賈永芳 吳雷振 張瑞平 王麗霞 劉亞潔 張順利

(河南師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院 省部共建細(xì)胞分化調(diào)控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，新鄉(xiāng)453007)

花旗松素和槲皮素專屬性強(qiáng)，是水紅花子的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)物，花旗松素是槲皮素的同分異構(gòu)體，具有調(diào)節(jié)脂代謝、抗炎、抗氧化、抗輻射、抗病毒和抗腫瘤活性作用［1］。本研究團(tuán)隊(duì)已經(jīng)發(fā)現(xiàn)水紅花子水煎劑對(duì)LPS所致小鼠流產(chǎn)具有保胎作用，但其單體活性成分是否也具有類似的抗感染流產(chǎn)作用及其作用機(jī)制目前尚不清楚。而在由細(xì)菌感染引起的流產(chǎn)中，細(xì)菌脂多糖(LPS)起關(guān)鍵作用，它可以通過(guò)激活子宮巨噬細(xì)胞釋放 TNF-α，而導(dǎo)致流產(chǎn)［2，3］。同時(shí)CD14是巨噬細(xì)胞重要的模式識(shí)別受體，又是介導(dǎo)LPS激活巨噬細(xì)胞的受體，在清除LPS過(guò)程中發(fā)揮重要作用［4］。本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)觀察花旗松素、槲皮素對(duì)LPS誘導(dǎo)流產(chǎn)小鼠子宮中非特異性酯酶陽(yáng)性巨噬細(xì)胞和CD14陽(yáng)性巨噬細(xì)胞數(shù)量和分布，分泌TNF-α含量的變化，從細(xì)胞、分子水平上闡明花旗松素和槲皮素的免疫抑制作用，從免疫藥理學(xué)角度探討其保胎機(jī)理，為其藥效的進(jìn)一步開(kāi)發(fā)和尋找抗感染流產(chǎn)的新途徑提供依據(jù)。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)藥品和器材 花旗松素(Taxifolin)和槲皮素(Quercetin)均購(gòu)自南京澤朗醫(yī)藥有限公司;LPS(Sigma，美國(guó)，127k4048)購(gòu)自北京鼎國(guó)生物技術(shù)有限公司;兔抗鼠 CD14抗體 (Santa Cruze，美國(guó));生物素化的羊抗兔IgG和辣根過(guò)氧化酶標(biāo)記鏈酶卵白素(Vector，美國(guó));小鼠腫瘤壞死因子(TNF-α)ELISA試劑盒(R＆Dsystems，美國(guó));冰凍切片機(jī)(Reichert Histo，美國(guó));酶標(biāo)儀(ST-360，上?？迫A實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)有限公司);LPS:用0.01 mol/L pH7．4的PBS 配制濃度為0．5 μg/ml的溶液。

1．2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 8周齡昆明種清潔級(jí)小鼠體重20～22 g，常規(guī)飼養(yǎng)，自由取食飲水。以陰道涂片法進(jìn)行動(dòng)情周期鑒定。取動(dòng)情期雌鼠與雄鼠2∶1合籠過(guò)夜，次日清晨檢出陰栓者定為孕1天。

1．3 動(dòng)物分組及處理 孕鼠隨機(jī)分為對(duì)照組(簡(jiǎn)稱A組)和實(shí)驗(yàn)組。實(shí)驗(yàn)組又分為L(zhǎng)PS處理流產(chǎn)模型組(簡(jiǎn)稱B組)、低濃度花旗松素及LPS雙處理組(簡(jiǎn)稱C1組)、高濃度花旗松素及LPS雙處理組(簡(jiǎn)稱C2組)、低濃度槲皮素及LPS雙處理組(簡(jiǎn)稱D1組)、高濃度槲皮素及LPS雙處理組(簡(jiǎn)稱D2組)。每組小鼠15只。A、B組于孕2天開(kāi)始每天灌胃PBS 0．4 ml，1 次/天;其中，A 組于孕 6 天尾靜脈注射 PBS 0．2 ml;B組于孕 6天尾靜脈注射 LPS 0．2 ml［5，6］;C1 組于孕 2 天開(kāi)始每天灌胃花旗松素50 mg/kg，連續(xù)灌胃至孕8天，其中在孕6天尾靜脈注射LPS 0．2 ml;C2組:孕2天開(kāi)始灌胃花旗松素250 mg/kg，連續(xù)灌至孕8天，其余同C1組;D1組:孕2天開(kāi)始灌胃槲皮素50 mg/kg，連續(xù)灌至孕8天，其余同 C1組;D2組:孕 2天開(kāi)始灌胃槲皮素250 mg/kg，連續(xù)灌至孕8天，其余同C1組。所有小鼠均于孕9天處死取子宮。每只小鼠左側(cè)子宮角用于制備冰凍切片，右側(cè)子宮角用于ELISA檢測(cè)。

1．4 非特異性酯酶染色 左側(cè)子宮角冰凍切片，橫切6 μm，晾干。參照文獻(xiàn)［7］進(jìn)行非特異性酯酶(α-ANE)染色。

1．5 免疫組織化學(xué)染色 左側(cè)子宮角冰凍切片6 μm，多聚甲醛固定 20分鐘，分別用 0．3% 的H2O2，10%正常羊血清封閉非特異性染色。滴加1∶200兔抗鼠CD14一抗，按試劑盒要求進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，鏡檢、照相。

1．6 子宮組織勻漿液制備和ELISA方法 將右側(cè)子宮角置預(yù)冷PBS中剝?nèi)ヅ咛?，冰浴勻漿，12 000 r/min，4℃離心15分鐘，分裝上清液，－20℃凍存。TNF-α檢測(cè)按ELISA試劑盒說(shuō)明書操作，酶標(biāo)儀450 nm處讀取OD值，標(biāo)準(zhǔn)曲線確定TNF-α含量。

1．7 胚胎吸收率計(jì)算、細(xì)胞計(jì)數(shù)和統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 胚胎吸收率 =［死亡胚胎數(shù)/(死亡胚胎數(shù)+正常胚胎數(shù))］×100%。每只動(dòng)物取5張切片，細(xì)胞計(jì)數(shù)于10×40倍光鏡下，每張切片隨機(jī)選取6個(gè)視野，用CIS圖像分析軟件測(cè)量免疫組化陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量、灰度值和陽(yáng)性面積。數(shù)據(jù)以±s表示，統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13．0軟件和組間t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2．1 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠胚胎發(fā)育的影響孕9天解剖孕鼠，A組15只中有2只出現(xiàn)明顯流產(chǎn)跡象，胚胎形態(tài)明顯小于正常胚胎，胎盤和胚胎有出血或壞死，呈黑褐色;而正常胚胎大小均勻，呈粉紅色。B組孕鼠全部流產(chǎn)，胚胎吸收率100%，胎盤壞死，子宮內(nèi)嚴(yán)重淤血，造模成功。C1、C2和D1組流產(chǎn)率和胚胎吸收率均略高于A組(P＞0．05)，D2組流產(chǎn)率較A組略有增加，胚胎吸收率顯著高于A組(P＜0．01);各雙處理組流產(chǎn)率與B組相比下降，胚胎吸收率極顯著降低(P＜0．01)。結(jié)果詳見(jiàn)表1。

2．2 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮α-NAE+巨噬細(xì)胞的影響

2．2．1 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮α-NAE+巨噬細(xì)胞數(shù)量和分布的影響 B組小鼠子宮內(nèi)膜和肌層α-NAE+巨噬細(xì)胞數(shù)量均顯著多于A組(P＜0.01，圖1A、B);C1組與A組相比，外膜巨噬細(xì)胞顯著減少(P＜0．05)，但內(nèi)膜及肌層已接近 A組(P＞0．05，圖1C)。C2組與 A組、B組相比，子宮各層 α-NAE+巨噬細(xì)胞數(shù)量均顯著減少(P＜0.05)，內(nèi)膜和肌層達(dá)到極顯著水平(P＜0．01)。D1組與A組相比，外膜顯著降低(P＜0．05)，其他部位差異不顯著;三層組織結(jié)構(gòu)中巨噬細(xì)胞均顯著低于B組(P＜0．05)。D2組子宮內(nèi)膜和肌層巨噬細(xì)胞數(shù)目顯著高于A組，低于B組(P＜0．01)。詳見(jiàn)表2。

2．2．2 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮α-NAE+巨噬細(xì)胞灰度值的影響 與A組相比，B組子宮內(nèi)膜和肌層灰度值顯著減少(P＜0.05)，外膜灰度值與A組無(wú)差異;D2組肌層灰度值顯著降低(P＜0.05);其他雙處理組內(nèi)膜與肌層和A組相比無(wú)顯著差異，外膜較A組顯著增加(P＜0.05)。雙處理組和B組相比均顯著增加(P＜0.05)。詳見(jiàn)表2。

2．2．3 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮巨噬細(xì)胞α-NAE+陽(yáng)性反應(yīng)面積的影響 與A組相比，B組子宮內(nèi)膜和肌層巨噬細(xì)胞α-NAE+陽(yáng)性反應(yīng)面積顯著增加(P＜0．01)。C1、D1組內(nèi)膜和肌層與A組相比差異不顯著，較 B組顯著下降(P＜0．01)。C2組內(nèi)、外膜陽(yáng)性面積較A組顯著減少，肌層降低(P＜0．01)。D2組內(nèi)膜和肌層較A組和其他雙處理組極顯著增加(P＜0．01);內(nèi)膜較B組極顯著下降(P＜0．01)，肌層下降不顯著。詳見(jiàn)表2。

2．3 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬的影響

2．3．1 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量和分布的影響 B組小鼠CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量與A組相比，內(nèi)膜、肌層均顯著增多(P＜0.01)，外膜與 A 組相似(圖2A、B)。C1組、D1組與A組相比，肌層顯著升高(P＜0．01)，外膜顯著降低(P ＜0．05)，內(nèi)膜接近 A 組(P ＞0．05，圖 2C)。C2組子宮內(nèi)膜和外膜CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)量均顯著低于A組，肌層極顯著高于A組 (P＜0．01)。D2組內(nèi)膜和肌層CD14+巨噬細(xì)胞均極顯著高于A組(P＜0．01)，外膜低于 A 組(P ＜0．05)。各雙處理組與B組相比，3層巨噬細(xì)胞數(shù)量均顯著低于B組(P＜0．05)，內(nèi)膜和肌層達(dá)到極顯著水平(P＜0.01)。詳見(jiàn)表3。

2．3．2 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞灰度值的影響 B組子宮內(nèi)膜和肌層CD14+巨噬細(xì)胞灰度值較A組顯著減少(P＜0．05)，外膜差異不明顯。C2組內(nèi)膜和外膜均顯著高于A組(P＜0．05)，肌層無(wú)顯著差異。其它各雙處理組內(nèi)膜和肌層變化與A組近似，顯著高于B組(P＜0.05);外膜較A組和B組顯著增加(P＜0．05)。詳見(jiàn)表3。

2．3．3 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞免疫反應(yīng)陽(yáng)性面積的影響 B組子宮內(nèi)膜和肌層CD14+巨噬細(xì)胞陽(yáng)性面積率較A組顯著增加(P＜0．01)。D2組肌層極顯著高于A組和其它雙處理組，低于B組(P＜0．01)，內(nèi)膜和外膜與A組無(wú)顯著差異。其他雙處理組3層結(jié)構(gòu)與B組相比均顯著降低，其中內(nèi)膜和肌層達(dá)到極顯著水平(P＜0.01);與A組相比內(nèi)膜極顯著降低(P＜0．01)，外膜顯著降低(P ＜0．05)，肌層顯著升高(P ＜0．01);組間差異不顯著。詳見(jiàn)表3。

表1 各組小鼠的妊娠結(jié)果Tab．1 Pregnancy outcome of each group mice

表2 LPS、花旗松素和槲皮素對(duì)各組小鼠子宮α-NAE+巨噬細(xì)胞的影響(±s)Tab．2 Effect of LPS，taxifolin and quercetin on the α-NAE+macrophages in the uterine of each group mice(x±s)

表2 LPS、花旗松素和槲皮素對(duì)各組小鼠子宮α-NAE+巨噬細(xì)胞的影響(±s)Tab．2 Effect of LPS，taxifolin and quercetin on the α-NAE+macrophages in the uterine of each group mice(x±s)

Note:Data with different letters significantly differ(capitals means P ＜0．01，lowercase means P ＜0．05)among treatments．

Quantity Gray value Positive cell area Groups Endometrium Myometrium Perimetrium Endometrium Myometrium Perimetrium Endometrium Myometrium Perimetrium A 6．12 ±0．71A 2．81 ± 0．82A16．54 ±1．67a66．64 ±7．71a70．62 ±1．67a43．76 ±5．44a1．09% ± 0．001 1A0．95% ± 0．001 5A1．86% ±0．004 4a B 26．23 ±2．65B32．84 ±3．33B14．34 ±0．35a45．71 ±2．21b54．61 ±2．23b46．60 ±1．52a3．25% ± 0．008 3B2．87% ± 0．004 4B1．49% ±0．003 8ab C1 6．20 ± 1．18A2．88 ± 0．84A10．40 ±1．14bc64．64 ±7．71a69．56 ±2．14a61．32 ±5．58b0．89% ± 0．001 5A0．75% ± 0．001 9A1．37% ±0．003 1b C2 3．40 ± 0．91C1．40 ± 0．55C 8．24 ± 0．45c68．41 ±1．57a76．13 ±6．64a69．67 ±4．24b0．61% ± 0．001 9C0．51% ±0．002 3C1．32% ±0．003 4b D1 9．44 ± 1．14A2．54 ± 0．83A11．56 ±0．12b63．65 ±11．15a73．15 ±3．05a62．55 ±3．34b1．01% ± 0．002 1A0．88% ±0．001 9A1．48% ±0．002 3ab D2 20．58 ±2．52D16．25 ±3．22D12．75 ±0．15b58．45 ±2．61a61．00 ±3．32c63．75 ±8．91b2．49% ± 0．006 5D2．46% ±0．005 5B1．89% ±0．001 4a

2．4 花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮TNF-α含量的影響 子宮TNF-α含量(pg/ml;蛋白)在B組含量為45．36 ± 6．89，顯著高于 A 組 25．38 ± 2．89(P＜0．05)。C1 組為 26．23 ± 4．71，C2 組為29．25 ± 0．46，D1 組為 28．15 ± 3．84，D2 組為34.05±3.08，與A組相比無(wú)顯著性差異;與B組相比均顯著降低(P＜0．05)。

表3 LPS、花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞的影響(±s)Tab．3 Effect of LPS，taxifolin and quercetin on the CD14+macrophages in the uterine of each group mice(x±s)

表3 LPS、花旗松素和槲皮素對(duì)小鼠子宮CD14+巨噬細(xì)胞的影響(±s)Tab．3 Effect of LPS，taxifolin and quercetin on the CD14+macrophages in the uterine of each group mice(x±s)

Note:Data with different letters significantly differ(capitals means P ＜0．01，lowercase means P ＜0．05)among treatments．

Quantity Gray value Positive cell area Groups images/BZ_258_233_538_2242_600.pngA 6．41 ±0．89A 1．41 ±0．25A 15．12 ±0．71a82．36 ±4．61a97．15 ±5．38a61．83 ±4．15a2．44% ±0．006 4A0．62% ±0．000 9A2．78% ± 0．005 3a B 23．28 ±3．35B 26．13 ±4．69B 12．67 ±2．36a60．39 ±4．35b64．08 ±4．32b71．13 ±3．89a3．32% ±0．004 8B3．74% ±0．003 8B2．24% ± 0．003 5a C1 7．12 ±0．71A 8．65 ±1．34C 8．03 ±1．64b 89．45 ±2．51a86．54 ±6．65a90．24 ±3．74b1．12% ±0．001 7C1．56% ±0．001 1C1．44% ± 0．003 4b C2 3．25 ±0．46C 7．42 ±0．98C 7．43 ±1．55b120．64 ±23．71c91．13 ±4．08a88．15 ±3．36b1．07% ±0．002 9C1．36% ±0．004 5C1．42% ± 0．002 5b D1 8．62 ±0．84A 8．43 ±1．29C 8．15 ±1．84b 88．67 ±2．56a102．09 ±3．05a94．75 ±2．71b1．24% ±0．002 1C1．61% ±0．001 2C1．51% ± 0．001 6b D2 14．25 ±2．30D 15．82 ±1．26D 9．15 ± 0．58b87．28 ±3．98a88．75 ±4．39a83．29 ±3．75b2．35% ±0．005 3A2．73% ±0．005 1D1．89% ± 0．014 0ab

圖1 流產(chǎn)小鼠子宮非特異性酯酶染色Fig．1 Non-specific esterase staining in the uterine of abortion mice

3 討論

LPS是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的重要組成成分，可誘發(fā)大鼠和小鼠的胚胎吸收［8，9］。王曉丹［5］報(bào)道，每只孕鼠在孕7天靜脈注射0．1 μg LPS引起小鼠流產(chǎn)，本課題組在孕6天注射LPS即可引起小鼠全部流產(chǎn)，胚胎吸收率為100%，認(rèn)為造模成功。而在孕2～8天預(yù)先灌胃孕鼠花旗松素或槲皮素，再注射LPS，孕鼠的流產(chǎn)率與流產(chǎn)模型組相比下降，胚胎吸收率極顯著降低(P＜0．01)，說(shuō)明花旗松素和槲皮素對(duì)LPS誘導(dǎo)的小鼠流產(chǎn)具有抑制作用。

圖2 流產(chǎn)小鼠子宮免疫組化染色Fig．2 Immunohistochemistry staining in the uterine of abortion mice

妊娠是一個(gè)免疫耐受的過(guò)程，小鼠胚胎著床和維持與子宮巨噬細(xì)胞的分布變化有關(guān)［10］。外源性LPS通過(guò)血漿中脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)轉(zhuǎn)運(yùn)至單核/巨噬細(xì)胞膜表面，與CD14結(jié)合，啟動(dòng)LPS信號(hào)的細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)［11］，引起預(yù)致敏的巨噬細(xì)胞釋放TNF-α［3］，后者可直接引起胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞的凋亡［12］，導(dǎo)致小鼠流產(chǎn)，提示 CD14是介導(dǎo) LPS激活巨噬細(xì)胞的關(guān)鍵因素。本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，A組孕9天時(shí)，子宮內(nèi)的CD14+巨噬細(xì)胞主要分布在外膜和內(nèi)膜，在肌層內(nèi)幾乎沒(méi)有分布。B組子宮內(nèi)膜和肌層的CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)和陽(yáng)性面積顯著的高于A組，灰度值顯著小于A組，說(shuō)明在LPS刺激后巨噬細(xì)胞CD14分子的表達(dá)增多，高表達(dá)的CD14分子作為巨噬細(xì)胞的重要的模式識(shí)別受體進(jìn)一步介導(dǎo)LPS激活巨噬細(xì)胞，促進(jìn)巨噬細(xì)胞釋放大量的TNF-α。同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，B組小鼠子宮巨噬細(xì)胞CD14表達(dá)增加的同時(shí)伴隨著TNF-α含量顯著升高。B組外膜CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)目與A組無(wú)顯著差異，推測(cè)LPS有誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞從子宮外部向子宮內(nèi)膜遷移的作用，而各雙處理組的內(nèi)膜、肌層CD14+巨噬細(xì)胞數(shù)和陽(yáng)性面積，TNF-α含量均極顯著的低于B組，Daolin Tang［13］用 100 mg/kg 槲皮素處理由 LPS引起的膿毒癥小鼠也發(fā)現(xiàn)血清TNF-α也下降顯著(P＜0．05)。提示一定劑量花旗松素和槲皮素對(duì)孕鼠的前期處理可以減少巨噬細(xì)胞CD14分子的表達(dá)，可能通過(guò)阻斷LPS-LBP/CD14系統(tǒng)，在一定程度阻斷抗原呈遞，達(dá)到減弱LPS對(duì)巨噬細(xì)胞的激活作用。推測(cè)花旗松素和槲皮素對(duì)LPS導(dǎo)致的小鼠流產(chǎn)的保護(hù)作用與降低巨噬細(xì)胞CD14+的表達(dá)、巨噬細(xì)胞從子宮外向子宮內(nèi)膜的遷移能力并抑制TNF-α的分泌有關(guān)。值得關(guān)注的是，用高濃度槲皮素處理的D2組的作用沒(méi)有其它雙處理組顯著，尤其是在對(duì)內(nèi)膜巨噬細(xì)胞遷移和CD14分子表達(dá)的抑制作用較其他雙處理組明顯降低，而高濃度花旗松素對(duì)C2組小鼠子宮內(nèi)膜巨噬細(xì)胞CD14分子表達(dá)的抑制作用較其他雙處理組明顯增強(qiáng)，證實(shí)這種活性單體對(duì)LPS誘導(dǎo)流產(chǎn)小鼠子宮巨噬細(xì)胞有抑制作用，但其作用效果有差別，劑量是其原因之一。中藥具有雙向調(diào)節(jié)作用，在一定的劑量范圍內(nèi)，隨著劑量的增加有的療效會(huì)相應(yīng)提高，有的療效反而下降，甚至顯示出相反的治療作用。此外，除單味藥的劑量對(duì)治療功效的影響外，方劑中君臣佐使的配伍及其劑量比例也是中醫(yī)處方的關(guān)鍵所在，因此，就槲皮素和花旗松素對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用的分子機(jī)理以及與其他有效活性成分配伍之藥效仍需深入研究，對(duì)其作為新型免疫抑制劑提供更詳實(shí)的依據(jù)。

De等［14］的觀察表明，與子宮腺區(qū)相鄰的基蛻膜中，正常妊娠8天很少見(jiàn)到巨噬細(xì)胞，本實(shí)驗(yàn)也觀察到相同的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，B組與A組相比，子宮內(nèi)膜和肌層的α-NAE+巨噬細(xì)胞數(shù)量和陽(yáng)性面積都極顯著增加，說(shuō)明LPS刺激后子宮內(nèi)巨噬細(xì)胞非特異性酯酶的活性顯著增強(qiáng)，使巨噬細(xì)胞水解能力增強(qiáng)，吞噬防御功能增強(qiáng)，而在這過(guò)程中也會(huì)產(chǎn)生大量的炎性細(xì)胞因子而導(dǎo)致流產(chǎn)。除D2組肌層外，其他雙處理組子宮內(nèi)膜和肌層的α-NAE+巨噬細(xì)胞數(shù)量和陽(yáng)性面積與B組相比都極顯著減少，說(shuō)明預(yù)先口服不同濃度的花旗松素和槲皮素可以不同程度地阻止α-NAE+巨噬細(xì)胞由外膜向內(nèi)膜遷移，降低非特異性酯酶的活性，從而減弱由巨噬細(xì)胞引起的炎癥反應(yīng)對(duì)胚胎的不利影響。

綜上所述，花旗松素和槲皮素對(duì)子宮中巨噬細(xì)胞的抑制作用可能是通過(guò)阻止細(xì)胞的遷移、降低其α-NAE+活性和TNF-α的分泌，阻斷LPS-LBP/CD14系統(tǒng)，進(jìn)而在一定程度阻斷抗原呈遞，從而改變子宮免疫耐受的微環(huán)境實(shí)現(xiàn)的。

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