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶催化反應(yīng)的速度加快并在某一溫度下，酶活力達(dá)到最大值;超過(guò)一定的反應(yīng)溫度，酶催化反應(yīng)速度反而隨著溫度的升高而減慢。溫度的急劇變化能直接影響水生生物體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)［15］，主要是因?yàn)闇囟雀淖?，能夠?qū)е聶C(jī)體耗氧量增加［11］，從而促進(jìn)ROS的產(chǎn)生以及細(xì)胞的氧化狀態(tài)，引起相關(guān)抗氧化劑和氧化酶體系的一系列反應(yīng)［16-17］。宋林生等［18］研究了中華絨螯蟹在溫度驟升9 h后抗氧化酶活力的變化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，肝胰腺中CAT和SOD活性在溫度升高后馬上出現(xiàn)顯著降低，在6 h后開(kāi)始趨于穩(wěn)定;MDA的含量在升溫后隨時(shí)間的延長(zhǎng)逐步增加。Chen等［19］研究表明，在溫度突變后，櫛孔扇貝的血細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞內(nèi)的ROS、ACP和SOD等免疫指標(biāo)均發(fā)生顯著變化。李大鵬等［20］發(fā)現(xiàn)水溫對(duì)中華鱘體內(nèi)自由基水平及其抗氧化防御體系有著顯著的影響。研究發(fā)現(xiàn)，在細(xì)菌［21］、原生動(dòng)物及枝角類(lèi)［22］等微型生物中，其體內(nèi)抗氧化酶活性在低溫脅迫或是高溫脅迫下，都有顯著提高，以此來(lái)抵御活性氧對(duì)機(jī)體的損傷。由此說(shuō)明，溫度的驟然改變會(huì)影響機(jī)體的生理功能和免疫防御能力，會(huì)導(dǎo)致自由基代謝的紊亂，從而影響機(jī)體的新陳代謝。

5.2 鹽度

作為重要的環(huán)境因子之一，鹽度能夠直接影響水生生物的存活生長(zhǎng)、滲透調(diào)節(jié)以及免疫能力。鹽度的變化能夠?qū)λ镌斐梢欢ǖ臐B透脅迫，引起應(yīng)激反應(yīng)［23］。在等滲環(huán)境下，機(jī)體不需要耗能來(lái)進(jìn)行滲透壓調(diào)節(jié)，生物體表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)狀態(tài)，而在鹽度變化后，機(jī)體處于非等滲環(huán)境，需要耗費(fèi)大量能量來(lái)進(jìn)行體內(nèi)水鹽代謝調(diào)節(jié)，一旦鹽度超過(guò)了生物體自我調(diào)節(jié)范圍，就會(huì)影響到其正常的生理代謝水平，從而導(dǎo)致疾病的爆發(fā)。國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究集中于鹽度對(duì)水生生物生長(zhǎng)、存活、能量收支以及免疫生理變化的影響［24-30］。葉建生等［31］通過(guò)凡納濱對(duì)蝦在鹽度突變后體內(nèi)非特異性免疫因子的變化發(fā)現(xiàn)，鹽度突變后，體內(nèi)血細(xì)胞內(nèi)O2－產(chǎn)量呈先升后降的趨勢(shì)，酚氧化酶(PO)活力顯著升高而SOD活性顯著低于對(duì)照組。余燕等［32］探討了點(diǎn)帶石斑魚(yú)幼魚(yú)消化酶及抗應(yīng)激酶在低鹽度脅迫下的變化規(guī)律，結(jié)果表明SOD活力隨鹽度梯度下降呈上升趨勢(shì)，CAT和GSH-Px活力以及消化酶活力隨鹽度梯度下降呈降低趨勢(shì)，認(rèn)為低鹽度脅迫能導(dǎo)致魚(yú)體自由基代謝紊亂，應(yīng)激性增強(qiáng)，最終阻礙了幼魚(yú)健康生長(zhǎng)。通過(guò)鹽度脅迫對(duì)鹽生隱桿藻抗氧化系統(tǒng)的研究發(fā)現(xiàn)，隨著鹽度脅迫程度的增加，MDA含量和抗氧化酶(SOD、GR、APX、ASA、GSH)活性不斷增強(qiáng)［33］。包斯琴等［34］在研究外生菌根菌 Paxillus的抗鹽機(jī)理時(shí)發(fā)現(xiàn)，不同的菌株隨鹽度脅迫時(shí)間的變化，其體內(nèi)抗氧化酶活性的變化規(guī)律有所差異，但是鹽處理的菌株抗氧化酶活性明顯高于對(duì)照菌株。

5.3 pH

pH作為比較容易變化的水體生態(tài)環(huán)境因子，對(duì)水質(zhì)和水生生物有諸多影響。水體pH變化，不僅影響水中氮磷的轉(zhuǎn)化，還能影響水生生物存活生長(zhǎng)、免疫和代謝［35］。pH對(duì)櫛孔扇貝免疫活性有明顯的刺激作用，且在一定范圍內(nèi)隨刺激強(qiáng)度的增加呈現(xiàn)免疫活性的正調(diào)節(jié);在高強(qiáng)度pH刺激下，扇貝免疫活性呈現(xiàn)出負(fù)調(diào)節(jié)［36］。有研究表明，pH的變化會(huì)影響蝦蟹從外界吸收氧的能力，進(jìn)而影響其耗氧率［37］。極端的 pH環(huán)境使水生生物血液酸堿平衡紊亂，會(huì)導(dǎo)致離子調(diào)節(jié)機(jī)制、氣體交換以及血氧輸送等功能喪失，造成缺氧癥，嚴(yán)重者甚至危及生物體存活。一般而言，pH很少單獨(dú)對(duì)水中生物有直接危害作用，但在特定環(huán)境條件下，pH能夠和其他環(huán)境因子協(xié)同作用，間接地對(duì)水生生物產(chǎn)生影響［35］，在水生動(dòng)物中，軟體動(dòng)物最為敏感［38］。哈承旭［39］在研究高 pH 脅迫“黃海1號(hào)”中國(guó)對(duì)蝦時(shí)發(fā)現(xiàn)，“黃海1號(hào)”和野生群體在高pH條件下均表現(xiàn)出一定的應(yīng)激能力，溶菌酶(LSZ)、酚氧化酶(PO)以及SOD活力隨pH的升高而增強(qiáng)，在pH 9.4時(shí)，兩群體中國(guó)對(duì)蝦全部死亡。

5.4 氨氮

水體中的氨氮主要由生物排泄物、殘餌以及動(dòng)植物尸體等含氮有機(jī)物經(jīng)微生物分解產(chǎn)生，大量的有毒物質(zhì)(氨氮、硫化氫以及亞硝酸氮等)會(huì)導(dǎo)致養(yǎng)殖生物缺氧或中毒死亡。目前，氨氮已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中常見(jiàn)的脅迫因子［40］。氨氮在天然水體中以離子銨(NH4+)和非離子氨(NH3)的形式存在，兩者在水體中可以相互轉(zhuǎn)化。其中非離子氨可以穿透細(xì)胞膜，進(jìn)而對(duì)機(jī)體產(chǎn)生毒性效應(yīng)，而離子氨(NH4+)帶有電荷，有較強(qiáng)的水溶性，可以跟水結(jié)合成更大的水合離子，很難通過(guò)魚(yú)鰓細(xì)胞膜［41］。有關(guān)氨氮對(duì)水生生物產(chǎn)生的生理機(jī)制，比較復(fù)雜。目前，大多數(shù)人認(rèn)為NH4+升高，取代了K+，從而導(dǎo)致N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體谷氨酸鹽感受器過(guò)度活化，大量的Ca2+涌入，隨后中央神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞死亡［42］。也有人認(rèn)為氨氮能夠抑制血液載氧能力［40］，最終會(huì)因?yàn)轶w內(nèi)缺氧而導(dǎo)致機(jī)體代謝紊亂。曾媛媛等［43］認(rèn)為，氨氮脅迫顯著影響擬穴青蟹各組織器官的SOD和GPX活性，表現(xiàn)為隨著氨氮脅迫含量升高和脅迫時(shí)間延長(zhǎng)，擬穴青蟹各組織器官中SOD和GPX活性下降。陳家長(zhǎng)等［44］認(rèn)為，超過(guò)3 mg/L的氨氮質(zhì)量濃度脅迫能夠顯著降低羅非魚(yú)的免疫力，增加對(duì)海豚鏈球菌的易感性。由此可見(jiàn)，氨氮不僅能夠?qū)λ锏拿庖吡υ斐捎绊懀疫€能加強(qiáng)水生動(dòng)物對(duì)病原菌的易感性。

5.5 污染物

隨著工業(yè)廢水的大量排放，重金屬污染已嚴(yán)重影響到水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，由于水體中過(guò)量重金屬的存在，嚴(yán)重威脅著水生生物的生長(zhǎng)、繁殖及洄游等生物活動(dòng)。目前，國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)于重金屬對(duì)水生生物毒害作用的研究較為廣泛，涉及到微型藻類(lèi)、水生植物、橈足類(lèi)、枝角類(lèi)、魚(yú)類(lèi)、貝類(lèi)等，而以其體內(nèi)抗氧化酶作為水體污染監(jiān)測(cè)指標(biāo)的研究已成為熱點(diǎn)。張紅霞等［45］通過(guò)重金屬離子對(duì)日本蟳血淋巴抗氧化酶的研究發(fā)現(xiàn)，在低濃度重金屬離子影響下，日本蟳血淋巴中SOD活力一直呈激活狀態(tài)。而高濃度組 SOD活力在短時(shí)間內(nèi)激活后受到抑制，4種重金屬離子對(duì)日本蟳血淋巴SOD、GPX活力的毒性大小為Hg2+＞Cd2+＞Cu2+＞Pb2+，認(rèn)為出現(xiàn)這種差別的原因是生物體對(duì)不同重金屬離子的需求有所差異而且不同重金屬離子對(duì)組織中抗氧化酶的致毒機(jī)理不同。研究發(fā)現(xiàn)，在重金屬離子脅迫下，靈芝菌［46］、南極細(xì)菌［47］、酵母菌［48］和苜蓿中華根瘤菌［49］等微生物體內(nèi)的抗氧化酶活性均有不同程度的升高，以減少細(xì)胞受到的損傷。

苯酚類(lèi)等持久性有機(jī)化合物有很強(qiáng)的毒性，是當(dāng)今環(huán)境中重要的污染物之一，極易在水體環(huán)境中不斷積累并通過(guò)食物鏈傳遞，嚴(yán)重威脅著生態(tài)環(huán)境以及人類(lèi)的健康。彭金良等［50］研究了普通小球藻的生長(zhǎng)、光合色素和MDA含量及抗氧化酶(SOD、CAT、POD)活性在 α-萘酚脅迫下的變化規(guī)律，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著 α-萘酚濃度的升高，藻的SOD、CAT、POD活性均先升高后下降，MDA含量在3種抗氧化酶活性不同程度下降后才會(huì)急劇上升，膜受脂質(zhì)過(guò)氧化作用的損傷程度加劇。認(rèn)為普通小球藻的致毒機(jī)制之一是α-萘酚導(dǎo)致膜脂過(guò)氧化，而在污染物脅迫下，抗氧化酶具有防御保護(hù)細(xì)胞的作用。除此之外，海洋微藻還對(duì)于BDE-47有較高的敏感性，可產(chǎn)生應(yīng)激反應(yīng)，通過(guò)增強(qiáng)體內(nèi)SOD和CAT活性以減少藻細(xì)胞自身的危害［51］。

張辰佳等［52］研究了3種酚類(lèi)對(duì)多刺裸腹溞GST和AChE活力的影響，發(fā)現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)(24 h)低濃度酚類(lèi)化合物對(duì)GST和AChE活力具有誘導(dǎo)作用，但隨著酚類(lèi)化合物處理濃度的升高和處理時(shí)間的延長(zhǎng)，酶活力受到顯著抑制。由此說(shuō)明，環(huán)境中的有機(jī)污染物會(huì)對(duì)水生生物產(chǎn)生氧化脅迫，抗氧化防御系統(tǒng)可以作為生物標(biāo)志物來(lái)檢測(cè)海洋環(huán)境中有機(jī)污染物對(duì)水生生物的生化毒性。

綜上所述，自由基和ROS在生物體生理代謝過(guò)程中以及環(huán)境污染的毒害機(jī)制中發(fā)揮了重要作用，許多研究者對(duì)水生生物進(jìn)行了廣泛的研究，將對(duì)水生生物抗氧化酶防御系統(tǒng)的影響作為生物標(biāo)志物應(yīng)用到環(huán)境的監(jiān)測(cè)中。從目前的研究看，關(guān)于生物體內(nèi)抗氧化酶的研究主要集中于對(duì)抗氧化酶活性以及相關(guān)基因表達(dá)及分子進(jìn)化［53］、基因重組［54］的研究。其中枝角類(lèi)、橈足類(lèi)在環(huán)境脅迫后抗氧化酶活性的研究較少，對(duì)于其在免疫應(yīng)答中的具體作用機(jī)制的研究更是微乎其微。為了今后養(yǎng)殖生物活餌料的大規(guī)模發(fā)展，這些餌料生物對(duì)環(huán)境因子的響應(yīng)機(jī)制將會(huì)成為國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)。

［1］ Diguiseppi J L，F(xiàn)ridovich I.Induction of superoxide dismutases in Escheriehia coli by manganese and iron［J］.J Bacteriol，1984，160(1):137-142.

［2］ 夏世鈞，吳中亮.分子毒理學(xué)基礎(chǔ)［M］.武漢:湖北科學(xué)技術(shù)出版社，2001:84-87.

［3］ 唐學(xué)璽，張培玉.蒽對(duì)黑鲪超氧化物歧化酶活性的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2000，24(3):217-220.

［4］ Nakano N，F(xiàn)rodl E M，Widner H，et al.Overexpressing Cu/Zn superoxide dismutase enhances survival of transplanted neurons in a rat model of Parkinson’s disease［J］.Nat Med，1995，1(3):226-231.

［5］ Wang X，Culotta V C，Klee C B.Superoxide dismutase protects calcineurin from inactive［J］.Nature，1996，383(6599):434-437.

［6］ 牟海津，江曉路，劉樹(shù)清，等.免疫多糖對(duì)櫛孔扇貝酸性磷酸酶、堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影響［J］.青島海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，29(3):463-468.

［7］ 劉冰，梁嬋娟.生物過(guò)氧化物酶研究進(jìn)展［J］.中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2005，21(5):223-225.

［8］ 陳昌生，王淑紅，紀(jì)德華，等.氨氮對(duì)九孔鮑過(guò)氧化氫酶和超氧化物歧化酶活力的影響［J］.上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào)，2001，10(3):218-222.

［9］ Ladenstein R，Eppo O，Bartels K，et al.Structure analysis and molecular model of the selenoenzyme glutathione peroxidase at 2.8 A resllution［J］.J Mol Biol，1979，134(2):199-218.

［10］馮濤，鄭微云，洪萬(wàn)樹(shù)，等.苯并(a)芘對(duì)大彈涂魚(yú)肝臟谷胱甘肽過(guò)氧化物酶活性的影響［J］.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2001，7(4):19-21.

［11］Hochachka P W，Somero G N.Biochemical adaptation［M］.UK:Oxford University Press，2002.

［12］王奇，范燦鵬，陳錕慈，等.三種磺胺類(lèi)藥物對(duì)羅非魚(yú)肝臟組織中谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(GST)和丙二醛(MDA)的影響［J］.生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2010，19(5):1014-1019.

［13］楊唐斌，梅尚筠.應(yīng)激反應(yīng)與抗氧化酶［J］.航天醫(yī)學(xué)與醫(yī)學(xué)工程，1994，7(1):75-78.

［14］程元愷.脂質(zhì)過(guò)氧化與抗氧化酶［J］.工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，1993，19(4):254-256.

［15］Martinez-Alvarez R M，Morales A E，Sanz A.Antioxidant defenses in fish:Biotic and abiotic factors［J］.Rev Fish Biol Fisher，2005(1-2)，15:75-88.

［16］Lushchak V I，Bagnyukova T V.Temperature increase results in oxidative stress in goldfish tissues.1.Indices of oxidative stress［J］.Comp.Biochem Physiol，2006，143(1):30-35.

［17］Parihar M S，Dubey A K.Lipid peroxidation and ascorbic acid status in respiratory organs of male and female freshwater catfish Heteropneustes fossilis exposed to temperature increase［J］.Comp Biochem Physiol，1995，112(3):309-313.

［18］宋林生，季延賓，蔡中華，等.溫度驟升對(duì)中華絨螯蟹幾種免疫化學(xué)指標(biāo)的影響［J］.海洋與湖沼，2004，35(1):74-77.

［19］Chen M Y，Yang H S，Delaporte M，et al.Immune condition of Chlamys farreri in response to acute temperature challenge［J］.Aquaculture，2007，271(1):479-487.

［20］李大鵬，劉巖松，謝從新，等.水溫對(duì)中華鱘血清活性氧含量及抗氧化防御系統(tǒng)的影響［J］.水生生物學(xué)報(bào)，2008，32(3):327-332.

［21］魏帥，白羽嘉，張麗，等.溫度因子對(duì)阿魏菇菌絲抗氧化酶活性的影響［J］.保鮮與加工，2012，12(4):10-13.

［22］劉鴻艷，鄭曙明，吳青，等.隆線(xiàn)溞營(yíng)養(yǎng)成分分析及高溫脅迫對(duì)抗氧化酶活性的影響［J］.淡水漁業(yè)，2012，42(5):45-48.

［23］徐力文，蘇友祿，劉廣鋒，等.急性鹽度脅迫下軍曹魚(yú)稚魚(yú)應(yīng)激反應(yīng)的血清學(xué)指標(biāo)［J］.華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，28(2):91-94.

［24］袁有憲，陳聚法，陳碧娟，等.櫛孔扇貝對(duì)環(huán)境變化適應(yīng)性研究-鹽度、pH對(duì)存活、呼吸、攝食及消化的影響［J］.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2001，7(4):73-77.

［25］Laing I.Effect of salinity on growth and survival of king scallop spat(Pecten maximus)［J］.Aquaculture，2002，205(1):171-181.

［26］Partridge G J，Jenkins G I.The effect of salinity on growth and survival of juvenile black bream(Acanthopagrus butcheri)［J］.Aquaculture，2002，210(1):219-230.

［27］王吉橋，羅明，張德治，等.水溫和鹽度對(duì)南美白對(duì)蝦幼蝦能量收支的影響［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2004，28(2):161-166.

［28］黃凱，王武，盧潔，等.鹽度對(duì)南美白對(duì)蝦的生長(zhǎng)及生化成分的影響［J］.海洋科學(xué)，2004.28(9):20-25.

［29］王興強(qiáng)，曹梅，馬甡，等.鹽度對(duì)凡納濱對(duì)蝦存活、生長(zhǎng)和能量收支的影響［J］.海洋水產(chǎn)研究，2006，27(1):8-13.

［30］Peter L J，James S B.Metabolic responses to salinity acclimation in juvenile shortnose sturgeon Acipenser brevirostrum［J］.Aquaculture，2003，219(1):891-909.

［31］葉建生，王興強(qiáng)，馬甡，等.鹽度突變對(duì)凡納濱對(duì)蝦非特異性免疫因子的影響［J］.海洋水產(chǎn)研究，2008，29(1):38-43.

［32］余燕，徐維娜，劉兆普，等.低鹽度脅迫對(duì)點(diǎn)帶石斑魚(yú)幼魚(yú)消化酶、抗應(yīng)激酶和存活率的影響［J］.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，2009，30(4):21-26.

［33］周亞維，焉婷婷，李朋富，等.鹽度脅迫下鹽生隱桿藻抗氧化防御系統(tǒng)的變化［J］.海洋科學(xué)，2010，34(9):30-35.

［34］包斯琴，李靜，孫健，等.鹽脅迫下外生菌根菌Paxillus抗氧化酶活性的變化［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40(15):8401-8403，8405.

［35］王方國(guó)，劉金燦.水體環(huán)境因子與對(duì)蝦疾病關(guān)系［J］.東海海洋，1992，10(4):37-41.

［36］樊甄姣，楊?lèi)?ài)國(guó)，劉志鴻，等.pH對(duì)櫛孔扇貝體內(nèi)幾種免疫因子的影響［J］.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2006，13(4):650-654.

［37］林小濤，張秋明，許忠能，等.蝦蟹類(lèi)呼吸代謝研究進(jìn)展［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2000，24(6):575-580.

［38］成廣興.酸雨對(duì)水生生物的影響［J］.安慶師范學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，5(3):108-110.

［39］哈承旭，劉萍，何玉英，等.高pH脅迫對(duì)"黃海1號(hào)"中國(guó)對(duì)蝦免疫相關(guān)酶的影響［J］.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2009，16(2):303-306.

［40］孫建軍，丁美麗.氨氮對(duì)中國(guó)對(duì)蝦抗病力的影響［J］.海洋與湖沼，1999，30(3):367-372.

［41］Svibidiva Z，Lioyd R，Machova J.Water quality and fish health［M］.Rome:EIFAC Technical Paper，1993，54:11-16.

［42］D J Randall，Tsui T K N.Ammonia toxicity in fish［J］.Marine Pollution Bulletin，2002，45(1):17-23.

［43］曾媛媛，蔣云霞，艾春香.氨氮脅迫對(duì)擬穴青蟹組織器官中SOD及GPX活性的影響［J］.臺(tái)灣海峽，2011，30(2):210-215.

［44］陳家長(zhǎng)，臧學(xué)磊，胡庚東.氨氮脅迫下羅非魚(yú)(GIFT Oreochromis niloticus)機(jī)體免疫力的變化及其對(duì)海豚鏈球菌易感性的影響［J］.生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2011，20(4):629-634.

［45］張紅霞，潘魯青，劉靜.重金屬離子對(duì)日本蟳血淋巴抗氧化酶(SOD、CAT、GPX)活力的影響［J］.中國(guó)海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，36(sup.):49-53

［46］王松華，張華，崔元戎，等.鎘對(duì)靈芝菌絲抗氧化系統(tǒng)的影響［J］.應(yīng)用生態(tài)學(xué)報(bào)，2008，19(6):1355-1361.

［47］鄭洲，繆錦來(lái)，丁炳，等.汞對(duì)南極細(xì)菌Pseudoalteromonas sp.NJ 62抗氧化酶活性的影響［J］.海洋科學(xué)進(jìn)展，2005，12(23):1-5.

［48］杜君，李海蘭，李慧，等.銅對(duì)葡萄酒釀酒酵母的氧化脅迫機(jī)制［J］.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44(2):369-378.

［49］馬占強(qiáng)，趙龍飛，王莉，等.銅脅迫對(duì)苜蓿中華根瘤菌抗氧化酶系的影響［J］.農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2011，30(6):1058-1063.

［50］彭金良，嚴(yán)國(guó)安，沈國(guó)興，等.α-萘酚脅迫對(duì)普通小球藻生長(zhǎng)及抗氧化酶活性的影響［J］.武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版)，2001，47(4):449-452.

［51］孟范平，李卓娜，趙順順，等.BDE-47對(duì)4種海洋微藻抗氧化酶活性的影響［J］.生態(tài)環(huán)境學(xué)報(bào)，2009，18(5):1659-1664.

［52］張辰佳，王蘭，王茜.3種酚類(lèi)化合物對(duì)多刺裸腹溞GST和AChE 活力的影響［J］.生態(tài)毒理學(xué)報(bào)，2009，4(2):258-264.

［53］鄒媛媛，樊小英，劉國(guó)憲，等.原核微生物鐵超氧化物歧化酶的分子進(jìn)化［J］.微生物學(xué)雜志，2009，29(3):57-63.

［54］楊明琰，張曉琦，沈儉，等.微生物產(chǎn)超氧化物歧化酶的研究進(jìn)展［J］.微生物學(xué)雜志，2004，24(1):49-51，59.